出典:Pacheco-Baltazar, A., et al., Isolated Lung Perfusion System in the Rabbit Model. J. Vis. Exp. (2021).
このビデオは、孤立した肺灌流のためのex vivo技術を示しています。これは、肺移植手順に関与するさまざまな生理学的および病理学的メカニズムの研究を支援する肺研究用のツールです。
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方法論記事
ex vivo肺灌流:ウサギモデルにおける肺研究の手法
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2025年7月8日
この記事について
要約
プロトコル
動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。
1. カニューレ挿入:
- 分離したばかりのウサギの肺を心臓と一緒にペトリ皿の滅菌ガーゼの上に置きます。
- 無気肺を防ぐために、呼気終末陽圧 (PEEP) を 2 cmH2O に設定した陽圧換気を使用して肺を換気します。
- 心室を房室溝のレベルで心臓から切り取ることにより、心室を切除します。
- 2つの心室を開いた後、ウサギ用のOD 4.6 mm肺動脈カニューレをバスケットで肺動脈に導入し、ウサギ用のOD 5.9 mm左心房カニューレをバスケットで僧帽弁を通って左心房に導入します。
- 肺動脈と左心房に4-0シルク縫合糸を使用して、カニューレを固定します。肺動脈と左心房の結紮糸に周囲の組織を含めて、これらの構造の膨張を防ぎます。
- 動脈カニューレから250mLの生理食塩水等張液を注入して、血管床から残りの血液を洗い流します。.
2. 灌流技術:
- セットアップ：
- 孤立した肺を慎重に肺室に入れます。.
- 気管をチャンバーのカバーにあるトランスダクターに取り付けます。
- カニューレを装着した血管....
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開示事項
利益相反は宣言されていません。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 2 ストップ Tygon E-Lab チューブ、内径 3.17 mm 、12/パック、ブラック/ホワイト | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 73-1864 | |
| IPL-4の陽圧換気用アダプター | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4312 | |
| IPL-4の陽圧換気用アダプター | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4312 | |
| IPL-4の代替無圧ガス供給:負の換気中に室内空気とは異なる混合ガスを気管に供給する | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4309 | |
| ウサギから胎児へのブタ分離灌流肺のベースユニット | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4138 | |
| ウシ血清A2:D41アルブミン凍結乾燥粉末 | シグマ | 3912 | 500グラム |
| 塩化カルシウム、CaCl2・2H2O。 | JTベイカー | 10035 04 8 | |
| 極低温バイアル | コーニング | 430659 | 2ミリリットル |
| D-グルコース、C6H12O6。 | シグマ | G5767 | |
| 差圧式低圧トランスデューサ DLP2.5、レンジ +- 2.5 cmH2O、HSE コネクタ | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-3882 | |
| 差圧トランスデューサMPX、範囲+-100 cmH2O、HSEコネクタ | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0064 | |
| エッペンドルフチューブ | |||
| エタノール絶対HPLCグレード | カレドン | ||
| ファルコンチューブ | 14ミリリットル | ||
| ハーバード蠕動ポンプP-230(コントロールボックスとP-230モータードライブ付き) | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒70-7001 | |
| 加熱式リニアニューモタコメーター 0 〜 10 L/min の流量範囲 | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒59-9349 | |
| シングルニューモタコメーター用ヒーターコントローラー 230 VAC、50 Hz | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒59-9703 | |
| ヘパリン | ピサ | 5000 UI | |
| HPLCカラム(C18 100A 5U) | オールテック | 98121213 | 150 mm x 4.6 mm |
| 親水性シリンジフィルター | ミッレクス | SLLGR04NL | 4ミリメートル |
| IPL-4 単離ウサギからブタ胎児への肺コアシステム, 230 | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4296 | |
| IPL-4 Core System for Isolated Rabbit to Fetal Pig Lung, 230 V | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4296 | |
| 緩衝液用ジャケット付きガラスリザーバー、フリットとチューブ付き、6.0 L | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0322 | |
| ラウダサーモスタットサーキュレーター、タイプE-103、230 V / 50 Hz、バス容量3 L、温度範囲20〜150°C | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0125 | |
| 左 アトリウム カニューレ ウサギ用 バスケット付き, OD 5.9 mm | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4162 | |
| 低範囲血圧トランスデューサ P75 ( PLUGSYS モジュール用 | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0020 | |
| 硫酸マグネシウム七水和物、MgSO4・7H2O | JTベイカー | 10034-99-8 | |
| マイクロ遠心チューブ | コーニング | 430909 | |
| IPL-4用圧力調整器付き負圧換気制御オプション | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4298 | |
| ニュージーランドのウサギ | |||
| PISABENTAL(ペントバルビタールナトリウム) | ピサ | 質問番号 7833-215 | |
| PLUGSYSケース、タイプ603* 7 | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0045 | |
| PLUGSYS TCMタイムカウンターモジュール | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 73-1750 | |
| PLUGSYSトランスデューサアンプモジュール(TAM-A) | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-0065 | |
| PLUGSYSトランスデューサアンプモジュール(TAM-D) | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 73-1793 | |
| PLUGSYS VCM-4R 圧力調整器付き換気制御モジュール | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 73-1755 | |
| 塩化カリウム、KCl。 | JTベイカー | 3040-01 | |
| リン酸二水素カリウム、KH2PO4 | JTベイカー | 7778-77-0 | |
| バスケット付きウサギ用肺動脈カニューレ、外径4.6 mm | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4161 | |
| 灌流用サーボコントローラ(SCP | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-2806 | |
| スナップキャップマイクロ遠心チューブ | 共演者 | 3620 | 1.7ミリリットル |
| 重炭酸ナトリウム、NaHCO3 | シグマ | S6014 | |
| 塩化ナトリウム、NaCl。 | シグマ | S9888 | |
| 手術用手袋 No. 7 1/2 | |||
| 手術用手袋 No.8 | |||
| タイゴンチューブ | マスターフレックス | ||
| ウサギ用気管カニューレ、外径5.0 mm | ヒューゴ・ザックス・エレクトロニック (HSE) | 〒73-4163 |
