ブタモデルにおける大槽の位置特定:直接カニューレ挿入のためのブタモデルにおける大槽にアクセスするための外科的方法

要約

出典:Bèchet, N. B., et al. Direct Cannula Implantation in the Cisterna Magna of Pigs. J. Vis. Exp. (2021).

このビデオでは、ブタのモデルで大槽にアクセスする方法について説明します。大槽は、脳脊髄液に関する研究に適した部位です。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 動物の調理法

1. チレタミン(3.75 mg / kg)とゾラゼパム(3.75 mg / kg)およびデクスメデトミジン(37.5 μg / kg)の筋肉内(im)注射により豚を鎮静させます。.それが意識を失うのを待ちます。
2. 20Gのカニューレを耳の静脈に挿入して静脈ラインを準備します.
   手記：カニューレから5〜10mLの生理食塩水を注入して、カニューレが静脈内にあることを確認します。静脈が見落とされている場合、これは耳の組織に小さな浮腫があることで目立ちます。
3. ブタに挿管して、手術中に呼吸数を調節できるようにします。
   手記：ブタの胸部に圧力をかけ、強制的に呼気された空気が挿管チューブから出ていることを確認して、挿管
が成功していることを確認します。
4. 挿管チューブを呼吸数14回/分に設定された人工呼吸器に取り付けます。
5. パルスオキシメータとカフをテールに接続して、心拍数(HR)、血圧(BP)、酸素飽和度(SATS)を監視します。直腸体温計を挿入して、コア温度を監視します。
6. 生理食塩水にケタミン(5 mg / kg / min)、ミダゾラム(0.25 mg / kg / min)、およびフェンタニル(2.5 μg / kg / min)のIVバッグを準備し、約2滴/ s.
   で耳静脈から注入を開始します 手記：手術中、動物のバイタルに基づいて注入速度を増減する必要がある場合があります。
7. ブタを腹臥位にして、動物の頭と首の後ろを触診して、最初の胸椎の後頭と背骨、および各耳の基部を見つけて印を付けます。
8. 縦軸に沿って稜と椎骨の間に直線を引きます。頭蓋骨の基部に沿って、紋章から各耳の付け根まで2本の線を引きます(図1A)。
9. 尾を注意深く締め、尾の反射がないことを確認して、動物が深い眠りに落ちていることを確認してください
   手記：動物がまだ反射性である場合は、動物が反射を示さなくなるまで、麻酔薬の注入速度を段階的に増加させる必要があります。

2. 手術

>注:手術中、光の出血を吸引し、切断された血管を焼灼するために、少なくとも1人のアシスタントが必要です。

1. #21ブレードのメスを使用して、縦線に沿って筋肉まで真皮切開を行います。
2. 肩に沿ってさらに長さ10〜15cmの2つの垂直な真皮切開を伸ばします。
3. 後頭頂部から、各耳の付け根まで線に沿って真皮切開を行います。
4. 解剖学的鉗子で後頭頂部に形成された皮膚の角をつかみ、メスの刃を筋膜上に軽く走らせ、吻側から尾側に移動することにより、皮膚を下側の筋肉から慎重に分離します。5つの切開のそれぞれに続いて皮膚を切除すると、僧帽筋の一部が見えるようになります。
5. メスで縦方向に切開し、深さ約1 cm、僧帽筋が正中線で集まる場所
   手記：筋肉を切開すると、出血する傾向が高まるため、焼灼器は準備ができている必要があります。大きな血管が切断された場合、1人はガーゼですばやく圧縮し、もう1人は焼灼器を使用する必要があります。
6. 直線と湾曲した外科用鉗子の組み合わせを使用して、筋肉の縦方向の切り傷に沿って鈍的解剖を行います。これにより、僧帽筋の腹と、その下にある頭頭半棘筋の筋肉が分離されます。
7. 持続する筋線維をメスで切断し、半棘筋が見えるようになるまで鈍的解剖を続けます。
8. 頭蓋骨の後面に沿って僧帽筋と頭頂半棘筋の起点を切断します。メスで縦方向に慎重に分離し、半棘筋が完全に見えるまで鈍い解剖を行います。
9. 自己保持リトラクターを使用して、僧帽筋と頭半棘筋の二本筋を引っ込めます。
10. 半棘筋の腹が正中線で集まるところで、メスで約1cmの深さの縦方向に切開します
    手記：ここで追加の出血に注意してください。出血は、綿棒と焼灼の組み合わせを使用して管理できます。
11. 外科用鉗子を使用して、アトラスの背側側面(CI)が触知可能になるまで、筋肉腹の間の縦方向の切り口に沿って鈍的解剖を行います。
12. 頭蓋骨の後面に沿って頭蓋骨半棘筋の起始を切断し、メスと鈍的解剖によって下にある椎骨から縦方向に分離します。
13. 半棘筋の頭筋を、別の自己保持リトラクターのセットを使用して引っ込めます。
14. メスを使用して、アトラスが頭蓋骨の基部と出会う領域を覆っている残りの組織を慎重に取り除きます。
15. 片方の腕を動物の首の下に置き、片方の指をアトラスと頭蓋骨の接合部に置き、同時に頭を持ち上げ、首を曲げながら指で触診し、もう一方の手で大槽を露出させます
    手記：大槽は、触診すると、指で圧力が解放されると少量の反発を伴う強力な弾性構造として認識できます。

結果

図 1.ブタの槽マグナカニューレ挿入。(A) 手術開始前に準備された豚は、後頭頂部 (OC) から始まり、次に胸椎 (TV) の後方、および各耳基部 (EB) の外側に真皮切開が行われる場所にマークされています。(B)僧帽筋、半棘筋、半棘筋筋、半棘筋複合体筋が引っ込められた状態でリラックスした位置に頭を置き、大槽(CM)を露出させます。(C)カニューレ挿入と注射のためのCMへのアクセスを増やすために、ヘッドを手動で曲げます。(D)注射後にCMに挿入され、歯科用セメント(DC)で所定の位置に固定されたカニューレのクローズアップ画像。(E)それぞれ、構造的な白色光画像を伴う蛍光イメージング後の背側、腹側、および外側の脳表面。これらの...

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
解剖学的鉗子	NAの	NAの
マーカーペン	NAの	NAの
No. 21 メスの刃	アグントス	BB521
No.4メスのハンドル	アグントス	10004-13
自己保持型リトラクター	NAの	NAの
外科用鉗子	NAの	NAの