ウサギのてんかん異常のマルチシステムモニタリング:誘発発作中の同時ビデオEEG,ECG,カプノグラフィー,および酸素濃度計記録の方法

要約

出典:Bosinski, C., et al. 意識のある拘束ウサギの発作、不整脈、無呼吸の同定のためのマルチシステムモニタリング。

この動画では、てんかん薬の静脈注射中の神経学的および心肺異常を評価するためのマルチシステムモニタリング方法を紹介します。ビデオEEG、ECG、酸素濃度計、カプノグラフィーのパラメータを同時にモニタリングすることで、てんかん発作に伴うリアルタイムの生理学的変化を理解することができます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. ウサギが拘束具に順応し、研究者が心肺速度の安定化を客観的に確認できるようにするために、すべてのウサギに心肺センサーとニューロンセンサーを装着し、1匹あたり1時間、1〜3回、>1時間連続ビデオモニタリングを行います。

2. 投薬実験(ペンチレンテトラゾール、PTZ)

1. 辺縁耳静脈を視覚化するには、ウサギの耳の後面を剃ります。70%エタノールワイプを使用して部位を消毒し、辺縁耳静脈を拡張します。.これは、図 1F の黒い破線の楕円で示されています。
2. この時点で、1人の実験者にウサギの顔を手で覆ってもらい、ウサギへの施術のストレスを軽減します。2 人目の実験者は、滅菌済みの 25-G 血管カテーテルを使用して、辺縁耳静脈を慎重にカニューレ挿入します。
3. カテーテルが静脈に入ったら、カテーテルの端に滅菌注射プラグを配置して、針が薬を静脈内導入できるようにします。インジェクションプラグの位置は、図1Gの青い円で示されています。
4. 4×4インチのガーゼをテープで包んで筒状にし、ウサギの耳の中に入れて添え木を作ります。次に、スプリントを耳にテープで固定し、カテーテルを装着していない耳と同様に、カテーテルが所定の位置に固定され、直立したままになるようにします。
5. ヘパリン食塩水1 mLあたり10 USPユニットを1 mL注入します。
   手記：カテーテルと血管は目に見える形で空気が取り除かれ、特許が保たれている必要があります。カテーテルが血管内にない場合、シリンジは簡単に押されず、皮下組織に生理食塩水が蓄積します。
6. ウサギにPTZの増分用量を1 mg / kgから10 mg / kgまで10分ごとに1 mg / kg刻みで静脈内投与します。各用量の開始時に、どの動物が注射されているか、および薬の濃度を示すためにメモを取ります。
   手記：これにより、PTZ投与の急性および相加的な影響の評価が可能になります。あるいは、低用量PTZの慢性的な影響をさらに評価するために、ウサギに各低用量濃度で反復投与、2 mg / kgで7回、5 mg / kgで3回、次に10 mg / kgで3回投与し、各用量を10分間隔で投与します。
7. 各投与後、神経心臓の電気的および呼吸器的異常、およびてんかん様活動の視覚的証拠がないか、ビデオ-EEG-ECG-カプノグラフィー-酸素濃度測定を注意深く監視します。.これらの変化は、リアルタイムおよび解析後に記録してください.
   手記：発作活動は、PTZ投与から60秒以内に開始されることがよくあります。

結果

図1:機器に接続されたウサギ。(A)ECG電極の位置、左腕は黄色の点で示されています。右腕は白い点で示されています。左脚は赤い点で示されます。右脚の前方の地面は緑色の点で示されています。(B)ECGおよびEEG電極が取り付けられた拘束具のウサギ。(C)ウサギの下のブースター、ネックフォーム、カットされたPVCパイプなど、小さなウサギに対応するために適切な変更を加えた拘束具に入った幼ウサギ。(D)脳波電極の位置を持つ拘束されたウサギ。右正面はオレンジ色の点で示されます。左前頭は赤い点で示されます。右後頭部は黄色の点で示されます。左後頭部は青い点で示されます。参照は黒い点で示されます。(E)光刺激装置とミラーブースのセットアップを備...

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
0.9%塩化ナトリウム灌漑、USP-フレコン	ファイザー(ホスピーラ)	7983-09	希釈剤
10ccルアーロックシリンジ、20G x 1インチニードル付き	サーベット	SS-10L2025	薬物注射後のフラッシュとして使用されます
4x4ガーゼスポンジ	フィッシャーサイエンティフィック	22-415-469	血管カテーテルで耳をスプリントするためにチューブに巻かれ
コンピュータ	谷間	オプティプレックス 5040	データ収集用コンピュータ
ECG電極	リズムリンク	RLSND116-2.5	13mm 35°曲げ(直径0.4mm)皮下ピン電極
EEG電極	リズムリンク	RLSP513	5ツイスト13mmストレート(直径0.4mm)皮下ピン電極
EEGLAB(2020年)	Swartz Center for Computational Neuroscience(スワーツ計算神経科学センター)	オープンアクセス	脳波のスペクトル解析が可能
イーサネット/イーサネット・アダプター	リンクシス	USB3G16	カメラをコンピューターに接続するためのアダプター
ヘパリンロックフラッシュ	メドライン	EMZ50051240	血管カテーテルの開存性を維持するため
IRライト	ボッシュ	EX12LED-3BD-8W	暗闇での録音を容易にします
LabChart Pro(2019、バージョン8.1.16)	ADInstruments	該当なし	ECG分析
JELCO PROTECTIV Safety I.V. カテーテル、25 ゲージ	スミスメディカル	3060	辺縁耳静脈をカテーテル化するために使用されます
MATLAB (R2019b、アップデート 5)	MathWorksの	該当なし	EEGLABの実行に必要
マイク	ソニーステレオ	ECM-D570Pの	発作の可聴症状の記録
マイクロポア医療用テープ、紙、ホワイト	3メートル	1530年1	ワイヤーを固定し、イヤースプリントを作成するために使用されます
ナタスニューロワークス	ナトゥス	LC101-8	取得およびレビューソフトウェア
ペンチレンテトラゾール(1 - 10 mg / kg、常に1mLの容量)	シグマ・アルドリッチ	88580	生理食塩水で調製した希釈液
量子増幅器	ナトゥス	13926	アンプ/デジタイザ
クォンタムヘッドボックスアンプ	ナトゥス	22134	64ピンブレークアウトボックス
ウサギの拘束具	プラスラボ	501-TC	この研究では、6インチ x 18インチ x 6インチ
SpO2イヤークリップ	ノニン	61000	ピュアSAT/SpO2
SpO2センサーアダプター	ノニン	13931	XPODピュアSAT / SpO2
SRG-X120 1080p PTZカメラ、HDMI、IP、3G-SDI出力付き	ソニー	SRG-X120	インペラカメラ
テルモ Sur-Vet ツベルクリン シリンジ 1cc 25G X 5/8" レギュラー ルアー	サーベット	13882	静脈内薬の注射に使用されます
獣医用注射用プラグ Luer Lock	サーベット	SRIP2Vの	静脈内投薬用の針を挿入するための注射プラグ
Webcol アルコール調製、滅菌、大型、2層	コヴィディエン	5110	カテーテル挿入前に耳の静脈を準備するには

シリーズ ます 名 月 の 。 名