出典: Boice, E. N., Snider, E. J. Anterior Segment Organ Culture Platform for Tracking Open Globe Injuries and Therapeutic Performance. J. Vis. Exp. (2021).
この動画では、ブタの眼から角膜を持つ前眼部の培養方法を実演します。この培養システムは、眼の損傷を研究するための実験モデルとして機能します。
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方法論記事
前眼部培養:豚眼の前部を有する角膜を培養する方法
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2025年7月8日
この記事について
要約
プロトコル
動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。
1. 臓器培養皿の前眼部の設定
- ASを反転させた(カップアップ)ペトリ皿に単一の前部セグメント(AS)を置きます。綿棒を使用して、メディアで濡らし、角膜の中央を軽くたたいて色素を取り除きます。鉗子を使用して目を保持し、同じ綿棒を使用して、強膜の周りの綿棒を拭いて余分な色素を取り除きます。
- ASを反転させ、皿の底部の上部に隆起した領域の上に置き、角膜を皿の隆起した領域の中央に置きます。clをamp新しく配置されたASの上にリング を置きます。
- 対応する穴に4本のネジを取り付けて、リングを所定の位置に保持し、ASをリングの下に固定します。Lキーでネジをそっと手で締めます.
手記：締め付けステップは実験全体を通して毎日行われるため、ここでの最初の締め付けの目標は、クランプリングが壊れないようにしながら、メディアが漏れないようにすることです。 - 滅菌ペトリ皿セットで、上部を皿の上に置き、セットアップを反転させます。ディッシュスタンドを取り付けます。Oリング付きの流体コネクタを皿底のネジ付きポートに取り付けます。
- 1つの流体コネクタに、18 G 90°曲げニードルハブ、長さのチューブ、18 Gニードルハブ、ナイロンシリンジフィルター、....
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開示事項
利益相反は宣言されていません。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 10-32ポリカーボネートストレートプラグ、オスネジパイプコネクタ | マクマスター・カー | 51525K431 | |
| 10-32ソケットキャップネジ、1/2インチ | マクマスター・カー | 92196A269 | |
| 10 mLシリンジ | BDの | 302995 | |
| 20 mLシリンジ | BDの | 302830 | |
| アンチアンチ | ギブコ | 15240-096 | |
| ボールエンドLキー | マクマスター・カー | 5020A25 | |
| BD Intramedic PE 160 チューブ | フィッシャーサイエンティフィック | 14-170-12E | |
| 綿棒 | ピューリタン | 25-8061WC | |
| DMEMメディア | ATCCの | 2002年30月 | |
| FBSの | ATCCの | 2020年30月 | |
| 細い鉗子 | 世界の精密機器 | 15914 | |
| グルタマックス | ギブコ | 35050-061 | |
| 高温シリコンOリング、幅2 mm、内径4 mm | マクマスター・カー | 5233T47 | |
| ネイル(穿刺物) | マクマスター・カー | 97808A503 | |
| ナイロンシリンジフィルター | 漁夫 | 09-719C | |
| PBSの | ギブコ | 〒10010-023 | |
| ポリカーボネート製、三方、オス型ルアーロック付きストップコック | 漁夫 | NC9593742 | |
| ステンレス鋼18 G 90度角度ディスペンシングニードル | マクマスター・カー | 75165A81 | |
| ステンレス鋼18Gストレート1/2 ''ディスペンス針 | マクマスター・カー | 75165A675 |
