動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。
この研究は、体重約40kgの生後3ヶ月のブタ6頭(ドイツ在来種)で行われました。動物は、実験の少なくとも7日前に動物飼育施設に連れてこられ、動物福祉の推奨事項に従って収容されました。動物には自由に餌と水が与えられ、その健康状態は担当の獣医師によって定期的に評価されました。実験前に12時間の空腹時を維持しました。実験手順全体と動物の取り扱いは、担当の獣医師によって監督されました。
1. 麻酔導入と麻酔の維持
- 麻酔導入と麻酔の維持のために、動物を前投薬し、筋肉内注射とそれに続く静脈注射を使用して深く鎮静させ、必要に応じて気管内挿管を行います。その後、揮発性麻酔薬と継続的なオピオイド塗布の組み合わせを使用し、追加のオピオイドボーラス注射で補完することにより、麻酔を誘発および維持します。
- 前投薬と鎮静のために、ケタミン 20 mg・kg-1、アザペロン 4 mg・kg-1、ミダゾラム 0.1 mg・kg-1 の筋肉内注射を行います。
2. プローブの配置
- 動物を右の横向きの位置に置き、動物の背中を曲げて椎骨の間のスペースを広げます。
- 脳脊髄圧を測定および制御するための脳脊髄液ドレナージの経皮的配置の場合、L 4/5またはL 5/6のレベルを特定し、イントロデューサー針で皮膚と皮下腔を穿刺し、インレー針を取り外します。
- 生理食塩水入りシリンジを針に置き、液体入りシリンジに一定の圧力で針を慎重に導入します。
- 硬膜外位置の証拠として抵抗の喪失が感じられたら、インレイ針を再度導入し、さらに2〜3 mm針を導入して硬膜に穴を開け、インレイ針を取り外します。
- 透明な液を素早く滴下することにより、髄腔内の位置を確認します。深さ20cmまでの排水路を導入し、ルアーロックアダプターを取り付け、酒を慎重に吸引して位置を確認します。
- ドレナージを縫合糸で慎重に固定し、脳脊髄液ドレナージシステムに接続します。