出典:Honkanen, R. A., et al. Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (2020).
このビデオでは、ウサギの目から瞬膜を取り除く外科的処置を実演しています。
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方法論記事
Nictitating Membraneの除去:ウサギの目からNictitating膜を除去するための外科的処置
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2025年7月8日
この記事について
要約
プロトコル
動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。
1. 瞬膜の除去
>注:簡単にするために、右目のテクニックを以下に説明します。この手順を左目でも同じ方法で完了します。順化期間中(通常は最初の1週間)に瞬膜を両側に除去します。
- ウサギを適切なサイズの拘束袋に入れます。
- ウサギを鎮静するために、1 ccの注射器と26 Gの針を使用して、アセプロマジン(1 mg / kg)の皮下注射を肩に投与します。.この軽度の鎮静のエンドポイントは、動物が通常のスキャン動作なしでリラックスした頭の位置を維持し、耳が完全に直立しなくなったときです。
- マイクロピペットを使用して、防腐剤を含まないリドカイン25μL(1%)を眼に塗布します。まぶたの間にワイヤー蓋鏡を挿入します。
- 0.3鉗子(または同等のもの)で瞬膜の頂点をつかみ、角膜表面上に引っ張ります。.1%リドカインと1:100,000エピネフリンを、26Gの針を使用して瞬膜の結膜下腔に注入します。.約0.3mLを注入して、瞬膜上に適度なサイズのブレブを形成します。.1 mLを超える注射量は、ウサギの安全な用量範囲(2-4 mg / kg)内に十分収まっています。.
- ワイヤー鏡を取り外します。リドカインとエピネフリンが効果を発揮するまで約5分待ちます。.この間、仲間の目で同じ手順を実行します。
- ワイヤー蓋の鏡を交換してください。0.3鉗子を使用して、角膜を角膜表面上につかみ、伸ばします。腱切開術用ハサミまたは同等のものでメンブレンの基部を切断します
手記：出血は通常最小限ですが、高温のバッテリー焼灼ユニットを近くに置き、出血を最小限に抑えるために必要に応じて使用してください。瞬膜のカットベースに直接圧力をかけることで、小さな出血が発生した場合にそれを止めることもできます。 - ワイヤー蓋の鏡を取り外します。局所抗生物質軟膏(ネオマイシン、ポリミキシン、バシトラシン、ヒドロコルチゾン)を角膜表面に置きます。.
- プロトコルで示されているように、仲間の目と同じ手順を実行します。
- 動物を個々のケージに戻し、少なくとも1週間、または臨床的観点から結膜表面が完全に治癒するまで治癒させてから、さらなるアッセイや介入を行う前に
手記：完全な臨床的治癒は、結膜表面からの腫れ、注射、または分泌物の欠如によって示されます。動物は、保護眼瞼下垂がなくても、正常に目を開けておく必要があります。
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開示事項
利益相反は宣言されていません。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| アセプロマジン、アセプロインジ | ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス、オハイオ州ダブリン | NDC11695-0079-8 | ウサギの鎮静のための0.1ml / kg皮下注射 |
| 動物拘束袋 | ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス、オハイオ州ダブリン | ジョルベットJ0170 | 適切なサイズのバッグを使用してください。 |
| 焼灼ユニット, 高温, バッテリー式 | Medline Industries Inc、イリノイ州ノースフィールド | 参照ESCT001 | 出血の場合に備えて手元に置いておく、プロトコル2.7 |
| 鉗子、0.3 | ボシュロム(ストルツ)、ニュージャージー州ブリッジウォーター | ET6319 | 瞬膜の除去、プロトコル2.5 |
| 蓋用鏡、ワイヤー | ボシュロム(ストルツ)、ニュージャージー州ブリッジウォーター | バラカー SUH01 | 瞬膜の除去、プロトコル2.4 |
| リドカイン 2% とエピネフリン 1:100,000; 50:50 の混合物 | Hospira Inc、イリノイ州レイクフォレスト | NDC番号 0409-3182-02 | 瞬光膜を除去する前に前処理する、プロトコル2.4 |
| リドカイン、防腐剤不使用 | シグマ・アルドリッチ、ミズーリ州セントルイス | L5647 | 麻酔剤のPBSで1%、眼への適用用、プロトコル2.4 |
| マイクロピペット | エッペンドルフ | リサーチプラス 100 uL | 防腐剤を含まないリドカインの眼への適用、プロトコル2.4 |
| マイクロピペットのヒント | ワールドワイドメディカルプロダクツ | 41071052 | 防腐剤を含まないリドカインの眼への適用、プロトコル2.4 |
| 針, 26ゲージ | BD、フランクリンレイクス、ニュージャージー州 | 参照305115 | リドカイン/エピネフリンの注射用、プロトコル 2.3 & 2.5 |
| ウサギ、ニュージーランドホワイト | Charles River Labs、マサチューセッツ州ウォルサム(NZW) | 2-3キロ | 研究動物 |
| はさみ、ウェストコット腱切開術 | McKesson Medical-Surgical、カリフォルニア州サンフランシスコ | ミルテックス 18-1480 | 瞬膜の除去、プロトコル2.7 |
| シリンジ、1 cc | BD、フランクリンレイクス、ニュージャージー州 | 参照309659 | リドカイン/エピネフリンの注射用、プロトコル 2.3 & 2.5 |
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