上涙腺の除去:ウサギモデルから上涙腺の眼瞼および眼窩部分を除去する外科的技術

要約

出典:Honkanen, R. A. et al., Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (2020).

このビデオでは、ウサギから上涙腺の眼瞼と眼窩の2つの部分を切除し、ドライアイ疾患のモデルを作成する外科的処置について説明しています。このウサギモデルは、眼表面の恒常性、病態生理学、眼科治療の研究に適しています。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

上記のように皮下アセプロマジン(1 mg / kg)を含む拘束バッグに入れられた、体重2〜3 kgのニュージーランドホワイト(NZW)ウサギを使用してください。頭蓋骨の顔面と背側表面の毛皮をすべて取り除き、手術のランドマークを視覚化します。カッティングシャーで毛皮をトリミングし、長さ約1mmの細かい毛皮を残します。製造元の指示に従って、マイルドな脱毛クリームを使用して、残っているすべての毛皮を取り除きます。.

1. OSLGの削除

1. 切開部位(外科的マーキング、ペンライン、上後眼瞼)に、2%リドカインと1:100,000エピネフリン、0.5%ブピバカインの50:50の混合物を、30G針付きの5ccシリンジを使用して浸潤します(図1A).
   手記：シリンジと針のサイズは重要ではありません。
2. 電気外科ユニットに接続されたコロラド針を使用して、外科的マーキングに沿って皮膚を切開します。設定は臨床反応によって異なり、通常、切開と凝固の両方で10〜15単位です(図1B)。
3. 皮膚の切開部に反対の張力をかけて組織を分離し、その下にある前頭蓋筋線維を露出させます。
4. OSLGの視覚化を助けるために、地球に内側の圧力を加えます。これは、前頭蓋筋線維のすぐ内側または深部に位置する膨らんだ組織として見られます。必要に応じて、これらの筋線維を横に動かして、下にあるインフラストラクチャを露出させます。
5. 歯付き鉗子(0.3)と嚢切開ハサミを使用して、OSLGを覆っている線維性カプセルを静かに引っ込めて切断します。OSLGは通常、淡い黄褐色をしています(図1C)。
6. 歯のある鉗子または歯のない鉗子を使用して、OSLG腺組織をつかみ、「ハンドオーバーハンド」技術を使用して上耳からそっと引き出します。嚢切開ハサミを使用して小さな繊維状のバンドを切断し、腺を軌道上の位置から解放します(図1D).
   手記：OSLG腺組織が除去されると、大きな管状の構造(主排泄管)に合体し始めます。
7. 腺ができるだけ完全に取り除かれたら、コロラド針でたっぷりの焼灼を使用して組織炭を作り、陰茎内の腺をできるだけ深く切り詰めます。これは、後にPSLGの撤去時に確認のランドマークとして機能します。

2. PSLGの削除。

1. 綿の先端のアプリケーターを使用して上まぶたをエバートします。PSLGの球根状の端は通常、簡単に見ることができます
   手記：一部の解剖学的解剖では、主要な排泄管を幅約1mmまたは2mmの淡い線形構造として視覚化できる場合があります。
2. PSLGを歯付き鉗子(0.3)でかみ合わせ、まぶたの表面から引っ込めながら、嚢切開はさみを使用して基部の周りを切断し、下にある足根から分離します(図2A)。
3. モノポーラ焼灼で中程度の出血を制御します。
4. 分離された組織に連続的な牽引力を加えて、解剖のための組織面を維持します。これにより、SLGの主要な排泄ダクトも取り外すことができます(図2B).
   手記：解剖が行われると、通常、上眼窩縁に進み、より優れた内側に位置するOSLGの除去から残された焼灼痕を見ることができます。

結果

図1:OSLGの取り外し。(A) 手術部位には、2% リドカインと 1:100,000 エピネフリン、および 0.5% ブピバカインの 50:50 の組み合わせを使用して麻酔薬を浸潤します。これは、手術中の不快感を最小限に抑えるために、上まぶたと切開線に沿って注射されます。(B)コロラドマイクロダイセクション針を使用して、事前にマークされた外科的切開部位に沿って皮膚と表在筋層を切開します。傷口を優しく牽引することで、解剖面を作り出すことができます。小さなピンポイントの火傷(矢印)は、切開線に沿った等距離の点でコロラド針を使用して行われ、創傷閉鎖中に組織を最適に再調整するのに役立ちます。(C)OSLGは、後部陰部を覆う組織が動員された後に露出します(矢印)。腺のカプセルが切開されています。OSLG...

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
アセプロマジン、アセプロインジ	ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス、オハイオ州ダブリン	NDC11695-0079-8	ウサギの鎮静のための0.1ml / kg皮下注射
動物拘束袋	ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス、オハイオ州ダブリン	ジョルベットJ0170	適切なサイズのバッグを使用してください。
ブピバカイン、0.5%	Hospira Inc、イリノイ州レイクフォレスト	NDC:0409-1162-02	切開部位の浸潤のために、2% リドカインと 1:100,000 エピネフリンを 50:50 で混合します。
コロラド針	Stryker Craniomaxillofacial、カラマズー、ミシガン	N103Aの	電気メスと併用して切開を行う
モノポーラ焼灼版電気メス	Valleylab、コロラド州ボルダー	フォース FXc	電気メスと併用して切開を行う
鉗子、ハーモン司教	ボシュロム(ストルツ)、ブリッジウォーター	ニュージャージー州 E1500-C	涙腺切除術に歯付き鉗子を使用する
針, 30ゲージ	BD、フランクリンレイクス、ニュージャージー州	参照305106	切開部位の浸潤の場合、シリンジと針のサイズは重要ではありません
ウサギ、ニュージーランドホワイト	Charles River Labs、マサチューセッツ州ウォルサム	(ニュージーランド) 2-3キロ	研究動物
はさみ、ヴァンナス・マッケソン	Medical-Surgical、カリフォルニア州サンフランシスコ	ミルテックス2-130	曹腸切除術のための嚢切開術用ハサミ
シリンジ、5 cc	BD、フランクリンレイクス、ニュージャージー州	参照309603	切開部位の浸潤の場合、シリンジと針のサイズは重要ではありません

州