血管造影による血管灌流の評価:ウサギモデルにおける血管灌流を可視化するための下行大動脈に造影剤を導入する技術

要約

出典:Sligar, A. D et al., Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits. J. Vis. Exp. (2019).

このビデオでは、ウサギモデルで下行大動脈に造影剤を注入して血管灌流を視覚化する血管造影を行う手法について説明しています。この技術は、閉塞した血管内および治療後の回復中の灌流を理解するのに役立ちます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 手術のためのウサギの準備

1. 皮下注射により、20〜40 mg / kgのケタミンと2 mg / kgのミダゾラムを使用してウサギに麻酔をかけます。.マスクを使用して、最初の鎮静中、ウサギを1.5%〜3%のイソフルラン(通常は2%)に置きます。.麻酔を維持するために、3 mg / kgの筋肉内注射を介してアルファキサロンを注射します。
2. 麻酔をかけたら、マスクを取り外し、カフ付きの気管内チューブを気道に挿入し、人工呼吸器に接続します。イソフルランを1.5%〜3%で投与し続けます。.
3. ベースライン化学パネルのために、どちらかの耳から中央動脈から血液を採取します。
4. 22 Gの耳静脈カテーテルを外側耳静脈に配置して、外科的処置全体を通して乳酸リンガー液を点滴します。.あるいは、生理食塩水(0.9%塩化ナトリウム)を使用することもできます。
5. 反対側の耳の側静脈を使用して、静脈にカテーテルを配置し、6 mg / kg / hでアルファキサロンを送達します。準備期間中にイソフルランを0.6%に減らしながら、アルファキサロンを8 mg / kg / hに徐々に増やします。.
6. 痛みと感染のリスクを制限するために、ブプレノルフィン(0.01 mg / kg)とエンロフロキサシン(5 mg / kg)を25 G針による皮下注射を使用して投与します。.
7. 首、左右の内側の太もも、背中の毛をバリカン(#40ブレード)で整えます。接地パッドとの接触を維持するために、背面から髪の毛を取り除きます。
8. 各後肢に血圧計カフを装着し、初期血圧を測定します。カフを膝のすぐ下に配置し、プローブを側面のホックのすぐ上に置きます。
9. ウサギを手術台に仰向けに置き、手術部位をこすってドレープします。これには、頸動脈アクセス用の首と大腿動脈アクセス用の右大腿部の内側が含まれます。2%クロルヘキシジンと70%エチルアルコールを交互にスクラブして滅菌スクラブを実行します。これを3回繰り返してから、2%クロルヘキシジン溶液を最後にスプレーします。
10. 血管造影測定時のサイズ基準として役立つように、大腿部の上部近くの右(スクラブ)脚の上部にある低密度ポリエチレンバッグ内に滅菌した3mmのステンレス鋼ボールを置きます。手術の時まで、脚に滅菌ドレープを敷きます。最初の血管造影では、ボールを滅菌ビニール袋の中に置いておきます。

2. 血管造影

1. 右総頸動脈を露出させます
   1. #15ブレード付きのメスを使用して、気管のすぐ外側に4〜5cmの長さの切開を行います。
   2. 鈍的解剖を使用して頸動脈を露出させ、小さなWeitlanerリトラクターを使用して切開を開きます。頸動脈を頸静脈と迷走神経から慎重に分離します。通常、鈍的解剖には、湾曲したメッツェンバウムはさみと湾曲した蚊止血剤が使用されます。結紮糸が動脈を結紮するだけであるように、頸動脈を神経および頸静脈から完全に分離するようにしてください。
2. 露出した動脈の近位端と遠位端に4-0シルク縫合糸を使用して結紮糸を配置します。頸動脈の遠位端を外科医の結び目で結び、続いて4つの正方形の結び目で結びます。近位端では、リガループを使用して、必要に応じて締めたり緩めたりできるようにします。露出した動脈の近位端に配置されたリガループを使用すると、イントロデューサーとカテーテルを固定するのに役立ちます。
3. IVを通じて500IUのヘパリンを投与します。露出した頸動脈に沿って約0.5 mLの1%リドカインを適用して、血管を拡張します。.通常は1回の治療で十分ですが、必要に応じて繰り返すことができます。メスまたは虹彩ハサミを使用して頸動脈の約半分を切断し、4インチのワイヤー挿入ツールを動脈に挿入します。
4. 0.014インチ×185cmのガイドワイヤーを挿入ツールを通して、下行大動脈の腸骨稜にある大動脈分岐部に送ります。挿入ツールを取り外し、ワイヤー上に3Fピグテール血管造影カテーテルを挿入します。
5. ピグテールカテーテルを、下行大動脈の腸骨稜で大動脈分岐部に近位 2 cm になるように進めます。
6. カテーテルの先端を第7腰椎と第1仙椎の間に配置します。2〜4mLの造影剤を手動で注入して、カテーテルの位置をテストします。
7. カテーテルを通して100μgのニトログリセリンの動脈内注射を投与して、血管拡張を増加させます。
8. 0.8 mLの1%リドカインをカテーテルを介してウサギに投与し、血管造影中の血管拡張を支援します。.インジェクターのチューブをカテーテルに取り付け、ライン内の気泡を取り除きます。カテーテルを通して自動血管造影インジェクターを使用して造影剤を8〜9mL注入します。
9. 血管造影を使用して後肢の連続画像を記録します。
   1. パワーインジェクターをコントラストを3mL /秒で合計8〜9mL注入するように設定します。デジタル減算血管造影を 6 フレーム/秒で実行します。
   2. 作成したシリアル画像を選択し、各血管造影の写真を約-40%の設定で変更することで、骨の出現を最小限に抑え、コントラストのある血管灌流の全体像を撮影します。大腿動脈結紮/切除後の血管流の血管造影の例を図1に示します。

結果

図1:大腿動脈結紮および切除後70日間の糖尿病および非糖尿病ウサギの手術前、手術後、および回復後の後肢の血管造影。 (B)結紮部位の虚血性肢の拡大画像。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
血管造影機器	東芝	インフィニクス-i
ガイドワイヤー	ボストン・サイエンティフィック	39122から01
挿入ツール	メリットメディカルシステムズ	マップ550	金属線挿入工具
リドカイン	マッケソンメディカルサージカル	239936
リガループ	V.ミューラー	CH117 / CH116	ホワイトミニ / イエローミニ
ピッグテールカテーテル	メリットメディカルシステムズ	1310-21-0053	3F ピグテール
シルク縫合糸	エチコン・ジョンソン・エンド・ジョンソン	A183H型	4-0シルクネクタイ18インチ
シリンジポンプ	DRE獣医		バーサフロー VF-300
Visipaque 造影剤	マッケソンメディカルサージカル	509055
血管造影インジェクター	メドラッド