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動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。
1. 麻酔と挿管
- 動物(生後3か月のニュージーランドの白ウサギ(雄または雌)、体重各~2.5 kg)をケタミン(25 mg / kg、50 mg / mL、0.5 mL / kg)+キシラジン(3 mg / kg、20 mg / mL、0.15 mL / kg)の筋肉内(IM)注射で鎮静します。.動物が眠るまで~20分待ちます
深く(完全な筋肉のatony).
手記:この前投薬により、シンプルで迅速、かつ痛みのない挿管プロセスが可能になります。深部鎮痛と麻酔は、ステップ 1.1.8 で説明されているように誘発されます。
- 静脈内(IV)カニューレを耳から辺縁静脈に留置し、挿管が完了するまで閉じたままにします。
手記:このIVラインは、深部鎮痛と麻酔のためにそれぞれフェンタニルとプロポフォールを灌流するのに役立ちます(ステップ1.8を参照)。
- 挿管が行われるまで、純酸素中に5%セボフルランを供給することにより麻酔を維持します.
手記:このステップは、動物が覚醒の兆候(眼球運動、筋肉の収縮)を示している場合にのみ必要です。
- 10%リドカインを噴霧して気管を局所的に麻酔します。.ウサギを腹臥位に置き、頭を垂直に伸ばした状態に保ちます。
- 小径(2.5 mm)の最初の気管内チューブをウサギの気管にスライドさせ、チューブ内の空気の流れが聞こえるようにします。これにより、喉頭が開き、決定的なチューブの挿入が容易になります。
- チューブにガイド(挿管カテーテル)を挿入して、チューブの位置を気管に固定します。小径チューブを取り外し、決定的な気管内チューブ(4.9 mm)をガイドにスライドさせます。
- ガイドを取り外し、気管内チューブの端にあるバルーンを膨らませて、デバイスを気管に密封してブロックします。チューブは所定の位置に留まりますが、額に巻いたレースを使用して固定できます。動物を直ちに換気します(7 mL/kg、頻度40/分)3%セボフルランを純粋な酸素に含ませます。
- 鎮痛を誘発するためにフェンタニル(0.01 mg / mL、2〜4 mL / h)を連続的に灌流し、麻酔を誘発するために2〜4 mg / kg(2%)プロポフォール(20 mg / mL、4〜8 mL / h)を、等容積条件を維持するために4 mL / kg / hの酢酸リンガーを連続的に灌流します。
- 直腸温プローブを置きます。また、プロセス全体で心機能、体温、酸素飽和度を監視します。
- 自律呼吸をモニタリングして麻酔の深さを制御し、動物が自律呼吸の兆候を示している場合は、プロポフォールとフェンタニルの少量のボーラスを分注します。