Safranin-O染色:軟骨の構造的完全性と細胞性を可視化する方法

要約

出典:Zhao, Y., et al. Establishment of a Surgically-induced Model in Mice to Investigate the Protective Role of Progranulin in Osteoarthritis. J. Vis. Exp. (2014).

このビデオでは、サフラニンオレンジを使用した軟骨の染色手順を実演します。この方法は、軟骨を視覚化し、損傷を検出するのに役立ちます。

プロトコル

1. サフラニンO染色

不安定
1. な内側半月板を持つ安楽死マウスモデルの側顆の中心から内側顆の中心までの領域にまたがる連続矢状切片を含むスライドガラスから始めます。
2. 次に、スライドをオキシレンで脱パラフィンし、エタノール勾配で蒸留水に水和させます。その後、スライドはWeigertの鉄ヘマトキシリン溶液、0.05%ファストグリーン(FCF)溶液、1%酢酸溶液、および0.1%サフラニンO溶液で染色されます。スライドを樹脂媒体を使用して取り付けます。
3. 軟骨のプロテオグリカン(赤色)の損失と軟骨構造の破壊率に基づいて、サフラニンO染色スライドを採点し、組織学的スコアの統計分析を行います。