Masson Goldner Trichrome Staining:心血管線維症検出のための心臓切片のコラーゲンを視覚化する技術

要約

出典:Valentin, J., et al.ラットにおける慢性心筋梗塞の組織学的定量化。 (2016年)。

このビデオでは、心臓組織のコラーゲン線維、核、細胞質の染色を鑑別し、心臓病に関連する線維性の成長を可視化する様子をご覧いただけます。

プロトコル

1. Masson-Goldner トリクローム染色

1. パラフィン包埋心臓ブロックから組織切片を作製し、手動ミクロトーム(厚さ:5μm)で作製します。
2. 各ラットの各心臓部分から1枚のスライド(スライドあたり3〜4枚の横切片)をMasson-Goldnerトリクローム染色で染色します。
   1. スライドをオーブンで60°Cで溶かします。ドラフトの下で、キシロールでそれぞれ10分間2回脱パラフィンします。100%エタノール、95%エタノール、70%エタノール、蒸留水でそれぞれ3分間再水和します。
   2. Bouinソリューションで一晩固定します。その後、水道水で10〜15分間洗い流します。蒸留水ですすいでください。それらをメイヤーのヘマトキシリンで3分間インキュベー
   トします。
   3. スライドを取り外し、蒸留水に5分間放置します。次に、それらを酸性Fuchsin-Ponceauで5分間インキュベートします。それらを1%酢酸で1分間すすぎます。
   4. 次に、ホスホモリブデン酸Orange Gで1分間インキュベートし、1%酢酸で1分間すすぎ、薄緑色色素で10分間インキュベートし、1%酢酸で1分間すすぎます。
   5. 70%エタノール(30秒)、95%エタノール(30秒)、100%エタノール(5分)で脱水します。組織切片に樹脂封入剤を1滴垂らし、カバースリップで覆い、乾燥させます。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
メイヤーヘマトキシリン	MHS32-1L	シグマ・アルドリッチ
Acid Fuchsin CI 42685	F8129-50G	シグマ・アルドリッチ
ポンソーキシリディンCI 16150	P2395-25G	シグマ・アルドリッチ
オレンジG CI 16230	O3756-100G	シグマ・アルドリッチ
薄緑色のCI 42095	L5382-25G	シグマ・アルドリッチ
キシロール	10315083	ハネウェル
エタノールアブソリュート	10303990	ハネウェル
立体顕微鏡	SM2800	ニコン
ホルムアルデヒド	99340	リクトラボ
カセットの埋め込み	K113.1	カール・ロス
Bersoft 画像測定ソフトウェア		Bersoft.com	ライセンスされたソフトウェア