植物組織中の非構造炭水化物の定量のための比色アッセイ

Abstract

出典:Deans, C. A. et al.トウモロコシ(Zea mays)を例に、植物可溶性タンパク質と消化可能な炭水化物含有量を定量化します。J. Vis. Exp.(2018年)。

このビデオでは、植物組織に存在する消化可能な炭水化物を定量化する方法を説明しています。これは、さまざまな植物組織からデータを収集して、栄養生態学、植物と草食動物の相互作用、および食物網のダイナミクスを研究するのに役立ちます。

Protocol

1. 植物の収集と加工

1. 植物試料を採取した後、植物材料を鉗子で液体窒素に浸して試料を急速凍結し、-80°Cで保存します。採取した植物サンプルが大きすぎて急速冷凍できない場合は、ドライアイスを使用してサンプルをすばやく冷却し、できるだけ早く-80°Cの冷凍庫に移します。植物材料の主要栄養素含有量は、組織が植物から分離された後に変化する可能性があるため、収集後できるだけ早く植物サンプルを凍結することが重要です
   注意：液体窒素は、皮膚に接触すると重度の凍傷を引き起こす可能性があります。液体窒素は、承認された容器に入れて輸送し、クライオグローブ、アイゴーグル、フェイスシールド、エプロン、白衣など、取り扱い中は適切なPPEを着用してください。
2. 凍結乾燥機を使用して植物材料を凍結乾燥し、水分が除去されている間、組織が代謝的に不活性であることを確認します。サンプルの質量が安定するまで乾燥させ、すべての水が除去されたことを確認します。
3. サンプルが乾いたら、グラインダーまたはミルを使用して微粉末に粉砕します。分析までサンプルを乾燥キャビネットに保管します。

2. 消化可能な炭水化物アッセイ

1. サンプル調製
   1. 各組織の複製サンプル(それぞれ約20 mg)を、ゴムで裏打ちされたスクリューキャップ(長さ100 mm)付きのガラス製1....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
マイクロプレートリーダー(分光光度計)	バイオ・ラッドのモデル	680 XR