マウス尿グルコース濃度の定性的および定量的評価のためのアッセイ

要約

このビデオでは、マウスの尿を採取し、その血糖値を評価する手順を示しています。グルコースレベルを評価するには、酵素と発色性色素でコーティングされたテストストリップをサンプルに浸し、グルコースレベルを示す色の変化を開始します。尿グルコースレベルを定量するには、グルコース濃度が上昇したマルチウェルプレートに尿サンプルを導入し、反応混合物を添加してインキュベートします。吸光度を測定して標準曲線を作成し、サンプル吸光度に基づいてグルコースレベルを計算します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. スポット尿グルコース検査

1. きれいなパラフィルムを平らな面に置きます。
2. ネズミの尻尾をそっとつまみ、パラフィルムにセットします。
3. 親指と人差し指を使用して、マウスの首筋を拘束します。首筋を拘束したままマウスをそっと持ち上げると、ストレス反応としてマウスが排尿します。尿の滴がパラフィルムの表面に落ちるのを待ちます。尿滴を集めた後、マウスをケージに戻します。
4. Diastixストリップの試薬端を、パラフィルム表面に集めた新鮮な尿滴に浸します。すぐにストリップを取り外し、色面を上にして表面に平らに置きます。ストリップに色が完全に現れるまで、少なくとも30秒待ちます。現像した色を、Diastixコンテナに付属の参照チャートと比較します(図1)。
   ヒント：マウスがパラフィルムで排尿しない場合は、人差し指を使用してマウスの下腹部(尿膀胱周辺)に穏やかな圧力をかけます。.このアプローチは、尿滴をパラフィルムに放出するのに役立ちます。上記の手順を踏んでも排尿しないマウスの場合は、20分待ってから再度手順を開始してください。すべての手順がIACUCガイドラ....

結果

図 1.スポット尿グルコーステスト。Parafilmに採取したマウスの尿滴と、Diastix容器に載せたカラーリファレンスチャート。

図 2.24時間のマウス尿コレクションのためのTecniplastの新陳代謝ケージ。マウスは、24時間の尿を収集するために、このケージに単独で収容されます。

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