方法論記事

マウスの長い持続時間の全身温熱療法のためのプロトコル

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DOI:

10.3791/3801

2012年8月25日

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サマリー

本稿では、最大12〜24時間の条件のように熱を刺激することができ、マウスにおける全身温熱療法のためのプロトコルについて説明します。

要約

温熱療法は、通常、上記の中核体温の上昇を定義するために使用される一般的な用語です。それは頻繁に発熱時に観察される増加中核体温を記述するために使用されます。アジュバントとしての温熱療法の使用は癌生物学の分野での腫瘍退縮のための有望な手法として浮上している。この目的のために、最も重要な要件は、信頼性が高く、均一な加熱·プロトコルを持つことです。我々は、マウスの温熱療法(全身)のためのプロトコルを開発してきました。このプロトコルでは、動物は、15分の休止期間が続く90分間の温熱療法のサイクルにさらさ​​れている。この期間中にマウスが食料や水への容易なアクセスを持っています。最初のいくつかの温熱曝露サイクル中にマウスで、高体温の上昇が、動物を固定化することによって防止される。また、生理食塩水は、脱水の影響を最小限に抑えるため、最初の数サイクルで投与される。このプロトコルは、最大12〜24時間にマウスでの条件のような発熱をシミュレートすることができます。我々は持っているプロトコルを実証するために8〜12週齢のBALB / CJ雌マウスを使用していました。

プロトコル

1。動物の倫理

マウスで長時間温熱療法を行う前に手順が施設内動物のケアと使用委員会によって承認されていることを確認してください。このホワイトペーパーで説明とそれに付随する映像で示されているすべての手順は、免疫学の国立研究所の動物実験倫理委員会によって承認された。

2。理解ハイパーサーミア

全身温熱療法(WBH)は39.5に維持インキュベーターに置かれたケージ℃に温めておいた動物を置くことによって、配信されプロトコルの標準化の間に、温度センサは、外科的にマウスに移植され、彼らの体温は、異なる実験条件で監視した。それが加熱された環境で動物を置くことによって、それらの温度は徐々に37まで増加することが観察された℃〜最大42℃まで100分( 図1)の期間にわたって。木曜日内部体温が外部環境温度よりも高い温度で撃たとして "スパイク"結果の電子は興味をそそられる。

体温が40℃を超えた場合、動物はストレスや鼻の周りに濡れなど脱水症状の兆候を示すでしょう。 40を超えて体温を高める°Cは、湿潤かつ不可逆的なストレスあるいは熱応力に起因する動物の死につながる。だから温熱療法の過程で温度の急上昇を防ぐことが重要です。

高温スパイクのこの現象は、温....

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ディスカッション

にまでさかのぼる5000 BCとして、エジプトの医師は熱で腫瘍を治療した。ギリシア人はいくつかの医学的治療における熱の価値を認識した。モーセの律法の中で最も古いテキストは、治療的に体温を上昇させる温泉(創世記36:24)を言及する。

以前の技術は温熱療法1の誘導のための発熱や温水浴の誘導のための発熱性微生物抽出物の使用のいずれかを採用しています。しかし、これらのアプローチのいずれも簡単に監視したり制御することができた。我々のプロトコルマウスで制御され、再現可能な方法で温熱療法にさらされている。

この手順では、温熱療法の最初の2サイクルの間にマウスで時計を維持することが重要です。彼らの毛皮は鼻付近に観測濡れていたり、過度の湿潤性を発見された場合には、彼らはすぐに休息を与え、室温で脱水を防ぐために、生理食塩水intraperiotoneallyを与えるべきである。

テントは ">リカバリ後は、このような動物が再び温熱療法にさらされる可能性がありますこれは、温熱療法ほとんどの.......

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開示事項

我々は、開示することは何もない。

材料

サーミスタ RSコンポーネンツ 528-8558
CO 2インキュベーターヘレウス B5060 EK-CO2
マウスケージ市民産業株式会社。 タイプB 365X207X190センチメートル
動物飼料 Provimiインド
ケージ用水筒ローカルサプライヤーガラス瓶
はんだごて Solderon、インド
50mlの遠心管 BD Biosciences社 352070
タイマーローカルサプライヤー
26G針付き1mlシリンジ BD Biosciences社 309602
生理食塩水ローカルサプライヤー

参考文献

  1. Braude, A. I., Beck, J., Zalesky, M. Febrile response to bacterial pyrogens in leukemia. Blood. 16, 1279(1960).
  2. Dovern, E. Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy added to the treatment of ovarian cancer. A review of achieved resul....

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BALB Cj 8 12

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