小腸移植は、不可逆的な腸の障害を持つ患者のための受け入れられる治療の選択肢となっています。ラットにおける同所性小腸移植の私達の実験モデルは、腸移植を複雑に基礎免疫および炎症プロセスに対処するための信頼性の高いツールとして機能します。
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この記事について
サマリー
要約
小腸移植は、非経口栄養の短腸症候群と障害（不可逆性腸疾患）の患者さんのために受け入れられている臨床検査オプションになっています。専門センターで手術を改善し、寿命1,3の高品質を提供しながら管理する戦略が優れた短期および中期患者および移植片の生存につながっている。他の固形臓器のより一般的な移植とは異なり（ すなわち心臓、肝臓）腸移植により誘導される腎機能および免疫学的変化の多くの根本的なメカニズムは完全に知られている6,7はありません。急性拒絶反応、敗血症および慢性移植片障害のエピソードはまだ不利な長期転帰に寄与し、潜在的にそのような移植の恩恵を受けるだろう在宅中心静脈栄養法を受けている患者が増えているにもかかわらず、手続きのより広範な雇用を妨げる主な障害となっている。小腸は含まれています乗客の白血球の数が多い一般的に腸関連リンパ系（GALT）腸移植の高いimmunogenity理由のこの部分の一部であると呼ばれる。移植粘膜の整合性が損なわれると、腸内で存在し、多くの共生および病原体の近接している（拒否するなどして）敗血症のエピソードの重症度を説明しています。信頼性と実現可能な動物モデルから生成される腸や臓器移植、より多くのデータのフィールドを進めるために必要とされる。モデルはここに一度標準化された方法で確立された信頼性と実現可能性の両方を兼ね備えていますし、腸の移植によってトリガされ、基礎となる複雑な分子、細胞および機能メカニズムに貴重な洞察を提供することができます提供しました。我々は、正常に我々の研究室で8月11日で5年以上にわたって記載されている手順を使用し、洗練されてきた。 Joveのビデオベースの形式は複雑proceを実証するために特に有用であるdureおよび腸管移植を調査同所齧歯類モデルを確立することを計画してグループのための初期の落とし穴を避けることができます。
プロトコル
1。ドナー操作
- ドナーラットを24時間（水/グルコース溶液への無料アクセス）の絶食に保つ必要があります。
- イソフルラン吸入麻酔を誘導するために、標準のアトマイザーで2％で始まり、その後開腹術を行った後、1％まで減らすことができます。鎮静状態をチェックするためにつま先のピンチを実行します。
- 腹部を剃ると皮膚の準備3回（講談）で清掃してください。その後、鎮痛剤の皮下投与後の正中切開を行います。
- 移植片は生理食塩水に浸したガーゼでラップされた後、Q-ティップ（6X倍率の手術用顕微鏡下）で穏やかに膵臓と上行結腸の間の生理的な癒着を分離します。
- 結紮すると7から0シルクを使用した回盲＆真ん中＆右結腸の血管を分割します。上行結腸は腸間膜静脈（SMV）の右側に広げられた後、回盲部、右および中結腸船は7から0の関係を用いてライゲーションおよび除算を識別することができます。
- 全体SMVがまっすぐと露出するように、上向きに胃を縮める。引き込み用の蚊クランプを使用しています。クランプは、必要に応じた形状に形成された粘土の塊によって保持されている。
- SMVから来る膵十二指腸静脈を結紮し、分割します。膵組織が移植から削除することができます前に、SMVから発信されたすべての小さな膵十二指腸静脈は慎重に、識別された7から0シルクで結紮し、分割しなければなりません。
- SMVと腹部大動脈の間のすべてのリンパ管を含む失....
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結果
通常の術後経過
移植された動物は約1時間熱ランプ下の手順から迅速に回復する必要があります。低体温は術後死亡の主要な原因であるため、慎重に内および術後に避けるべきである。術中流体損失は2.5ミリリットル生理食塩水の皮下注射プラス2.5ミリリットルグルコース5パーセント最初の24時間毎に8時間に置き換えなければなりません。ラットはまた、術後最初の24時間のためにグルコース溶液（またはゲルダイエット）と水POへの無料アクセスを提供しなければなりません。この期間の後、彼らは標準ラット飼料と水を自由に摂取への無料アクセスを正常な摂食行動を取り戻す必要があります。痛みは麻酔導入時に投与されるべき1枚目の撮影で、三日間カルプロフェン5 mg / kg皮下毎日の投与によって制御されます。周術期の抗生物質の予防的投与は、同種の設定で必要とされ、その5-7日（アンピシリン15 mg / kg皮下、qの12時間）にわたって投与することができます。一般外観、毛皮の条件など、粘膜の外観が正常である必要があります。 PODの1後の活動レベルは、術前の状態に戻す必要があり、無関心のまたは異常な動作が早期手術合併症を示唆.......
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ディスカッション
ラットにおける腸移植モデルが1970ies 5のように早く説明してきたが、最近採用のモデルのほとんどは、さまざまなテクニックを13を用いて異所性腸移植を伴う。一般的に異手順は簡単顕微技術や評価のための移植の容易なアクセス可能性の利点を持っているが、異所性腸移植が考慮移植小腸と収縮活性のように、その機能面の複数の相互作用を考慮しないという大きな欠点を持っており、共生と病原菌の広大なホストのコンテキストに同所移植を特徴付ける粘膜のバリア機能。当社グループは、本明細書に記載され同所性モデルと我々の知見を持つ大規模な経験を得ていることは、炎症性および適応免疫応答によって引き起こされる特定の変化の多くは、機能的なプロのコンテキスト内で評価されなければならないことを示唆している収縮や粘膜の整合性のような、移植された小腸のperties。注目すべきは、ここで用いた吻合技術は手続きを容易にし、特にmultivisceral移植12,14のモデルでは、重要な温虚血時間を短縮することが示されているそのうちのいくつかは動脈または静脈の袖口、の使用が含まれていません。それは.......
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開示事項
特別な利害関係は宣言されません。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 試薬の名称 | 会社 | カタログ番号 | コメント（オプション） |
| ウィスコンシン大学（UW）液（ViaSpan） | ブリストル·マイヤーズスクイブ | ||
| 泌尿Nebacetin Nのソリューション | ナイコメッド | 6967855 | |
| アンピシリン | Ratiopharm | ||
| カルプロフェン（Rimadyl） | ファイザー | ||
| プロレン10から0 unresorbable縫合 | エチコン | ||
| Monocryl 6から0吸収性縫合糸 | エチコン | ||
| ビクリル3から0吸収性縫合糸 | エチコン | ||
| IVカテーテルG 20 1.1x33ミリメートル | ブラウン | ||
| IVカテーテルG 22 0.9x25ミリメートル | ブラウン | ||
| 講談スキンプレップ | Schülke | ||
| NaClの0.9％輸液 | ブラウン | ||
| 小さな湾曲鉗子 | FineScienceTools | 11009から13 | |
| マイクロ鉗子は、湾曲 | AESCULAP | BD 333 | |
| マイクロ鉗子は、湾曲 | AESCULAP | FD281R | |
| Microはストレート1鉗子 | WPI | 5 | |
| Microはストレート2鉗子 | WPI | 2 | |
| マイクロニードルホルダー | WPI | 14081 | |
| マイクロ剪刀 | FineScienceTools | 15006から09 | |
| マイクロメス | MANI | 眼科用ナイフ | |
| マイクロクランプ | AESCULAP | FB329R |
参考文献
- Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
- Berney, T., et al.
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再版と許可
