Journal of Visualized Experiments (JoVE) 3月号は、Drosophilaの移動行動を測定するための根本的に重要な3つのアッセイに焦点を当てた論文から始まります。具体的に、これらのアッセイには、幼虫の這い出しアッセイ（幼虫の運動機能向け）、RINGアッセイ（成虫の運動機能向け）、および求愛アッセイ（協調能および感覚能を評価するため）が含まれます。
幼虫の這行試験では、幼虫を回収し、未成年のハエを目的の試験薬に曝露させます。その後、動物を方眼紙の上に置いたペトリ皿に移し、1分間に通過したグリッド線の数を算出します。
Rapid Iterative Negative Geotaxis（RING）プロトコルでは、成虫のハエを専用のバイアルに入れ、軽く叩くことで底に移動させます。ショウジョウバエは本能的に重力に逆らって上方へ這い上がります。画像解析を通じて、短時間でハエがどれだけ高く登ることができるかを測定することで、成虫の運動能力の程度を判定できます。
より複雑な感覚誘導行動を評価するために、求愛アッセイが用いられます。まず、性的経験のないオスとメスを、メイティングホイールとして知られる特殊な装置に入れます。実験セッション中、研究者はオスのハエがいくつかの特徴的な求愛行動を示す時間を記録します。驚くべきことに、わずか数分で、オスのハエはメスの方へ向き、腹部を叩き、翅で歌を奏で、メスを舐め、最終的に交尾します。
総合すると、これらのアッセイは、drosophilaの行動に寄与する遺伝的および環境的要因を解明するのに役立つ、一連の強力な行動検定法となります。
今月後半、JoVEは運動生理学に焦点を移し、サンパウロ大学の研究者らが、スポーツのような複雑な運動における様々なエネルギー系の寄与を明らかにするための手法を紹介します。例として、著者らは実演に柔道を選んでいます。慎重に配置されたポータブルガス分析計を用いることで、管理された条件下での柔道運動中の酸素消費量を測定できます。運動前、運動中、および運動後の酸素消費量を比較することにより、好気的代謝および非乳酸性嫌気的代謝のエネルギー寄与を決定できます。運動前後の採血とその後の電気化学的分析により、柔道における乳酸性嫌気的代謝のエネルギー寄与を決定します。酸素消費量と血漿乳酸濃度のデータを組み合わせることで、お気に入りの柔道の投げ技など、複雑な運動の特定の側面に対する異なるエネルギー系の相対的な寄与を決定することが可能です。
また3月には、JoVEはゼブラフィッシュにおけるアルコール曝露に関する発生学的研究をリリースする予定です。胚が目的の時点まで発生すると、mRNAを精製してqPCRを行い、またホールマウントin situハイブリダイゼーションを行うことで、アルコール曝露が遺伝子発現に及ぼす影響を評価できます。光学顕微鏡を用いることで、体節の形状などの形態学的変化も評価可能です。エタノール曝露によって目的の遺伝子の減少または増加が観察された場合、アルコール誘発性の表現型をレスキューするために、2細胞期付近の胚にキャップ付きmRNAまたはモルフォリノを注入することができます。著者らは、発生中のゼブラフィッシュへのアルコール曝露が、哺乳類で観察されるものと同様の形態学的表現型および遺伝子発現プロファイルをもたらすことを示し、またmRNA注入によってアルコールによる発生異常の影響を回復できることを実証しています。
「免疫学および感染症」において、JoVEはカリフォルニア大学リバーサイド校による植物寄生虫学の実験を紹介します。具体的に、著者らが注目しているのはネコブセンチュウです。これは、湿った土壌中を自由に移動して植物の根に感染し、栄養を摂取する絶対寄生植物寄生虫です。まず、感染植物の処理方法およびネコブセンチュウの回収方法について説明します。幼虫が高い感染力を有する段階まで成長した後、土壌に接種することができます。その後、根を染色し、これらの寄生虫によって形成される特徴的な根瘤（こぶ）の有無を評価できます。鉢植え植物を用いた実験に加えて、透明ポーチで栽培した植物を用いてネコブセンチュウ検定を行う方法も提示します。これにより根の観察が容易になり、世界的に年間5%の作物損失の原因となるこの壊滅的な感染症の有無を、ハイスループットにスクリーニングすることが可能になります。
3月に公開予定の50本以上の記事のうち、JoVEのコンテンツサマリーでは4つの記事を重点的に紹介します。その他の注目すべき実験には、ショウジョウバエの触角におけるにおい誘発反応のイメージング法、電子鼻を用いた果実の揮発性化合物分析、および生細胞への高分子導入に向けた一般的な事務機器の転用などが含まれます。