方法論記事

2012年4月:Joveのでは、今月

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DOI:

10.3791/4421

2012年4月1日

この記事について

要約

Journal of Visualized Experiments(JoVE)の4月号には、オハイオ州マイアミ大学の研究室から南極大陸の恒久的に氷に覆われた塩水湖であるボニー湖を追った記事が掲載されています。 光、暖かさ、炭素源が非常に不足している氷の下の過酷な条件を生き残ることができる生物はほとんどいません。 原生生物と呼ばれる単細胞微生物は、ボニー湖の麓に生息する微生物の主要なクラスであり、光合成を介して炭素を生命の輪に持ち込むことができます。

適切なサンプリング場所を決定した後、著者は氷を掘削して溶かし、湖の化学的に成層した水柱内のさまざまな深さからサンプルを収集できるようにします。 収集されたサンプルは、ろ過と安定化のためにフィールドラボに運ばれます。 処理後、水サンプル中に存在する微生物を培養し、さらなる実験を行います。 例えば、私たちの著者たちは、彼らの濃縮培養物が光合成活性を保持していることを示しており、将来の実験は、原生生物の生理学や、そのような生物が地球化学循環にどのように影響するかをよりよく理解するのに役立つはずです。

臨床およびトランスレーショナル医療において、JoVEは婦人科腫瘍の治療のための定位放射線療法(SBRT)に注目しています。SBRTは、ロボットアームに取り付けられた線形加速器によって送達される放射線に依存して腫瘍を生物学的に不活性化する低侵襲のがん治療です。

Case Medical Centerの著者は、コンピュータ断層撮影画像に基づいて、金の軟部組織基準マーカーががんターゲットの様々な深さでどのように配置されるかを説明しています。 治療計画セッションでは、CT画像とPET画像を撮影し、同時に登録します。 これらの画像に基づいて、放射線腫瘍医と婦人科腫瘍医の両方が、治療中に標的となるがんの体積と、無傷のまま残すべき正常な構造を取り巻く輪郭を指定します。 治療開始時に、ターゲットローカライジングシステムがクロスプレーンX線イメージングによって基準マーカーを検出し、マーカーの位置が以前に取得したイメージングデータと比較されます。

治療中、発光ダイオードは患者の動きを追跡し、患者の呼吸パターンを基準マーカーの位置に関連付けて、放射線を正確に送達できるようにします。 患者の固定化に伴う合併症を克服し、筆者の著者らは、体定位放射線治療の手順が、近くの構造物への線量を制限しながら、標的体積に正確に放射線を照射できることを示しています。

私たちのバイオエンジニアリングセクションでは、JoVEがカイコの繭から生体適合性のある基質を作ることを含む記事を紹介しています。 まず、繭の汚染をスクリーニングし、シルクエキスが生成されるように処理されます。 抽出物は、その表面で乾燥するシルクフィルムにパターンを作成するように設計されたPDMS型の上に置かれます。乾燥後、シルクフィルムは水アニーリングと呼ばれるプロセスにかけられ、フィルムは透明になり、顕微鏡観察に最適です。 フィルム上で細胞播種を行った後、著者らは、マイクロパターン化されたシルク基質上の細胞遊走の追跡が、従来の組織培養表面と同様に容易であることを示しています。 シルクフィルムの生体適合性と、化学的および構造的に修飾される可能性により、シルクフィルムは医療機器設計などのin vivoアプリケーションにとって魅力的な候補材料となっています。

驚くべきことに、初代ニューロン培養は私たちの免疫学と感染セクションに進出しています。なぜなら、この4月、JoVEは単純ヘルペスウイルスの潜伏と活性化を研究するために使用される革新的な一次交感神経ニューロン培養システムを文書化しているからです。

末梢ニューロンは、再活性化イベントの原因であるヘルペスウイルスの貯蔵庫のように機能します。 末梢ニューロン培養を確立するために、胚性マウスから上頸神経節を単離し、消化と解離に続くものを96ウェルプレートに播種します。 in vitroで6日目頃に、ウイルス-GFP融合タンパク質をコードするヘルペスウイルスが、溶解性複製の阻害剤とともに細胞に追加されます。 阻害剤が離脱すると、潜伏ウイルスは再活性化し、GFPの発現は蛍光顕微鏡で観察できます。 GFP蛍光を示すウェルの数をカウントすることにより、低分子または遺伝子サイレンシングオリゴヌクレオチドがウイルスの再活性化を抑制または誘導する能力を試験することができ、このアッセイはHSV-1感染の管理に役立つ新しい治療法を発見するための潜在的なツールとなります。

この簡単な要約は、JoVEが4月にリリースする50の記事のうち4つだけを説明しています。 その他の注目すべきリリースには、X線コンピュータ断層撮影法を使用してラットの肥満を定量化する方法、ゼブラフィッシュの心臓に心筋梗塞を誘発する方法、切除した脊髄の逆行性標識などがあります。 乞うご期待。

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