我々は、デバイス作製およびカーボンナノチューブ系高周波バイオセンサーの測定プロトコルを説明する。高周波センシング技術は、基本イオン(デバイ)遮蔽効果を緩和し、ナノチューブバイオセンサーは、従来の電子バイオセンサが失敗し、高イオン強度溶液で動作することを可能にする。当社の技術は、ポイントオブケア(POC)生理学的に適切な状態で動作する電子バイオセンサーのためのユニークなプラットフォームを提供します。
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我々は、デバイス作製およびカーボンナノチューブ系高周波バイオセンサーの測定プロトコルを説明する。高周波センシング技術は、基本イオン(デバイ)遮蔽効果を緩和し、ナノチューブバイオセンサーは、従来の電子バイオセンサが失敗し、高イオン強度溶液で動作することを可能にする。当社の技術は、ポイントオブケア(POC)生理学的に適切な状態で動作する電子バイオセンサーのためのユニークなプラットフォームを提供します。
ユニークな電子特性と単層カーボンナノチューブ(SWNT)と半導体ナノワイヤの高い表面積対体積比(NW)は1-4は、それらの高感度バイオセンサーのための良好な候補にする。荷電分子は、例えばセンサ表面に結合すると、そのDCコンダクタンスの変化をもたらす、センサ内のキャリア密度を変化させる5。しかしながら、イオン溶液に帯電した表面は、電気二重層(EDL)を形成し、溶液からの対イオンを引き付ける。このEDLを効果的に電荷をオフにスクリーニングし、そして生理学的に適切な条件で約100ミリモル(mM)を、特徴的な電荷スクリーニング長(デバイ長さ)はメートル(nm)未満である。このように、高イオン強度溶液中で、電荷系(DC)の検出は、基本的に6-8の妨げとなっている。
我々は、炭素nanotを操作することにより、高い周波数ではなく、分子の双極子の電荷を検出することにより、電荷スクリーニング影響を克服高周波ミキサ9-11として宇部電界効果トランジスタ。高い周波数では、AC駆動力はもはや溶液抗力に打ち勝つことができない、溶液中のイオンは、EDLを形成するのに十分な時間がない。さらに、周波数ミキシング技術は、私たちはイオンスクリーニングを克服するのに十分に高い周波数で動作することを可能にし、まだ低い周波数11-12で感知信号を検出する。また、SWNTトランジスタの高い相互コンダクタンスは、外部の信号増幅器が不要に検知信号用の内部ゲインを提供します。
ここでは、(b)は、デバイス上チャンバ14(c)は、マイクロ流体(PDMS)、ポリジメチルシロキサンを設計し、スタンプ、ナノチューブ13に生体分子を官能化し、(d)は、()SWNTトランジスタを作製するためのプロトコルを記述異なるイオン強度溶液11における高周波センシングを行う。
帯電した分子がSWNTまたはNW電子センサに結合すると、それはどちらか寄付/電子を受け入れるか、またはローカルの静ゲートとして機能することができます。いずれの場合も、結合分子は、センサの測定されたDCコンダクタンスの変化をもたらす、SWNT又はNWチャネル内の電荷密度を変えることができる。 15-20分子の多種多様が正常な結合イベント時にナノセンサーのDC特性を研究することによって検出されている。電荷検出してい感知機構は、ラベルフリー検出21、フェムトモル感度22、及び電子が機能15を読み出す含む多くの利点を持っているにもかかわらず、それは、低イオン強度溶液に有効である。高イオン強度溶液において、DC検出は、イオンスクリーニング6-8によって妨げられる。帯電した表面は、表面近傍の電気二重層(EDL)を形成する溶液から対イオンを魅了しています。 EDLは、効果的にこれらの費用をオフに選別。 Tと彼溶液が増加するイオン強度、EDLが狭く及びスクリーニングが増大となる。この遮蔽効果は、デバイ長λDスクリーニングすることを特徴とする

、ε媒体の誘電率であり、kはBはボルツマン定数、Tは温度であり、qは電子の電荷であり、cは電解液のイオン強度である。典型的な100mMの緩衝液については、λDは 1nm で程度で、表面電位が完全に数nmの距離で上映される。結果として、単層カーボンナノチューブまたはナノワイヤをもとにしてナノセンサのほとんどは、乾燥状態で20または低イオン強度溶液5,15,17,21-22(℃〜1nMのいずれかで動作する- 10mM)を、そうでない場合はサンプルは脱塩手順15,23を経る必要があります。ポイント·オブ·ケア診断装置は、限られた試料処理機能を備えた患者の生理学的に適切な部位にイオン強度で動作する必要がある。したがって、イオン遮蔽効果を緩和するPOCナノバイオセンサーの開発と実施のために重要である。
我々は、メガヘルツの周波数範囲においてSWNT系ナノセンサを操作することにより、イオン遮蔽効果を緩和する。プロトコルは詳細ナノセンシングプラットフォームと生体分子検出用高周波混合測定基づくSWNTトランジスタの製造ここで提供。単層カーボンナノチューブは、鉄触媒24でパターン化基板上に化学気相蒸着法によって成長させる。我々のSWNTトランジスタのために、我々は懸トップゲート25が 500nm高周波センサの応答性を高めるのに役立ち、また、コンパクトなMICRを可能ナノチューブの上に配置組み込むデバイスを密封するO流体室。 SWNTトランジスタは、バックグラウンドイオン遮蔽効果を克服するために、高周波ミキサ9-11として動作する。高い周波数では、溶液中の可動イオンは、EDLを形成すると変動する生体分子の双極子は、まだゲートSWNTは私たちの検知信号であるミキシング電流を生成することができる十分な時間がありません。周波数混合はFETナノチューブの非線形IV特性に起因し発生する。当社の検出技術は、充電ベースの検出とインピーダンス分光26-27の従来の技術とは異なります。まず、我々はむしろ、関連する費用よりも高い周波数で生体分子双極子を検出する。第二に、SWNTトランジスタの高い相互コンダクタンスは、検知信号用の内部ゲインを提供します。これは、高周波インピーダンス測定の場合のように外部増幅の必要性がなくなる。最近では、他のグループはまた、高BAで生体分子検出に対処してきたckground濃度23,28。しかし、これらの方法は、複雑な製造または受容体分子の慎重な化学工学を必要とする、より複雑である。当社の高周波SWNTセンサはシンプルなデザインを内蔵しナノチューブトランジスタの固有の周波数混合性を利用しています。そこで我々は、生理学的に適切な状態で直接機能するバイオセンサが望まれるリアルタイムのポイント·オブ·ケア検出のための新しいバイオセンシングプラットフォームを有望、イオン遮蔽効果を緩和することができる。
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1。 SWNT成長のための触媒のパターニング
ヒントサイズの異なるデザインピットがSWNT化学蒸着(CVD)成長プロセスのばらつきを考慮するために5ミクロン×5ミクロン、10ミクロン×5ミクロン等、例えば 。
2。カーボンナノチューブのCVD成長
ヒント:ナノチューブの成長のためのスイートスポットを決定します。成長は、私たちの炉( 図2c)用2インチX 2インチの下流の領域の上に均一である。
3。 SWNT FETトランジスタの製造
ヒント:遠くAPAR電極接触パッドを拡張ダイ上のT彼らもアクティブナノチューブ領域上にマイクロ流体スタンプを押した後に入れて引き続きアクセスするように。
ヒント:強Oを高めるために厚いクロム層を使用して、fはトップゲートを停止した。ゲート寸法は、また、成功したサスペンションのために重要である。
ヒント:エッチング時間校正をお勧めします。
4。カーボンナノチューブ側壁の化学官能
注意:我々は、スクイーズボトルを使用してダイの上調剤DI水(〜50ml)をすることによって、ダイをすすいでください。次に我々は、DI水を含む別のペトリ皿にダイスを移動し、1分間の周りダイスを移動させます。我々は2つのステップ8-10回の合計を繰り返す。
5。流体室のためのポリジメチルシロキサン(PDMS)モールドの作製
ヒント:混合物が発泡を開始した場合は、チャンバーを排出し、それが少数のために落ち着くましょう再び脱までの秒。
ヒント:PDMS側に直接シリコンウエハと接触しては清潔で、非常にフラットです。この面では、SWNT FETダイと接触することになる。それを汚染しないように注意してください。
ヒント:これは肉眼で行うか、十分な作業スペースと光学顕微鏡を用いてすることができます。 PDMSは(ダイおよび/またはPDMSスタンプがきれいでない場合、一般的に)うまくつかない場合は、結合を支援するために、PDMSに酸素プラズマ(20ワット、15秒)を行います。強力な接着には、このリードより高いプラズマパワーを使用して、しかし、我々はこのような場合にPDMSを除去しながら電極のリッピングを見てきました。
6。マイクロ流体流路の準備
ヒント:構造チャネル幅の崩壊を避けるために10:1の高さの比(この場合には30μm300μm以下)で十分です。
7。 DC電気的測定のセットアップ
ヒント:溶液中の測定では、内のゲート電圧掃引パラメータを保つ| 0.7ボルト|ゲート金属電極と溶液との間の漏れとの反応を避けるために。
8。 AC電気的測定のセットアップ
9。溶液中の電気測定(ノーフロー)
ヒント:新しいソリューションで複数回以前のソリューションを撤回した後、チャンバーをフラッシュするピペットを使用してください。常に高濃度溶液に低いから切り替える。
10。溶液中の電気計測(リアルタイム·フロー)
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懸トップゲートを有するトランジスタSWNTの走査型電子顕微鏡画像は、 図7aに示されている。ゲート寸法は、サスペンション25のために重要である。現在の設計寸法(長さ×幅×厚さ= 25ミクロン×1ミクロン×100 nm)である。ゲート電極は、50nm Cr/50 nmのAuから構成され、厚さのクロム層が浮遊構造へより多くの強さを追加します。懸架構造は、上部ゲートとドレイン( 図7b)との間のリーク電流の有無によって確認される。
私たちは、SWNTセンサーを評価するために、ビオチン - ストレプトアビジンリガンド - 受容体システムを使用しています。側壁官能基化の成功を特徴付けるために我々には、各機能化工程の後に空気中のFETの直流伝達曲線を監視します。 図7c例証そのビオチン化後に右に伝達曲線シフト(赤)とストレプトアビジン結合(青)。これはelectronegatiによって静電ゲーに起因することができますビオチンPEO - アミンおよびストレプトアビジンに存...
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カーボンナノチューブの成長だけでなく、炉の条件だけでなく、基板の清浄度に依存する。成長のための最適のガス流量、温度及び圧力は慎重に較正され、一旦、多かれ少なかれ安定している固定されなければならない。これらの条件が満たされていてもして、我々は、成長がパターン化された触媒領域、触媒と基質清浄の量に依存するがわかった。したがって、我々は成長のばらつきを考慮するために、複数の触媒ピットサイズを組み込んだ。一時間高温アニール工程基板からPR残基などのような汚染物質を除去できました。 図2は、我々 は SWNTの成長のために採用条件を示しています。
ダイの処理工程からの汚染物質の存在は、化学的、生物学的なセンシングにおけるスプリアス信号につながる可能性があります。それゆえ、化学的機能の前後に十分に基板をクリーニングする必要がある。各機能化後のすすぎの手順はレムを助けるアクティブエリアの近くに機器に付着することがあり、任意の過剰の試薬をオベ。また、基板はきれいではなかった場合、PDMSスタンプがリークタイトではなかったし、測定中...
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著者は、彼らが競合する経済的利益を持っていないことを宣言します。
我々は早期に議論のためにコーネル大学の教授ポールMcEuenに感謝します。仕事はミシガン大学と国立科学財団スケーラブルナノ製造プログラム(DMR-1120187)によってスタートアップ資金提供によってサポートされています。この作品は、ミシガン大学、国立科学財団によって資金を供給国家ナノテクノロジー基盤ネットワークのメンバーでルーリーのナノファブリケーション施設を使用していました。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| REAGENTS | |||
| Reagentsは、カタログ欄にLNFと記載されています。保護具(手袋、安全ゴーグル、フェイスマスク、エプロン)および/またはドラフトが必要な化学物質は、コメント欄にPPEと記載されています。 | |||
| シリコンウェーハ(Pタイプ、<100>、500-550 &MU;シリコン | バレー マイクロエレクトロニクス | ||
| SPR 220 3.0 | ダウ (ローム アンド ハース) | メガポジット SPR | PPE |
| AZ 300MIF | AZ エレクトロニック マテリアル コーポレーション | PPE | |
| アセトン | J T Baker | 9005-05 | PPE |
| イソプロパノール (IPA) | J T Baker | 9079-05 | |
| 緩衝フッ化水素酸 | トランセン | PPE | |
| 1-ピレンブタン酸、スクシンイミジルエステル | 分子プローブ | P130 | PPE |
| ビオチン PEO アミン | サーモサイエンティフィック | EZ-Link PEG2 ビオチン、# 21346 | PPE |
| ストレプトアビジン | Invitrogen | S 888 | PPE |
| ジメチルホルムアミド | MP バイオメディカル 0219514791 | PPE | |
| ポリジメチルシロキサン エラストマーベースおよび硬化剤 | ダウ コーニング | シルガード 184 エラストマー キット | PPE |
| SU-8 2015 | Microchem | Y111064 | PPE |
| SU-8 開発者 | Microchem | Y020100 | PPE |
| シラン化剤 | シグマ アルドリッチ | 452807 | PPE |
| 水素 | 純度プラス | LNF | |
| エチレン | 純度プラス | LNF | |
| アルゴン | Purity Plus | LNF | |
| Phosphate Buffer Saline System | Sigma Aldrich | PBS1 | |
| EQUIPMENT | |||
| Lurie Nanofabrication Facility(ミシガン大学)が提供する機器は、カタログ欄にLNFと記載されています。 | |||
| GCA 200 オートステッパー | GCA | LNF | |
| 低圧化学蒸着ツール | テンプレス | LNF | |
| 電子ビーム エバポレーター | エネルジェット | LNF | |
| CNT 成長炉 | ファースト ナノ | イージー チューブ 3000 (LNF) | |
| フォトマスク | ナノフィルム | LNF | |
| シャーレ (150mm) | LNF | ||
| デシケーター | Bel-Art | F420100000 | |
| Biopsy Punch | Ted Pella | 15071/78 | |
| Scalpel | Ted Pella | 548 | |
| ポリエチレンチューブ PE-50 | VWR | 20903-414 | |
| シリンジ | ポンプ New Era ポンプシステム | NE-1000 | |
| シリンジ | Fisher Scientific | BD Safety-Lok シリンジ | |
| シリンジ 針 | フィッシャーサイエンティフィック | 14-821-13A | |
| DAQカード | ナショナルインスツルメンツ | 779111-01 | |
| GPIBコネクタ | ナショナルインスツルメンツ | 778032-51 | |
| ロックインアンプ | スタンフォードリサーチシステム | ズ SR 830 | |
| 周波数発生器 | HP Agilent | 8648B、9kHz -2GHz | |
| バイアスティー | Picosecond | 5575A-104 | |
| 電流プリアンプ | DL Instruments, LLC | DL 1211 | |
| BNC ケーブル | Allied Electronics | 665-xxxx | |
| SMA ケーブル | Sentro Tech Corp | SCF65141 |
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