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方法論記事

変更されたベルイストローム法を用いたヒト骨格筋生検手順

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DOI:

10.3791/51812

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2014年9月10日

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この記事について

サマリー

このビデオの目的は、人間の被験者に対する改良されたBergström骨格筋生検技術を紹介することです。

要約

経皮的生検技術は、骨格筋組織サンプルを収集するために、研究者や臨床医が可能になる。技術は安全で非常に効果的である。このビデオは、ヒト対象の外側広筋から骨格筋組織試料を得るために変更されたストローム針を用いて、経皮的生検技術が記載されている。ベルイストローム針は、先端側の小さな開口部( '窓')を有する外側カニューレと遠位端の切断刃を有する内側トロカールで構成されています。局所麻酔および無菌条件下では、針は、皮膚、皮下組織、および筋膜の切開部を通って骨格筋に進められる。次に、吸引力が内トロカールに適用され、外側のトロカールは、骨格筋組織を吸引外側カニューレの窓内に引き込まれ、内部トロカールが急速に閉鎖され、したがって、骨格筋組織試料を切断またはクリッピングされ、引き戻され。針を90°回転さ60;別のカットが行われた。このプロセスを3回以上繰り返してもよい。この複数の切断技術は、一般的に健康な被験者に100〜200 mg以上のサンプルを生成し、中に、運動やその他の介入の試合後に、直前に行うことができます。切開部位の生検後のドレッシング後、被験者は通常、すぐに日常生活の活動を再開し、完全に48〜72時間以内に活発な身体活動に参加することができます。対象は、筋膜の切開部を通って筋肉のヘルニアのリスクを減らすために48時間激しい抵抗運動を避ける必要があります。

概要

経皮もしくは「セミオープン」生検技術は、ヒトの患者および研究対象から骨格筋組織試料を得るために使用される。デュシェンヌ型(1806-1875)は、経皮的生検1を通して生きている被験者からの骨格筋を得るために、トロカールで針を構築することが第一としてクレジットされている。 1960年代、ベルイストロームはデュシェンヌ2-4によって説明したのと同様の経皮的生検針を導入しました。 20年後、Evans ら 5はベルイストローム針の切削トロカールを通して吸引を適用することによって、技術を修正した。この修飾は、5倍6,7に組織3-の収率を高めることができ、臨床および生物医学的研究の設定に用いられる。この技術は持ち、筋疾患の診断と骨格筋の構造と機能の理解を促進していきます。

経皮的筋生検技術はstraightfoです順方向。無菌操作を厳守して、正しく実行すると、関連するリスクは最小限に抑えられています。筋生検手順は、研究プロジェクトのための治験ツールとしてみなされている。いくつかの学術機関が技術を実行するために、ボード認定医師を必要とする筋肉生検などを取得するために、直接医師の監督で、博士で訓練学部の研究者を可能にします。 ASU生検チームが成功し、過去13年間8-15中に1,600以上の筋肉生検を行った。このビデオの目的は、ヒト対象の外側広筋から骨格筋組織試料....

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プロトコル

説明したように骨格筋の手順は、アパラチア州立大学施設内倫理委員会のガイドラインに従っています。

注:チームは、オペレータ(博士または生検技術において訓練されたMD)、及び少なくとも1つからなるが、理想的には、三つ以上の技術者。オペレータが実施し、骨格筋生検処置のあらゆる側面を監督する責任があります。ワン技術者(技術者#1)は、すぐに筋肉抽出のすべての面でオペレータを支援する責任があります。これは、「非滅菌手」であると、滅菌シリンジで吸引を適用することを含む。第二技術者は(技術者#2)被験者の不安を最小限にする処置中に被写体とマッサージを被検者の反対の足との会話を行っています。第三の技術者(技術者#3)は、骨格筋サンプルを処理し、処理するための責任があります。ダウンストリーム分析対策はどのように多くのADDITを指示ional技術は、骨格筋試料を調製/処理するために必要とされる。

1件名の準備

  1. 収集、準備、および筋生検の手順( 表1)に指定された材料を整理します。除染とベルイストローム針(外側カニューレと内側トロカール)と、標準的な方法16に従って、プランジャーを殺菌。
  2. 件名の同意書を確認します。アパラチア州立大学で使用されるフ​​ォームを参加の同意の骨格筋生検部分はオンラインサプリメント1に設けられている。
    1. 手順....

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結果

筋生検手順上記のように、研究者は、迅速かつ一貫して骨格筋組織サンプルを収集することができる。健康的、思いやりがある被験者での典型的な収量は、3〜4つのクリップが付いているシングルパスで200 mg以上である。手順は、切開の準備のために費やされているそのほとんどが15〜20分を要する。運動系の研究では、筋肉サンプルは、多くの場合、回復中に収集された1つまたは2つのサンプルを用いて、前後運動をとっている。運動前の太ももが手続きのために準備されている間、この設計では、運動後(対側)太ももの毛がクリップされ、切開部位は、細かい点油性マジックで事前にマークされています。そうすることで筋生検は20時、または長時間の運動の試合後に8〜10分で撮影することができます。運動の短い期間( 例えば 、30分以下)を調査する際に別の方法として、切開(複数可)は、運動前に作ら滅菌包帯で覆って固定しますことができます生検サンプルは、運動の試合が終了した後(10秒21から4分22)を迅速に取り出すことができるように、このようにして、サージカルテープで編。手順の相対的な速さは時に、運動.......

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ディスカッション

このビデオでは、ASUヒューマンパフォーマンス研究所で使用され、骨格筋生検手順のステップバイステップの概要を示します。この手順は、小さな変更を加えて、過去13年の間に約1,600筋肉生​​検を採取するために使用されている。筋生検サンプルは、重要な研究の発見につながる、スポーツ栄養ベースの調査では、重要なデータを提供してきた。

修正されたベルイストローム、骨格筋生検法を行う場合に注意が必要な多くの重要な技術がある。何よりもまず、生検チームは手順のすべての段階で厳格な無菌操作を維持しなければならない。切開部位[1.4]を配置するとき、それは外側広筋は、収縮した時に、生検時にリラックスした状態であろうよりも前方と近位であることに留意することが重要である。研究手順は同じ太ももから追加の生検が必要な場合は、最初の切開部位は、わずかにdisですでなければなりません三分の一ポイント[1.4]のTAL;後続の各生検は、前の1 2-3センチの近位である。ゲージおおよその皮下脂肪の厚さ[1.6]は筋膜への表面的な組織の量、ステップ2.3.2、2.4.1、2.6、2.6.1のための重要な決定を推定するた.......

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開示事項

著者には利益相反はありません。

謝辞

宣言する資金調達はありません。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
Bergström 生検針、5 x 100 mmStille Surgical Inc.119-29187-501 個
Durasorb ブルーパッドフィッシャー22-031-340ケース 300
プレップカミソリ 使い捨てムーアメディカル897601 個
シェービングクリームムーアメディカル928691 缶
アルコール綿棒ムーアメディカル98721ボックス/200
ポビドンヨードスワブスティック (3 パック)ムーアメディカル90691
50 フェイスマスクFisher19-039-69050 滅菌
手袋のケース; sz 6.5Moore Medical6812850 ペアの箱
滅菌手袋; sz 7.0Moore Medical6812950 ペアの箱
滅菌手袋; sz 8.5Moore Medical6813250 ペアのボックス
Fenestrated towel drapeMoore Medical9271250
ドカイン(1%HCl、W / O Epi)のケースDealmed42790230 ccバイアル
エチル塩化物スプレーDealmed3860203.5 fl. Oz.ボトル
5ミリリットルシリンジW / 21 G針フィッシャー14-827-48100
25 G 5/8 "針フィッシャー14-826AAケース100
25 G 1 1/2 "針ッシャー14-826-49ケース100
使い捨てメス w/ #11 ブレードフィッシャー0-8927-5Bボックス 20
60 ml シリンジフィッシャー13-689-8ケース 40
~30 インチ エクステンション チューブフィッシャー14-169-7Aロール 50 フィート
金属製ストップコックフィッシャー01-290-38各
ポリプロピレン チューブ コネクタ (テーパー エンド付き)、3.2 から 5.5 mmフィッシャー15-315-28A100
イエローピペットチップのケース(1-200&マイクロ;l)フィッシャー02-681-2先端の ~15-18 mm を切り取り
局所外科用接着剤MedlineMSC09107636 チューブのケース
局所外科用接着剤MedlineMSC091076Z6 チューブの箱
バタフライ ステッチ (粘着ストリップ) 1/2" x 4" (パックあたり 6)Moore Medical93050box/300
Bandadge、ストリップ、3/4 x 3 in.フィッシャー19-027-202100
絆創膏パック (5 m ロール)フィッシャー19-027-768ケース 36
1 インチ ペーパー外科用テープフィッシャー19-027-761ケース 12
縫合糸 (4-0 逆切断、FS2)ムーアメディカル82926ボックス 36
4 x 4 滅菌ガーゼパッドムーアメディカル66949pkg/50
2 x 2非滅菌ガーゼパッドムーアメディカル37336pkg/200
3 x 4 非粘着性パッドムーアメディカル74389bx/100
オートクレーブバッグ 3.5 x 9ムーアメディカル40390200
オートクレーブバッグ 5.25 x 10ムーアメディカル40391200
オートクレーブインジケーターテープムーアメディカル31608250 ラボの箱
コート—小型フィッシャー23-900-520A 10/パック
白衣—ミディアムフィッシャー23-900-520B 10/パック
白衣—大型フィッシャー23-900-520C 10/パック
殺菌使い捨て布ワイプムーアメディカル62879缶/ 160
のパック リケースフィます

参考文献

  1. Duchene, G. B. A. Recherches sur la paralysie musculaire pseudohypertrophique ou paralysie myo-sclerosique. Arch Gen Med. 11 (30), (1868).
  2. Bergstrom, J. Muscle electrolytes in man. Determined by neutron activ....

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