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方法論記事

手ごろな価格で簡単に構築ゼブラフィッシュ施設の建設

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DOI:

10.3791/51989

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2014年11月22日

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この記事について

サマリー

繁殖や生体内研究に適したゼブラフィッシュ施設は、簡単で手頃な価格で建設されています。メンテナンスは最小限で済みます。この施設は、学生の参加と独立した研究に最適です。

要約

生体内では生物医学研究は、臨床の進歩に体外調査結果に変換するために極めて重要である。限られたリソースを持つ小型の学術機関は、それが事実上不可能に研究のための典型的なげっ歯類の施設を構築し、維持するために見つける。ゼブラフィッシュ研究は薬理学、生理学、発達および遺伝的研究におけるin vivo研究のための貴重な代替手段であることが実証されている。この記事では、機能的なゼブラフィッシュ施設が簡単かつ手頃な価格の方法で構築することができることを実証している。私たちは、そのような施設は、最小限のツールと​​専門知識を用いて約1営業日で構築することができることを実証している。本研究で構築し27 1.8 L水槽のゼブラフィッシュ設備の費用は約1500ドルだった。私たちは3ヶ月間の初期作業150魚のコロニーの維持が千ドルであると推定している。このプロジェクト研究のためにゼブラフィッシュの養殖するために導入された、関係の学生が、提案している。

概要

彼らはシステム及び生物レベルで翻訳されるために、インビトロ研究に許可しているため、生体内でのモデルは、総合的な生物医学研究の実施に不可欠である。例えば、小型哺乳類、すなわちげっ歯類との研究は、薬物の開発および利用可能な薬物の改善に必要な証明されている。しかし、(財政的およびロジスティック)複雑さは、それは実験のために齧歯類の施設を建設し、維持することは事実上不可能小さな研究の学術機関で提案するかもしれない。それにもかかわらず、in vivoでの研究は、より少ない複雑な物流を必要とする他の動物種を用いて行うことができる。ゼブラフィッシュ( ゼブラフィッシュ ) が正常に遺伝学、開発、病態生理、および薬理1,2,10,11,12を研究するためのin vivoモデルとして使用されてきた。 rに比較した場合の実験のためにゼブラフィッシュを収容するために必要な設備が比較的単純でかなり安価であるodent施設。 Kim ら 3は最近、詳細に部品や人件費の両方が含まれている約1500ドル、のために構築することができる80のタンクゼブラフィッシュの住宅システムを記載している。これは商業的供給者の任意の数から既製、80タンクシステムを購入することを要求され​​ることはほぼ8500ドルとは全く対照的である。しかしながら、説明は、Kim ....

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プロトコル

注:これらのプロトコルは、プレスビテリアンカレッジのIACUCのガイドラインに従ってください。

表1に列挙した材料を取得します。

2.メーカーの指示に従って5シェルフChromeを組み立てます。これは施設を収容するために使用されます。

3.水リザーバ及び濾過システム(図1A及び図2)を構築する。

  1. ガイドとして、図1Aを使用して、最終的な設置場所とサイズを決定するために、18ガロンのバケツ、ポンプ、フィルター、紫外線ランプをレイアウト。
  2. 部品がレイアウトされると、測定し、組み立てに必要な長さに¾ "PVCパイプをカット。特定のスペースのニーズと制限に応じてすべてのパイプの長さを変更します。
  3. PVCプライマーとセメントを使用して、以前にレイアウトとして配管や継手を組み立て、以下の(3.3.2および3.3.3)を参照してください。
    1. サンドサンドペーパーによるパイプの切断端部は、タッチANに滑らかになるまでデブリがないdは。
    2. 総理パイプの外側と塩ビプライマーから含ま綿棒で購入したPVCプライマーとフィッティングの内側。
    3. 含ま綿棒を使用してパイプの外側にPVCセメントを適用することにより、一緒にパイプと継手セメント。塩ビセメントを必要とす....

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結果

ポンプとFltersシステムの構築
ラックを組み立てる最初のステップを設定したら、ポンプおよびフィルタシステムを構築することである。フィルタは、システムのポンプに接続されており、容易にフィルタのメンテナンスや交換を可能にする第1の棚の底レベルの上方に位置している。同様に、UVランプは、フィルタのPVCパイプに接続され、必要に応じて( 図4A)のようなUVランプの容易な交換を可能にするために、プラスチック製のワイヤータイで適所に保持される。直ちにポンプ次の紙フィルター、活性炭フィルター、UVランプはPVC管を介して設置されている。 Biobal​​ls硝酸塩に有毒なアンモニア廃棄物を変換する細菌の成長のための表面を提供するために、タンクに添加される。システム内の水のガロン当たり1つbiobal​​lは細菌の増殖を可能にするのに十分な領域である。オーバーフローの場合にbiobal​​lsリザーバとcontaminaの機会に残るように、プラスチック製の貯蔵器の蓋を装着することができるンが最小化されている。オーバーフローイベントが非常に低い場合であっても、(リザーバの上部のパイプの流.......

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ディスカッション

この記事の主な目的は、機能的なゼブラフィッシュ施設の建設が複雑ではなく、最小限の工事知識を持つ初心者の魚の研究者が構築できることを実証することである。さらに、この資料では、この機能のゼブラフィッシュの施設のための材料は、地元のペット用品店やホームセンターから容易にかつ低コストで取得できることを示している。すべての材料とツールは、システムの構築や魚の水槽を取得した後は約1営業日かかります。 72時間最初の実行は、そのようなリークや、測定すべき低水圧、として、システム内の任意の障害を可能にする。システム内の汚染物質が循環から除去されるために、この最初の実行もできます。例えば、PVC接着剤は、循環の最初の数時間の間に除去される有害な有機材料を含んでいてもよい。システムはmaintenボリュームと水の交換の調整を可能にし、容易に主排水弁を有するンス。さらに、システムはまた、水の圧力の調整を容易にする圧力リリーフラインを有している。それは水圧の調節を可能にするので、1つまたは2つだけの区画(棚)が使用されますと、このラインが便利です。

施設は、個々の研究者の容量のニーズを満たすた.......

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開示事項

著者は、この論文のための目的の競合を宣言しません。

謝辞

著者は、リサーチ&コラボレーション(SPARC)賞小薬局·アワードを通じて、このプロジェクトの財政支援のために薬局のプレスビテリアンカレッジスクールの研究局に感謝したいと思います。著者は、ジョン·Smink、水生動物研究所のマネージャー、クレムソン大学、クレムソン、彼の技術支援の原稿の改訂のためのSCに感謝。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
アイテムブランド数量
高さ 74インチ x 幅 48インチ x 奥行き 18インチ 5段 スチール製自立型シェルフユニットスタイルの選択1
18ガロン 一般バケット/トートセントレックス プラスチック: LLC 頑丈なトート1
6アウトレット電源タップ、15フィートマスター電気技師1
9ワットUVウォーターガーデンクラリファイヤーFiIterとUVランプSmartpond 
全体の水交換フィルターワールプール6
不透明な全家プレフィルターハウジングワールプール2
スレッドシールテープウィリアムHハーベイ1
8液量オンスLO-VOCポリ塩化ビニールセメントオーティー 
8液量オンスLO-VOCプライマーオーティー 
1/4インチ×100フィートビニール点滴灌漑分配チューブミスター造園家 
1/4インチとげのある点滴灌漑オン/オフバルブミスター造園家33
9ポートNPT灌漑マニホールドフィルター付き ミスター ランドスケープ6
ドロップイン フィルター ハウス付き ワールプール6
2 インチ 直径 90 度 PVC エルボーLASCO3
2 インチ 直径 90 度 ティーLASCO3
3/4 インチ 直径 90 度スリップ エルボーLASCO15
3/4 インチ 直径 PVC アダプターLASCO7
3/4 インチ 直径 PVC ティーLASCO12
2 インチ DIA PVC キャップLASCO3
1インチ径x 3/4インチ径PVCアダプターラスコ2
3/4インチPVCソケットインラインボールバルブアメリカンバルブ5
1/2インチ径x 3/4インチ径PVCアダプターラスコ8
3/4インチ径PVCキャップラスコ1
2インチx 5フィートPVCパイプシャーロットパイプ4
¾-インチx 10フィートPVCパイプシャーロットパイプ3
11 / 16x1-7 / 80 PVCリングSXT10
½”PVCオスアダプターSXT1
¾”PVCカップリング SXT1
½”PVCメスアダプター SXT1
リンク
1.8 Lデュアルベータキーパートップフィン27
¾”PVCオスアダプター(W /#18 Oリング)SXT28
90度¾”ねじ山付きPVCエルボSXT27
ファインメッシュN / A1ヤード
バルクヘッドコネクタN / A1
弓のこN / A1
N / A1
穴鋸N / A1
モンキーレンチN / A1
プライヤー N/A1
巻尺N/A1
安全メガネN/A1
作業用手袋N/A1
バッグコード1家111ドリル

参考文献

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. <....

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