ここでは、覚醒状態の豚、安静時、および段階的なトレッドミル運動中の心肺機能を評価するためのプロトコルを提示します。慢性的な器具は、心臓抑制性麻酔薬の影響を受けずに血行動態測定を繰り返すことができます。
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方法論記事
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ここでは、覚醒状態の豚、安静時、および段階的なトレッドミル運動中の心肺機能を評価するためのプロトコルを提示します。慢性的な器具は、心臓抑制性麻酔薬の影響を受けずに血行動態測定を繰り返すことができます。
このプロトコルは、慢性的に機器の豚とモーター駆動トレッドミル上ブタを行使するための手順への外科的手順を説明します。心肺機能がしばしば麻酔を必要とする、侵襲的に測定される初期の心肺機能障害は、特に、動物モデルにおいて、診断することは困難です。多くの麻酔薬がcardiodepressiveているように、心血管機能の微妙な変化をマスクすることができます。測定は麻酔および急性の外科的外傷の影響を与えることなく、静かな休息の条件の下で得られるように対照的に、慢性計測は、覚醒状態で心肺機能の測定を可能にします。動物が適切に訓練されている場合また、測定は、段階的なトレッドミル運動中に得ることができます。
フロープローブは、心拍出量を測定するための大動脈または肺動脈の周りおよびコロンの測定のための左冠動脈前下行枝の周りに配置されています進血流。液体で満たされたカテーテルは、圧力測定および血液サンプリングのための大動脈、肺動脈、左心房、左心室と右心室に移植されています。また、20 Gカテーテルは、冠状静脈血サンプリングを可能にするために前室間静脈内に配置されます。
回復週間後、3分続く各段階で、5段階の進行性運動プロトコルに豚は、カテーテルは、圧力と流量計に接続され、電動トレッドミル上に配置され、およびブタが施されます。血行動態信号が連続的に記録され、血液サンプルを各運動段階の最後の30秒の間に採取されています。
慢性的にインストルメント動物を研究の主な利点は、安静時だけでなく、運動などの物理的ストレスの間だけでなく、心肺機能のシリアル評価を可能にすることです。また、心肺機能は、病気の発症のA中に繰り返し評価することができますND慢性処置の間、それによって統計的検出力を増加させ、したがって、研究のために必要な動物の数を制限します。
適切な心肺機能は特に、このような運動の1時などに増加した代謝要求の状態の間に、酸素や栄養素を体を供給することが不可欠です。運動に心肺応答は心機能、 すなわちにおける適応の数によって特徴付けられる。、行使筋肉を供給する血管床における心拍数、収縮性およびストローク量、および微小血管の機能、 すなわち、血管拡張の増加を同様に肺のように血管系、および胃腸系を供給する血管床だけでなく、非アクティブな筋肉1で血管収縮。障害者運動能力は、心肺機能障害の早期特徴であり、かつ心肺運動負荷試験が損なわ運動能力2を有する患者における心機能不全、血管機能不全および/ または肺機能不全の間に線引きする効果的な方法として使用されています。初期の心肺機能不全をd心肺機能のように、特に、動物モデルにおいて、診断するifficultはしばしばcardiodepressive特性3を有する多くの麻酔薬で麻酔を必要とする、侵襲的に測定されます。
慢性機器は覚醒状態の心肺機能の測定を可能にし、動物が完全に実験室条件の測定値に調整されるときに、麻酔および急性の外科的外傷の影響を与えることなく静かな静止条件下で得ることができます。動物が適切に訓練されている場合また、測定は、段階的なトレッドミル運動4,5の間に得 ることができます。より具体的には、左と、冠状動脈全身および肺微小循環における血管運動緊張の調節を決定することができ、一方、右心室の機能は、評価され、心筋灌流に関連することができます。液体で満たされたカテーテルの使用は、広告を与えることなく、血液サンプルを取るだけでなく、圧力の測定を可能にします動物ditionalストレス。慢性計装動物を研究の別の利点は、それによって統計的検出力を増加させ、したがって、研究のために必要な動物の数を制限し、心肺運動負荷試験は、疾患の発症中または長期治療中のいずれかの、それ自身の対照として、動物の使用を可能に繰り返すことができることです。
豚の心肺解剖学的構造は、密接に人間のこと似ており、糖尿病6、心筋梗塞7、肺高血圧8,9及びペーシング誘発性心不全10,11などの心肺疾患の様々な形態を誘導することが可能です。また、豚の大きさだけでなく、血液ガスを分析するだけでなく、神経液性測定を実行するために、および/または疾患のバイオマーカーを探索するために、慢性計装、および十分な量の繰り返し採血を可能にします。
このプロトコルは、慢性に使用され手術を説明LY機器豚だけでなく、モーター駆動トレッドミルで豚を行使するためのプロトコル。
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動物を対象とする手順は、エラスムス医療センターロッテルダム(オランダ)での動物実験委員会によって承認されています。 6と80キロの間の重みを持つ豚が正常にこのプロトコルを使用してインストルメントされています。
人間の取り扱いに動物の1適応
外科2.準備
3.手術

手術の図1.概要左上のパネル:動物の無菌エリア、ブルーラインの間に剃毛し、嘘を滅菌する必要があります。切開部位は、赤色の点線で示されています。左下のパネル:カテーテルとフロープローブの写真:液体で満たされたカテーテル(A)、ゴムバンド(B)、20 G針(C)および冠動脈流プローブ(D)を含む冠状静脈カテーテルなどの大動脈/肺流量プローブ。右上のパネル:カテーテルとフロープローブの配置の概略図。 MAPは、平均動脈圧;うわっの静脈、冠状静脈カテーテル。 LAPは、心房圧を残しました。 LVP左心室圧; RVP、右心室圧; PAP、肺動脈圧; CO、心拍出量。 CBF、冠血流。右下のパネル:。縫合糸に沿って約1cmの距離でステッチや結び目で固定バックを終了するトンネルカテーテルこの図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
4.トレッドミル実験(図2)

図2.トレッドミル実験。左ペインLS:トレッドミル上のインストルメント豚。流体で満たされたカテーテルは、豚の背面に配置された圧力変換器に接続されています。右上のパネル:トレッドミル、アンプと記録コンピュータを含む全実験のセットアップの概要。右下のパネル:記録された血行動態データの典型的な例。上から下へ。大動脈圧(AOP、青)と左心室圧(LVP、赤)。左心房圧(LAP、青)と左心室圧(赤);肺動脈圧(PAP、青)と右心室圧(RVP、赤)。大動脈流/心拍出量(AOF、青)。冠血流(赤CBF)。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
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5キロ/時のエクササイズまでは、主との組み合わせで毎分137±7 256±8拍から心拍数の増加によって達成された4.3±0.3 0.7±8.5 L /分の心拍出量の倍増をもたらしました32±2±3〜36ミリリットル( 図3)からのストローク量のわずかな増加。一回拍出量の増加は共に左心室の弛緩速度の増加、左の増加に伴って、左心室圧のdP / dtmaxの一次導関数の最大値の増加によって証明されるように、左心室の収縮性の増加により促進されました心房圧、左心室( 図3)の充填圧力です。一緒に(9.2±0.4グラム/ dlで8.5±0.4から)ヘモグロビン濃度の増加に伴う心拍出量の増加と、71±1%に45±1からボディ酸素抽出の増加は、TRを許可しました身体の酸素消費量のIPLを実行( 図3)。それが大動脈圧を意味するので、全身の血管拡張は( 図3)のみわずかに増加し、全身血管コンダクタンスの増加とほぼ完全に心拍出量の増加を収容する全身血管抵抗...
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本研究は、豚の慢性計測のための手術だけでなく、血行動態を測定しながらモーター駆動トレッドミル上計装豚を行使し、動脈、混合静脈および冠状静脈血中の酸素含有量の測定のための血液試料を採取するためのプロトコルについて説明します。
プロトコル内の重要なステップ
挿管処置の間にすでに開始プロトコル内のいくつかの重要なステップがあります。チオペンタール(2.1.5)したがって、投与の際に迅速な挿管を必要とする、呼吸抑うつ薬です。また、慎重に処置中に人工呼吸器の設定を監視することが重要です。胸腔は(ステップ3.1.4)開かれたときにこのように、これは、負の胸腔内圧の損失をもたらします。この損失を補償し、肺胞の崩壊を防ぐために、換気が呼気終末陽圧(PEEP)が必要です。また、人工呼吸器の設定(最大吸気プレスUREは)〜10ミリリットル/キログラムの一回換気量を維持するように調整されるべきです。また、左肺が離れて押された場合(3.1.6。)一回換気量が左肺の一部のみが換気されているため、減少する可能性があることに注意してください。人工呼吸器の設定は、血液ガスに基づいて調整されるべきです。 ...
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著者らは、開示することは何もありません。
この研究は、(DJドゥンカーへ)オランダ心臓財団の助成金2000T038によってサポートされていました(D. Merkusに)2000T042を付与し、欧州委員会FP7-健康-2010グラントMEDIA-261409(DJドゥンカーとD. Merkusへ)、オランダ心臓血管研究イニシアティブ:オランダ心臓財団、大学医療センターのためのオランダ連合、健康研究開発と科学のオランダ王立アカデミーのためのオランダ機構 CVON- ARENA CVON 2011-11、(D. Merkusへ)CVON-ファイドラCVON2012-08とCVON-RECONNECT CVON 2014から11(DJドゥンカーへ)、ソフィア財団(DJドゥンカーとD. Merkusへ)(D.デへウィイス-Meijler、D. MerkusとIKMライス)。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 3方向ストップコック | B.ブラウン | 16496 | |
| パフューザーラインPVC(DEHPフリー)150 cm / 2.6 ml | B.ブラウン | 8722960 | 液体充填カテーテルに使用 |
| 」パイソン "シリコンチューブ | ラバー BV | 1757 ID 1 mm、OD 2 mm | 液体充填カテーテルに使用 |
| 塩化ナトリウム 0.9% | バクスター | TKF7124 | |
| グルコース 10% | バクスター | WE0163 | |
| 吸引装置 | |||
| スリムライン 電気外科用鉛筆 2 ボタン | ERBE ELEKTROMEDIZIN GMBH | 20190-066 | |
| サーボベンチレーター SV900C | シーメンスエレマAB | ||
| Laryngoscoop | Vererinary Technics Int. | 11.02.47 | |
| 滅菌外科用手袋 | |||
| タイオンサージカルマスク | 3M | 1818FS | |
| 外科用帽子 | Klinidrape | 621301 | |
| 手順パック | Molnlyckeヘルスケア | 97027809 | 外科用ドレープ、ガーゼパッド、注射器、ビーカーなど |
| Droptearsアル | コン | 288-28282-01 | |
| ベタジンスクラブ 75 mg/ml ポビドンヨード | Meda Pharma BV | RVG08939 | |
| ベタジン溶液 100 mg/ml ポビドンヨード | Meda Pharma BV | RVG01331 | |
| カフ付き気管内チューブ | Emdamed | サイズは動物のサイズ | |
| によって異なります 呼吸フィルター Hyrdo therm 3HME | Intersurgical | 1560000 | |
| 喉頭鏡 ハンドル+ ミラーブレード サイズ 4 | Kawe ドイツ | ||
| 手動式蘇生器-Combibag | Weinmann | 6515-12-313-5596 | |
| 血管周囲フロープローブ 3PS | Transonic | 冠状動脈用;サイズ 2.5 - 4 mm 動物のサイズにより | |
| 信頼性フロープローブ | トランスソニック | 大動脈/肺動脈用、16 - 20 mm; サイズは動物のサイズにより異なる | |
| Venflon-Venisystem 20 G x 32 mm | BD | 393224 | 冠状静脈カテーテル用 |
| 鈍い針 18 G | 冠状静脈カテーテル用 | ||
| タイゴンチューブ | ラバー BV | 2802 ID 0.8 mm (1/32'')、OD 2.4 mm (3/32'') | 冠状動脈静脈カテーテル用 |
| サクションハンドル17 cm 6 6/8 "クープランド18/8 martinitチューブコネクタ付き | KLSマーティングループ | 18-575-24 | |
| スカルプルブレード | |||
| メスのハンドル13.5センチメートル5 3/8"ステンレス鋼固体 | KLSマーティングループ | 10-100-04 | |
| 血管鉗子20.2センチメートル8"デベーキーステンレス | スティーKLSマーティングループ | 24-388-20 | ± 14センチ |
| ドレッシング鉗子17センチメートル6 6/8"クッシングステンレス鋼 | KLSマーティングループ | 12-189-17 | ± 18センチ |
| メートルhalsted-musquitoストレート12.5センチメートル - 5" | ルドルフメディカル | RU-3100-13 | ± 12センチメートル |
| ハルステッドムスキート湾曲12.5センチメートル - 5" | ルドルフメディカル | RU-3101-12 | ± 12センチメートル |
| 剖と結紮鉗子13センチメートル5 1/8"ジェミニステンレス鋼 | KLSマーティングループ | 13-451-13 | ± 12センチメートル |
| 剖と結紮鉗子18.5センチメートル7 2/8"シュニットステンレススチール | KLS マーティン グループ | 13-363-18 | |
| リブ リトラクター フィノキエット、ベビー アルミニウム - | KLS マーティン グループ | 24-162-01 | |
| 縫合鉗子 メイヨー・ヘーガー 3 mm 18 cm - 7インチ | ルドルフ・メディカル | RU-6050-18 | |
| メッチェンバウム ブラント湾曲 14.5 cm - 5(3/4)「 | ルドルフ・メディカル | RU-1311-14M | |
| リトレクター・ファラベウフ 12 cm - 4 (3/4)」 | ルドルフ医療用 | RU-4497-12 | |
| タオル鉗子schräデルカーブ 9cm - 3,5インチ | ルドルフメディカル | RU-3550-09 | |
| 手術用ハサミ 鈍い 13 cm - 5インチ | ルドルフメディカル | RU-1001-13 | |
| ガーゼ Cutisoft 10 x 10 cm 4プライ | BSN Medical | 45846-00 | |
| ガーゼ Cutisoft 5 x 5 cm 4プライ | BSN Medical | 45844-00 | |
| 流量計 -CM2 / SF2 - 2ガス (O2 および空気) | UNO BV | 180000008 | |
| Tec 7 気化器 | Datex-Ohmeda | ||
| Acederm 創傷避妊去勢手術 | Ecuphar NV | ||
| ワセリンアルバム | Bufa | 165313 | |
| silkam 3-0 天然シルク、非吸収性 | B. ブラウン | F カテーテル | 留置用1134043縫合糸 |
| シルカム 2-0 天然シルク、非吸収性 | B. ブラウン | F 筋肉 | 近似用1134051縫合糸 |
| ダグロフィル 3-0 ポリエステル、非吸収性 | B. ブラウン | C | 0842478 トンネル後の液体フィールカテーテル用縫合糸 |
| Vicryl rapide 3-0, 1 x 45 cm FS2, V2930G | Daxtrio medische producten | 15560 | トンネル後の電気カテーテル用縫合糸 |
| Vitafil 6 USP | SMI | 6080 | タイ |
| シリンジ | 10 ml および 2.5 ml | ||
| ヘパリンLEO(ヘパリンナトリウム) | レオファーマA / S | ||
| Zoletil | Virbac | tiletamine /ゾラゼパム | |
| セダジン | AST farma | 108855 | キシラジン |
| Temgesic | RB Pharmaceuticals | 5429 | buprenorphine |
| Tensogrip | BSN Medical | 71522-00 | 弾性ベスト |
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