テレメトリを使用して自由に動くマウスにおける長期血圧測定

サマリー

このプロトコルの目標は、埋め込み型無線テレメトリーデバイスを使用して、意識のある自由に動くマウスの全身血圧を評価することです。

要約

新しい血管作用薬の開発中に、動脈血圧の監視は新しい提案された薬の有効性を評価するために重要です。実際、遺伝子改変マウスを用いて、新しい潜在的な治療標的の発見に焦点を当てた研究は、全身動脈圧変動の信頼性が高く、長期的評価を必要とします。現在、外来マウスでは血圧の長期的な測定値を得るためのゴールドスタンダードは、動脈カニューレ挿入を必要とする移植可能な無線送信機を使用しています。この技術は、テザリング、規制の必要性を排除する、またはデータサンプリング時の応力とアーチファクトを導入動物を麻酔します。しかし、カテーテル挿入を介したマウスにおける動脈血圧監視が原因で動脈のサイズが小さいため、むしろ挑戦することができます。ここでは、無線送信機と頸動脈cの成功皮下移植のための重要な鍵の通路を説明するためにステップバイステップガイドを提示しますマウスでの環化。我々はまた、術後の回復期間の後、自由に動くマウスから採取した長期血圧活性の例を含みます。この手順に従うことで、同時に複数の動物からの信頼性の直接的な血圧の録音が可能になります。

概要

高血圧は間違いなく、それが¹先進国と途上国の両方で主要な公衆衛生問題である、心血管疾患の主要な危険因子の一つです。実験的な高血圧症のいくつかの動物モデルは、ヒト²で観察されたもののような高血圧の応答を模倣するために開発されてきました。なかでも、歩行マウスが起源と高血圧への慢性暴露の影響をin vivo分析で可能に高血圧の進行を研究するための優れたモデルを表しています。

マウスでの血圧（BP）の監視は、高血圧や心不全^3、4などの疾患の生理学および病態生理に関与するいくつかのメカニズムを解明するための研究を支援してきました。実際、マウスゲノムの操作は、高血圧^5、6を研究するためのトランスジェニックまたは遺伝子標的モデルの生成は、適切な許可しました。しかし、穏やかな操作意識のあるマウスの鎮静や精神安定剤の使用は深く血圧^7に影響^を与えながら、潜在的に、データ収集中にアーティファクトを導入することができ興奮を誘発します。これらの態様は、特に重要であり、長期的な血圧の監視をしようとしたときに考慮に入れなければなりません。

そこマウスにおいて血圧を記録するいくつかの方法があり、現在入手可能な最も一般的な技術との比較は他

プロトコル

倫理の声明：このビデオ資料に記載されたすべての動物の手順を見直し、テネシー健康科学センターの大学の動物実験委員会（IACUC）によって承認されました。

注：外科的処置を通して無菌の顕微手術器具を使用してください。外科用器具は、1,500°F（815.6°C）の最適な殺菌温度で赤外線殺菌を利用して滅菌することができます。テレメータを再利用することができるが、動物に挿入する前に、製造業者の指示に従って、全体の送信機を殺菌し、カテーテルの先端は、メーカーが提供する特殊なゲルを補充されたことにしてください。

1.実験動物

1. 実行されるすべての実験のためのIACUCの承認を得ます。制度的IACUCとの協議は非常にこの手順後の術後の鎮痛剤使用のための要件に関する推奨します。
2. （c）に動物を飼います食料と水に自由にアクセスで、21℃、相対湿度60％、周囲温度と12時間の明暗サイクルを持つlimateを制御した部屋。
   注：マウス本体は、テレメトリプローブ（×2センチ近似的直径1cm）を収容しなければならないので、20 g以上の重マウスを使用することが好ましいです。

2.麻酔や手術の準備

1. 精密スケールを用いてマウスを計量し、その重量を記録します。静かに静かに動物を処理することを確認します。
2. 誘導室に動物を置き、それを閉じます。 0.5 L / minで酸素流量を設定し....

結果

データは、受信機によってリモートで取得することができます。トレースは、品質管理（ 図1a）は、コンピュータ画面上に視覚化されます。このような動物ID、拡張期血圧と収縮期血圧などの詳細は、（ 図1b）に示されています。動脈BPを連続的に（24/7）を記録することができ、または短いプログラム間隔で（ すなわち 、60秒の取得時間ごと）。データは自動的に後の分析のためにハードディスクに格納することができます。 3日間の連続記録からBPデータが（ 図2）が示されている平均、明暗サイクルの間の概日リズムの変化を鑑賞することが可能です。圧力変動および心拍数の平均値を計算し、時間に対してプロットしました。

ディスカッション

埋め込み可能な無線遠隔測定は、過去10年間で大幅に改善されました。小さいプローブサイズは、動物のためのインプラントが少ない外傷なり、長時間のバッテリ寿命は、コストを削減するのに役立ち、かつ独立したテレメータ周波数は受信機間のクロストークを排除します。テレメトリーは自由に他の技術^8,9によって必要とされている拘束、人間の相互作用、または麻酔の使用に関連するアーティファクトなしに動物を移動する生理学的パラメータを幅広く収集するための最先端の方法であると考えられています。

しかし、彼の技術の欠点のいくつかは、機器とソフトウェアの初期コストと関連しています。送信機は損傷に脆弱で影響を受けやすい、とバッテリは、最終的には電力が不足すると交換する必要がありません。同社は低コストでこれらの損傷を受けたプローブを一新するために提供していますが、コストはまだいくつかの研究室のために法外することができます。さらに、この手順は、技術的に困難であることができ、実際には信頼性の高い血圧測定を達成するために必要とされます。最後に、私たちの手の中に約5％であり、いくつかの手術後の死亡率は、.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
小動物麻酔システム	ケント・サイエンティフィック・コーポレーション(米国		低流量小動物麻酔システム
パッドウォーマーとマウスターモメーター	ケント・サイエンティフィック・コーポレーション(米国コネチカット州トリントン)		動物の体温と恒温制御が可能
双眼顕微鏡	ケント・サイエンティフィック・コーポレーション(米国	コネチカット州トリントン)KSCXTS-1121	ブームスタンドポールとトップLED付き双眼鏡本体
止血鉗子	Kent Scientific Corp、コネチカット州トリントン、米国	INS750451	のクランプや縫合糸のタグ付けに使用されます
小さな金属クリップ、7 mm、ステンレス鋼	Kent Scientific Corp、トリントン、コネチカット州、米国	INS750344	皮膚閉鎖に使用されます
ベタジン溶液	Purdue Products L.P.、スタンフォード、コネチカット	NDC-67618-150-01	10%ポビドンヨウ素局所溶液
通常の生理食塩水	Abott Laboratories	04930-04-10	組織の乾燥を防ぐために必要です。
切開/手術部位からの毛皮除去に必要な	ナイール(脱毛ローション)
ブレードシルク縫合	Teleflex Medical OEM、コベントリー、コネチカット		サイズ 5.0、6.0、7.0
エタノール		2716	消毒用70%エタノール
春はさみ	ファインサイエンスツール	15000-10	小解剖用
ハサミ(斜め)	ファインサイエンスツール	14063-011	3号ハンドル
メス刃		2976-0	10号
鉗子(湾曲)	ファインサイエンスツール	11150-10	組織保持用
鉗子(ストレート)
ニードルホルダー	縫合用	ファインサイエンスツール	12002-12
細針鼻鉗子	サイエンスツール
ソフルラン	ヘンリーシャイン Animal Health, Melville, New York, USA		a general inhalation anesthetic
Sterilizer Benchmark	Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, USA	B1000	手術器具の滅菌 赤外線加熱ガー
ゼパッド	ジョンソン&を使用して5〜10秒でジョンソン、ニューブランズウィック州ニュージャージー州、米国	JJ8513	創傷の洗浄、準備、スクラビング、またはドレッシングに使用する
テレメトリデバイス	データサイエンスインターナショナル、セントポール、ミネソタ州、米国 DSI-PA-C10		自由に動くマウスで血圧を記録する
テレメトリー受信機システム  PC	データサイエンスインターナショナル、セントポール、ミネソタ州、米国
チューブ	インステック研究所、プリマスと組み合わせた会議、ペンシルベニア州	米国BTPE-90
血管カニューレ挿入鉗子、13 cm、0.5 mm	OD世界精密機器	503374	特別な血管カニューレ挿入鉗子
組織接着剤	3Mアニマルケア製品、セントポール、ミネソタ	NAC番号: 11380041	、小さな傷を閉じるために使用し、多くの場合、縫合糸や包帯の必要性を排除し
体重計		BB300	精密分析ラボ用天びん

コネチカット州トリントン) 小血管州、米国糸 州、米国 ファインサイエンスツール 11151-10 組織保持用 ファインサイエンスツール 11151-10ファインイ agent 州、米国ます