トレッドミル疲労試験：マウスの​​疲労のような挙動のシンプルな、ハイスループットアッセイ

サマリー

疲労は、多くの病気や障害において一般的で、治療が不十分で、しばしばよく理解されていない症状です。疲労の新しい前臨床アッセイは、疲労の現在の理解と将来の治療を改善するのに役立つ可能性があります。そのために、現在のプロトコルは、マウスの疲労様挙動を測定する新しい手段を提供します。

要約

疲労は、多くの疾患および障害で顕著な症状であり、多くの人々の生活の質を低下させます。適切にすべての患者に疲労を治療するために、現在の介入の明確な病因と故障の欠如は、新たな治療の選択肢の必要性を残します。有望な新規治療法を特定するうえでの前臨床研究の治療の必要性と重要性にもかかわらず、疲労のいくつかの前臨床アッセイが利用可能です。また、疲労のような行動、自発的な車輪走行を評価するために使用される最も一般的な前臨床アッセイは、疲労を軽減薬物に対して感受性ではないかもしれないが、マウスのいくつかの株との使用に適していない、比較的低いスループットを有します。現在のプロトコルは、新規な、疲労のような動作、トレッドミルの疲労試験の非自発的な前臨床アッセイを記載し、ヒトおよび疲労に疲労を引き起こすことが知られている化学療法薬で処置したマウスにおいて疲労のような挙動を検出する際の有効性の証拠を提供しますアニマ内様挙動lsの。疲労のような振る舞いと潜在的な介入は、このように新たな治療選択肢の速い発見を可能にして、短い時間枠の上にマウスのより多くで評価することができるように、このアッセイは、車輪走行に有益な代替手段とすることができます。

概要

疲労が著しく生活の質を低下させることができ、人々の広い範囲に影響を与え、そしてしばしば不明または未知の病因を有します。癌関連疲労（CRF）は、例えば、治療を受けている癌患者の大部分が経験されており、がん治療を完了し、検出可能な癌¹の非存在下でされた後に長く持続することができます。また、疲労、慢性疲労症候群、うつ病、糖尿病、および線維筋痛を含む多数の他の疾患および障害における顕著な症状です。幸いなことに、疲労を経験して、いくつかの人々を助けることのできる非薬理学的な介入がある（ 例えば 、演習では、いくつかの乳癌患者^2,3のためのCRFを減らすことができる）が、多くの人々はまだ効果的な治療を欠いています。さらに、CRFのための既存の薬物治療は、すべての場合、有効^4-7広くあることが見出されていません。

治療を必要とDRUの欠如にもかかわらず、グラムの治療の選択肢、特に動物モデルで、不足している新たな疲労の治療法の発見と開発を支援するための疲労の前臨床アッセイ。げっ歯類の研究のための疲労の唯一の前臨床アッセイの1つは、マウスまたは他のげっ歯類は、走行輪への無料アクセスを提供されており、日々のランニングの活動が記録された自発的ホイールランニング活動^{（VWRA）9-15、}です。多くの研究では、VWRAは、実験群で測定された身体活動の低下として（VWRAまたは現在のプロトコルのいず....

プロトコル

この手順は、国立糖尿病・消化器病・腎臓病研究所動物実験委員会によって承認されました。

1.準備

1. 試験前に各マウスの迅速な同定を可能にするために、マークを識別して訓練し、テストされるすべてのマウスの尾を入れ墨。
   注：この手順はオプションです。永久マーカーまたは識別の他の方法は、入れ墨の代替として使用することができます。
2. （：、訓練および試験を通じて一貫して維持することが10°傾斜の推奨角度）や感電の周波数を設定し、トレーニングとテストマウスの前に、トレッドミルは、平らな面上にあり、所望の傾斜角度にトレッドミルに設定されていることを確認そして、強度が適切に（推奨：2 Hzで、1.22ミリアンペア）。
   注：使用する電気ショックは、手袋を着用していない指で触れたとき軽度のピリピリ感よりも多くを生成してはならないと拍動悩みに送達されるべきですイオン（200ミリ秒続く各ショックで）。
3. トレーニングとテスト中に糞便丸薬および尿を収集するためにトレッドミルの下で肉屋の紙のクリーンシートまたは吸収性パッドを配置します。
4. 紙のシートまたはトレッドミルハウジング（トレッドミルレーンをカバーする、すなわち 、透明なプラスチックのふた）ショックグリッドから遠いの第三の上に吸収パッドを配置します。
   注：この手順はオプションですが、暗い空間を作成し、トレッドミルの下部を回避する....

結果

このプロトコルは、疲労のような振る舞いは、トレッドミルを使用して、マウスで測定することができます。このセクションで提示されたデータは、トレーニングと現在のプロトコル（ 図1Aおよび1Cを除く）を使用して、マウスの3つの別々のグループをテストすることによって得ました。 、5-フルオロウラシル（5-FU）の疲労を誘発するために、ヒト³⁰マウス^10,13における疲労のような動作が疲労を引き起こすことが知られている細胞傷害性化学療法薬は、投与されました。提示されたすべてのデータは、成人女性C57BL / 6NCrマウスからです。マウスは、試験時に9-10（ 図1および2）または9-13（ 図3）週齢でした。

図 5日間訓練したマウスからの図1に

ディスカッション

現在のプロトコルは、疲労のような挙動を測定するために、マウスのトレッドミルを使用する方法について説明します。この方法はVWRA、疲労のような振る舞いの一般的な前臨床アッセイを上回るいくつかの利点を有します。 VWRAマウスは、試験装置と対話することを選択することが必要です。その結果、マウスのいくつかの近交系はめったにホイール¹⁶と相互作用しない、活動の疲労誘発性の低下を識別することは困難または不可能であり得ることがこれほど少ないのを実行します。これとは対照的に、トレッドミルの疲労試験は、その選択を排除するため、走行車輪上では実行されませんマウスに対する疲労のような振る舞いの実行可能な代替アッセイを提供します。このプロトコルはVWRAおよび疲労のような動作の他の尺度に交換ま​​たは補完するものとして使用することができ、マウスモデルでの疲労を低減するために潜在的な薬物療法を試験する際に特に有用であり得ます。疲労のような動作は、特定のマウスモデルにおいて観察可能であることをパイロット研究を経て確立した後、潜在的な治療Sは、疲労を軽減し、疲労のような挙動を軽減するために投与することができます。薬物治療は、疲労のような挙動を.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
エクサー3/6アニマルトレッドミル	コロンバスインスツルメンツ	1050-RMエクサー-3/6
ストップウォッチダイ	ガー	EF24490M
ワイヤーブラシ	フィッシャーサイエンティフィック	03-572-5
圧縮空気	ダストオフ	FALDSXLPW
吸収パッド	ダイガー	EF2175CX
ブッチャーペーパー	ニューウェルペーパー
アルコール (70%)	フィッシャーサイエンティフィック	BP82011

カンパニー 4620510