方法論記事

マウスにおける低侵襲横大動脈狭窄

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DOI:

10.3791/55293

2017年3月14日

この記事について

サマリー

気管挿管と人工呼吸器の使用を排除しながら、低侵襲性横大動脈狭窄(MTAC)は、通常の横方向の大動脈狭窄(TAC)の必需品を節約します。これは、特に翻訳研究における左心室過負荷のハイスループット研究のために非常に望ましい方法であることが分かります。

要約

低侵襲性の横大動脈狭窄(MTAC)は、標準開胸横大動脈狭窄(TAC)より、マウスにおける横大動脈の狭窄のためのより望ましい方法です。横方向の大動脈狭窄は、左心室における高圧の誘導のための機能性に優れた方法であるが、それは気管挿管と人工呼吸の使用のために、より困難で長い手順です。 TACは、新しい方法、MTACとして、しばしばも少ない存続可能ではありません、どちらも換気セットアップで肋骨と肋間筋の切断や気管挿管を必要とします。胸腔にアクセスするために開胸とは対照的にMTACでは、大動脈弓は、前首の正中切開を介して到達されます。甲状腺は、胸骨切痕を明らかにするために引き戻されます。胸骨はその後、第2リブレベルに削減され、大動脈弓は、結合組織と胸腺を分離することによって、単純に到達します。からそこに、縫合糸は、アーチの周りに包まれ、スペーサで結ばれ、その後、胸骨カットし、皮膚を閉じることができますすることができます。 MTACは、左心室の高血圧症を誘発するより速く、より侵襲性の低い方法であり、ハイスループット研究の可能性を可能にします。狭窄の成功は、大動脈弓と左右の頸動脈血管の寸法の流速を決定するために、高周波経胸腔心エコー検査法、特にカラードップラーとパルス波ドップラーを使用して確認することができ、かつ左心室機能と形態。成功したくびれはまた、間質および血管周囲線維症の心筋細胞肥大などの重要な組織病理学的変化を、トリガされます。ここでは、MTACの手順は、頸動脈中の得られた流れの変化は、心エコー検査、全体の形態、および心臓内の組織病理学的変化に調べることができる方法を示す、記載されています。

概要

この記事の全体的な目的は、マウスの大動脈狭窄(TAC)は、より単純で好都合手術を生産するように改変することができる方法を横断実証することです。 TACは、1991年1に導入され、操作ゲノム2、3、4、5、6を特に小動物において、左心室および心不全に肥大につながる細胞および分子経路を研究するために分子生物学を有効にしました。所望の圧力過負荷の製造におけるその有効性にもかかわらず、技術は、最終的手順を行う際に、その低い生存率により困難によって制限されます。 TACを行う外科医は、気管内挿管、開胸術を実行することができ、および肺虚脱1を防止するために人工呼吸を使用しなければなりません。

コンテンツは">多くの場合、簡単かつ低侵襲性の方法が望まれている。その結果、低侵襲横断大動脈狭窄(MTAC)は3を考案した。結果(具体的には、左心室肥大)が同じであるが、手順が有意に少ない装置を含みます動物へとダメージが少ない。MTACが90%以上の大きな生存率を、持って....

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プロトコル

プロトコルは、香港の大学の教育・研究(CULATR)でライブ動物の使用に関する委員会のガイドラインに従います。

1.運用サイトの準備

  1. 75%イソプロピルアルコールで手術部位を消毒します。心の変化や対象動物の呼吸速度を避けるために、37℃に加熱パッドの温度を調整します。
  2. 30分間、または他の適切な方法により、121℃で重力置換滅菌器で滅菌手術器具を使用してください。
  3. ライゲーションおよび組織分離および開創器として使用するためのツールを作るために、 図1に見られるように、4〜30ゲージの針と針ホルダとカーブして2 -を取ります。手術で使用するための綿棒になりまし-湾曲針をマウントします。
  4. それは針ホルダーと90°27ゲージの針と曲線を鈍ら。連結工程で0.4 mmのスペーサーを作るために、ハード面を擦ることにより、先端を滑らかに。

2。動物の準備

  1. 負のテールピンチ反射で麻酔を確認してください100ミリグラム/キログラム+ 10mg / kgの腹腔:体重との関係で適切なケタミンおよびキシラジンの混合物と2カ月齢、オス、22〜25グラムC57BL / 6Nマウスを麻酔。
  2. 脱毛クリームの2〜3分のアプリケーションと前頸部と胸の毛を削除してください。暖かい水と綿棒でクリームを....

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結果

MTACは、タイムリーに、左心室の大幅な高血圧の誘導を可能にします。

ポリウレタン管を適所に曲げられて保持されるように4 30ゲージ針- 図1に見られるように、プロシージャのための主要なツールの製造は、2を必要とする、シンプルで最小です。外科手術自体はTACと比較して、容易に行うことができるように、また、より複雑です。甲状腺が後退された後、胸骨を切断し、胸腺のビューをクリアするために移動されます。大動脈弓は、ライゲーション工程( 図2)のために容易に配置可能です。

MTACは確実に連結したマウスでは、左心室圧負荷を生成します。くびれ横大動脈を明確Wとして、 図3Cに見られるように図3は 、明らか.......

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ディスカッション

ロックマンらは、心臓に圧負荷を研究するための方法として、大動脈結紮するための第1の方法を考案しました。これは、高血圧や心不全1の細胞および分子の結果を明らかに開始するための研究を可能にしました。改良された方法、低侵襲横断大動脈狭窄(MTAC)は、従来の横断大動脈狭窄9の欠点がない、左心室圧負荷および心不全の誘導のために適し、時間依存性の方法を提供します。手順自体は簡単とTACと比較して増加した生存率と有意により行うことができます。この方法の主な利点は、それが大動脈狭窄実験の性能を可能にするが、同じまたはより良い結果のために大幅に少ない機器、外科技術、および動作時間のことです。

TACの手順で開胸法は、グラムを有効に行いますreaterアクセス​​と心臓や血管の全体のより良い眺め。潜在的な利点は、それが容易にそのような右心室圧負荷又は大動脈弓のバンディングが行われると同時に、虚血状態のために冠動脈結紮のための肺動脈狭窄の性能などの他の手順と組み合わせて実施することができることです。逆に、.......

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開示事項

著者らは、競合する金銭的利益はないと宣言している。

謝辞

私たちは、VEVO 2100超音波システムを提供するための香港理工大学の生命科学における大学研究施設(ULS)を感謝したいです。訓練及び円滑のための医工学、香港理工大学、学際課から博士Chunyiウェンに感謝します。この作品は、香港政府RGCグラントGRF 17127215、764812とビリー・KCチョウにHKU6 / CRF / 11Gによってサポートされていました。

....

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材料

6/0 Dafilon
この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
1インチ30ゲージニードルBD、Franklin Lakes、NJ 07417、米国。305128手順およびFigure 1
27 Gauge NeedleBD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. 301629のために鈍く滑らかにします
C0933066
6/0 SilkamB. Braun、34212 Melsungen、ヘッセン州、ドイツ。C0762067
Sterile glovesA.R. Medicom, Inc (Asia), 香港.
コットンアプリケーターMannings、採石場湾、香港。Local Shopping
CenterDepilatory CreamVeet(香港)、Kwun Tong、九龍、香港Local Shopping Center
Lexer-Baby ScissorFST、ブリティッシュコロンビアV7H 0A6、カナダ。14078-10
Curved Iris ForcepFST、ブリティッシュコロンビア州V7H 0A6、カナダ。11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle HolderWPI, Sarasota, FL 34240, USA. 501989
Stereo MicrioscopeWPI, Sarasota, FL 34240, USA. PZMIII-BS
strong>GenTeal Eye GelNovartis, East Hanover, NJ 07936, USA. Local Pharmacy
Heating PadKent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. DCT-20
<強力>手術テープ実験動物ユニット
<強力>ケタミンおよびキシラジン実験動物ユニット
<強力>ベタジン実験動物ユニット
<強力>ブプレノルフィン実験動物ユニット
スペーサーB. Braun、34212 Melsungen、ヘッセン州、ドイツ<

参考文献

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic co....

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TAC

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