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方法論記事

非ジアテルミー法による腹部皮下脂肪の生検のためのテクニック

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DOI:

10.3791/55593

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2017年9月30日

 ,  ,  ,  ,  , 
1FAME Laboratory, Department of Exercise Science, University of Thessaly, 2Institute of Sport, Faculty of Education, Health and Wellbeing, University of Wolverhampton, 3Faculty of Medicine, School of Health Sciences, University of Thessaly, 4School of Physical Education and Exercise Science, University of Thessaly

* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

我々 は局所麻酔下で非ジアテルミー法を用いた腹部脂肪組織生検を標準化しました。115 事業 (2.61%) から出血過剰な術後の症例が発生しました。健康な男性に非ジアテルミー法を用いた腹部脂肪組織の外科的生検を安全に適用できることが分かった.

要約

脂肪組織生検は、代謝と疾患に関するメカニズムの洞察力の概要を提供することが分析、組織サンプルを提供しています。腹部の皮下脂肪組織生検を得るためには、研究者や医師は、手術または針ベースの手法を使用します。しかし、手術皮下脂肪の生検は白色脂肪組織の生物学的指標の複雑さのより包括的な概観を提供することが組織サンプルを提供できます。通常、手術の脂肪組織生検には、過度の出血を防ぐために血管を焼灼ジアテルミー治療が含まれています。それにもかかわらず、ジアテルミー後フラッシュ火災、体内、皮膚病変などの副作用が報告されています。したがって、非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で腹部の脂肪組織を外科的生検の標準化を目的とします。非ジアテルミー腹部外科的生検法による健康な男性で 115 の皮下脂肪の生検を行った.我々 の結果は、115 事業 (2.61%) から出血過剰なポスト処理の 3 つのケースを示した。結論としては、最小限の副作用で、ベッドサイドでの健康的な男性に非ジアテルミー メソッドを使用して、標準化された腹部皮下脂肪外科的生検を安全に適用できます。

概要

脂肪組織生検は、代謝と疾患に関するメカニズムの洞察力に富んだ概要を提供可能性があります分析、組織サンプルを提供しています。例えば、乳房癌腫瘍同定1、脂肪酸組成試験2、重要な代謝とホルモンの病気経路3の研究に使用されます。腹部の皮下脂肪組織生検を得るためには、研究者や医師は、手術または針ベースの手法を使用します。しかし、手術皮下脂肪の生検は、複雑な生物学的メカニズム[メッセンジャーのリボ核酸 (mRNA) 式など、組織学的解析等]のより包括的な概要を提供することが組織サンプルを提供できます4.彼らは健康な成人4で使用されている以前とベッドサイド5で安全に実行できます。

針による生検法は組織の整合性を破壊する強烈な脂肪吸引を必要とし、それは通常組織 (100-500 mg)6の少量を取得します。これら組織サンプルは、複雑な研究のために適切かもしれない。さらに、針ベースの手法と比較して、手術皮下脂肪の生検を提供できる (例えば、 B および T 細胞シグナリング); いくつかの炎症性指標のより完全な絵を描くことがあります組織サンプル細胞骨格の調節;携帯電話経路;脂質、炭水化物およびアミノ酸の代謝経路酸化的リン酸化経路4。また、針によるには組織4,報7,8 の線維化領域について少し情報を提供しながらの手術 1 つ4より血液細胞汚染のリスクが高いが含まれて.

通常、手術の脂肪組織生検には9過剰な出血を防ぐために血管を焼灼のジアテルミー治療が含まれます。ジアテルミーは、燃やすし、腫瘍や疣贅病9で感染している組織によって影響を受ける組織の破壊にも使用されます。この手法は、特に脳神経や目の手術9に該当します。

ジアテルミーの過度の使用は、壊死組織、感染の原因と治癒過程10を遅らせることの形成につながる可能性があります。確かに、次のジアテルミー9フラッシュ火災など皮膚病変組織の副作用を報告されています。さらに、参加者/患者と営業スタッフ9によって吸入されることがあります手術の環境放出のジアテルミー手術煙の毒性について懸念を提起されています。確かに、ジアテルミーの使用、喫煙 6 タバコ11によって生成された同じ手術室空気毒性を引き起こす可能性があり、少なくとも 20 分12 汚染することができます最新の手術室は通常、十分な換気システムを持っていますが、.しかし、扁桃手術患者、ジアテルミー法少ないが、有意ではない、術後の痛み13と古典的な結紮止血法より出血14は示します。全体的にみて、手術後の痛みの違い、かろうじて健常者に脂肪組織生検後の率の出血の証拠が存在します。証拠の欠如とジアテルミーの副作用を考えると、脂肪組織の生検のため非ジアテルミー法の標準化が必要です。したがって、本研究の目的は健康な男性で非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で腹部の皮下の脂肪組織生検のための手術手技の標準化をだった。さらに、我々 は組織コレクション mRNA の発現および蛋白質の集中を決定し、組織学的解析を実行するための手順を概説します。

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プロトコル

研究ヘルシンキ宣言によって設定された基準に適合し、運動科学部テッサリア大学 Βiοethics 委員会によって承認されました

。

1 です手術機器や消耗品の準備

  1. 4輪手術メイヨーのスタンドに消毒手術フィールドの位置。
    2. 。
  2. 4輪手術メイヨーのスタンドに以下の消耗品・手術用機器の位置:
    ストレート営業はさみ (15 cm) の 1 つのペア
    1 メス (11 号)
    1 メス ハンドル
    曲線はさみ (14 cm) の 1 つのペア
    1 つモスキート鉗子
    コッヘル ピンセット 1 組
    1 つの外科ピンセット
    ポビドン ヨード (の生殖ガーゼ)
    One 縫合 (4.0)
    ストレートはさみ (11 cm) の 1 つのペア
    1 つ針ホルダー (15 cm)
    5 滅菌ガーゼ
    1 つの接着剤滅菌ガーゼ
    消毒された針を用いて 1 つの 10 mL シリンジ
    2% キシロカイン (ないアドレナリン) 10 mL
    1 つ消毒手術用手袋のペア
  3. 別のベンチに以下の材料を位置:
    2 つのマイクロ遠心チューブ用
    10% ホルマリン 5 mL を含む 1 つの管
    50-100 mL の-190 ° C で液体窒素を含んでいる 1 つの小さい容器

2。参加者の準備

  1. 参加者 15 生検の手順の前に 8 時間高速に従います
    2. 。
  2. 参加者を控える運動、過度のストレス、アルコール、およびアクティブおよび受動喫煙 72 h 前生検 16 , 17 を持っている
    3. 。

3。皮下脂肪組織の生検を行う

  1. 仰臥位で手術のベッドの上、参加者を配置します
    2. 。
  2. ポビドン ヨードを使用して切開部を消毒します
    3. 。
  3. ゆっくりと着実に 2% キシロカイン (ないアドレナリン) 10 mL を注入局所麻酔として使用する選択した領域に 18.
  4. 切開部を除く参加者の体をカバーする領域上で滅菌手術フィールドを配置します
    5. 。
  5. 少なくとも 3-5 分は、その後、ピンセットのペアを持つ局所麻酔の領域に圧力を適用、彼の感じているその局所麻酔が達成されていることを確認する任意の痛み 19 参加者を求める
    6. 。
  6. 号 11 メスとメス ハンドルを付ける
    7. 。
  7. へその右または長さ 2 〜 2.5 cm、左に 3-5 cm の切開を作成します
    8. 。
  8. 営業はさみストレート 15 cm のペアで皮下組織を削除します
    9. 。
  9. 脂肪組織を明らかにすると、一度はピンセットのペアと湾曲した 14 cm はさみのペアでそれをキャプチャします
    10. 。
  10. カット約 1 g の脂肪組織を削除します
    11. 。
  11. 次の組織の除去、止血して切開に滅菌ガーゼを置きます
    12. 。
  12. 止血を確認すると、キャプチャ 14 cm 針で 4.0 の縫合と皮膚外科ピンセットのペアと皮下組織が表示されるまでします
    13. 。
  13. 皮膚や皮下に密接に並べながら皮下組織へ移動する、皮膚に縫合針を挿入します
    14. 。
  14. 縫合針、皮下組織、皮膚を外部から駆動するまでに連続ジグザグ法に従います。皮膚切開が閉じられるまで継続します
    15. 。
  15. 外部から縫合糸を結ぶ
    16. 。
  16. 生理食塩水で切開部をきれいにし、接着剤の滅菌ガーゼでカバーします
    17. 。

4。組織の沈着

  1. 3枚に収集した脂肪組織を分ける: 150、350 ω、500 mg
    2. 。
  2. マイクロ遠心チューブ用のサンプル組織の 150 および 350 mg の作品を配置します
    3. 。
  3. -80 で冷凍庫の最終的な沈着まで-190 ° C で液体窒素で小型の容器にマイクロ遠心チューブを用ひたる 2 ° C
    注: 事前に-190 で液体窒素中でマイクロ遠心チューブ用の浸漬中カップでの失敗を避けるためにマイクロ遠心チューブ用の小さな穴をパンクに滅菌針を使用 ° C
  4. 500 mg のサンプル組織片を浸し-組織学的解析に使用する-10% ホルマリン 5 mL を含む管内
    。 注: は、手術中に出血した場合にのみモスキート鉗子を使用します。この場合において、結紮して止血が達成されるまでを閉じるモスキート鉗子で船をキャプチャします
    5. 。

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結果

参加者の特性は、表 1に提供されます。切開部の縫合は、8-12 日以内から落ちた。我々 は健常成人男性で非ジアテルミー腹部外科的生検法 115 の皮下脂肪組織生検の合計を完了した (年齢: 35.2 ± 6.9 年; ボディマス指数: 27.3 ± 4.4; および体脂肪率: 27.0 ± 9.0%)。3 つのケースで観察された後生検出血 (有病率: 2.61%)、手術後 2 日間。過度の出血を経験した 3 人は副作用を経験してない人より古かった [t(113)=-2.115, p = 0.037]、(すなわち、身体質量指数と体脂肪率) の他の違いは認められなかった (p と> 0.05) 2 つのグループの間。最後に、各操作の後の 3 か月の参加者のいずれもは (皮の傷を含む) 任意の副作用を報告しませんでした。

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ディスカッション

本研究の目的は、健康な男性の非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で実行、腹部皮下脂肪の生検のための手術手技の標準化をだった。ジアテルミー、オペレーティング ルームで使用されます。ただし、可能性のある副作用 (すなわち、フラッシュ火災と環境毒性)9と10の治癒の遅れが発生します。ジアテルミーのこれらの不必要な効果は、営業職員と患者/参加者の健康上のリスクを生成できます。そのため、皮下脂肪組織生検手術非ジアテルミー法が保証されます。

過度の出血の参加者の 3 人に、手術後 2 日間を見ました。この 3 人は、切開部の痛みを報告しました。これらの症例を治療するために皮膚切開部は再開された、任意の余分な血が削除された、生理食塩水と上記で説明した同じ技術を使用して閉じた領域にむかいます。その後、合併症は報告されなかったし、それに続く日に認められた通常の治癒します。我々 の結果は、非ジアテルミー法後最小限の副作用を示されている: 115 事業 (2.61%) から出血過剰なポスト処理...

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開示事項

著者は、彼らは競合する金銭的な利益があることを宣言します。

謝辞

この作品は、欧州連合のホライゾン 2020 (グラント契約号 645710) と第 7 フレームワークから (グラント契約番号 612547 と 319010) のプログラムの資金を受信しました。著者生検の手順と支援の博士フォティーニ Sourli Chasioti を感謝したいです。著者らはまた、ビデオの準備で彼の貴重な助け氏 Yiorgos Paterakis を感謝します。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
 消毒された手術野 Hartmann23516-00
ステンレス製インスツルメントスタンド(外科用メイヨー)Medical Device Depot Inc.32000
操作はさみストレート15cmカールストルツ791903
メスNo11 スワン・モートン203バイポーラ、カタログ番号 429011
スカーペル ハンドル No 3カール ストルツ488090
はさみ 湾曲 14 cmカール ストルツ511514、752918
蚊の鉗子カール ストルツ535012
ピンセット コッヘル カールストルツ530416バイポーラ、カタログ番号830316
外科用ピンセットストルツ793216バイポーラ、カタログ番号831016
ポビドンヨード さまざまな適用されない
縫合糸4.0 VicrylJohnsonsV4970H 
はさみストレート 11 cmカールストルツ512511 DS
ニードルホルダー 15 cmカールストルツ515515バイポーラ、カタログ番号 213015
 滅菌ガーゼHartmann3021
Α粘着性滅菌ガーゼ Digas医療機器2889
10 mLシリンジ消毒針付き医療溶液10310-55-0010
2%-キシロカイン(アドレナリンなし)さまざまな適用
滅菌手術用手袋 Sempermed10001
ッペンドルフチューブKartell16283
10%ホルマリン アルファ医療ソリューション11016-30-2909
チューブ 120 mLジガス医療機器9025
-190°Cリバイバル該当なし
カールアルファされないエ

参考文献

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