方法論記事

アントラーとシカの長命の体の成長の遺伝と環境の相対的な効果の評価のためのプロトコル

DOI:

10.3791/56059

2017年8月8日

この記事について

サマリー

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人口レベルの遺伝学や栄養物; に関連するシカの集団間の表現型の違い肥えた野生では困難であります。このプロトコルでは、栄養の変化が除去された制御研究の設計方法について説明します。男性オジロジカの表現型変異が遺伝学よりより栄養によって限られたがわかった。

要約

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シカの表現型は、2 つのカテゴリのいずれかに配置できる: 効率、贅沢な形態成長、高級、大型武器と体の成長を促進する生存を促進します。同じ種の個体数は、環境条件によって各々 の表現型を表示します。男性オジロジカ (ジューテリウムで子鹿) の枝と体サイズ ミシシッピ州、米国の地形の地域によって異なりますが、栄養的な品質の地域変動と相関が強くがネイティブ株式、返品前の努力からの人口レベルの遺伝学の影響は無視できません。このプロトコルでは、年齢や栄養などの表現型に影響を与えるその他の要因が制御されます制御研究の設計方法について説明します。我々 は、ミシシッピ州、米国ミシシッピ州大学さびたドーキンス記念鹿単位に 3 つの地形領域から 1 歳 6 か月フォーンズ野生で捕獲された妊娠した女性をもたらした。子孫の世代別応答と母性効果を評価することの第二世代を生成する同じ地域から鹿を飼育されました。すべての鹿は、同じ高品質 (20% 粗蛋白質鹿ペレット) ダイエット広告自由を食べた。我々 は一意に各新生児をマークし、体の質量、後ろ足の足と全身の長さを記録しました。各後続の秋はリモート注射を介して個人を鎮静し、同じ津雲プラス大人の鹿の角をサンプリングします。最初から角のサイズ (地域的変動はもはや存在しない) の完全な補償と体重 (地域的変化がいくつかの証拠) 第二世代の明らかの部分的な補償の第二世代のサイズにすべて津雲が増加したことがわかった。表示角サイズの 40% の増加、および野生の収穫された相手に比較すると体の質量の 25% の増加について私たちの最も貧しい品質土壌地域に由来する 2 番目の世代の男性。ワイルド男性オジロジカ ミシシッピ州での表現型変異はより人口レベルの遺伝学より栄養価の違いに関連が示唆されました。

概要

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母親の妊娠および授乳期に経験する環境要因は彼女の子孫の表現型は、遺伝子型1,2,3の独立に影響を与えます。質の低い環境に生息する母親が子供を産む効率表現型 (小さな角と体サイズ4) を示すに対し可能性が高い高品質な環境に生息する母親 (大きな枝角と体サイズ4)、高級表現型を示す子孫が生成されます。したがって、高品質の環境で永続化が子孫の生殖機会5,6,78に直接影響を与えるし、母の包括適応度に直接な影響を及ぼす可能性のある大規模な表現型特性を持つ男性の子孫を産む母できます。

栄養イチイ (熊の胆Ursus arctos9; 全体表現型特性に直接影響がLiasis fuscusI10;都 michahellis11) ミシシッピ州、米国におけるオジロジカの表現型に影響を与える可能性がありますいくつかの要因。角と本体のサイズが12他の人と比較して約 3 分の 1 いくつかの人口のために大きいです。このバリエーションの飼料品質13,14; と相関が強い最も大きい男性は、飼料の最高の品質と地域で発見されます。ただし、ミシシッピ州のオジロジカの歴史的な復興は遺伝的ボトルネックや創始者効果15,16オジロジカの表現型で観測された局所的な値変動のいくつかを説明するかもしれないまた、部分的につながっている可能性があります。

我々 は野生で捕獲されたオジロジカ、男性表現型が遺伝学人口レベルによって制限されているかどうかを評価することができたの栄養の品質管理に使用するプロトコルを提供します。このプロトコルも母性効果を遅れているかどうかを評価することができました私たちの集団に存在していた。私たちの制御設計は栄養制限3,17プロキシとして環境変数の使用に限定されている無料の至るまで人口に調査に優先されます。私たちの制御設計は、潜在的な慢性的なストレス社会に関連する相互作用を似たような住宅と畜産の実践にさらされているすべての個人と一定に保たれるよう、その他の変数もできます。さらに、ため栄養生活史の他の側面に直接影響に至る再生サバイバル18,19栄養の制御により哺乳類の生活史の側面に影響を与える他の変数を評価するために調査官。類似したプロトコルは、(例えば20,21) 北アメリカを渡る他の有蹄類の生活史の側面に関連する質問を評価するために記載されています。

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プロトコル

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倫理に関する声明:ミシシッピ州立大学の施設内動物管理および使用委員会は、プロトコル04-068、07-036、10-033、および13-034に基づくすべての捕獲、取り扱い、およびマーキング技術を承認しました。

1. 捕獲場所の確立、野生のオジロジカの固定化と輸送

  1. Deer Management Assistance Programに登録されている公共および私有の資産を特定し22 米国ミシシッピ州の 3 つのソース地域に ≥29 のキャプチャ サイトを確立します。
    1. 各ソース地域内の複数の捕獲場所を特定し、地域集団に存在する遺伝的変異の範囲が捕捉されるようにします。
    2. 注:ここでのソース地域には、米国ミシシッピ州の総土地面積の約17%を占めるデルタが含まれ、農業を主な土地利用とする高品質の土壌地域と見なされています23,24。すべての研究動物は、O. v. virginianus25の分布内でこの地域から捕獲されました。その他の地域には、米国ミシシッピ州の総土地面積の約14%を占め、中品質の土壌地域と見なされている薄い黄土地域(上部と下部の薄い黄土の合計)が含まれていました。農業も薄い黄土地域の主要な土地利用ですが、デルタ23,24ほど普及していません。すべての研究動物は、O. v. virginianus21の分布内でこの地域から捕獲されました。最後に、ローワーコースタルプレーン(LCP)土壌地域はミシシッピ州のほぼ22%を占め、低品質の土壌地域として分類されています。LCPの主な土地利用は、松材の生産と家畜の放牧です23,24。LCPはまた、O. v. osceolaの地理的分布と重複しており、6つのソース個体群のうち4つは、この分布から21 km以内にありました25。この亜種は、O. v. virginianus26よりも小さいと説明されました

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図1:ソースの母集団。米国ミシシッピ州で妊娠中のダムと子鹿が捕獲された自然地理学的地域。この図は、reference31 から変更されていますこの図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

  1. シカの移動に適した生息地の特性、アクセス可能な道路への近さ、分析範囲全体の分布などを満たす可能性のある捕獲場所を選択します。
    注:キャプチャサイトは、キャプチャ技術者を隠せるようにする必要があります。
    1. 約10kgの殻付きトウモロコシを餌にした餌置き場で、餌の消費量と動きに敏感なカメラで撮影された鹿に基づいて、鹿が訪れて使用を評価するように誘います。鹿が5〜7日以内に餌付けされた場所に出席しない場合は、別の場所に移動します。
  2. キャプチャーイベント中は、隠された「スタンド」に座ってください。
    1. 餌の山から風下約20mのところに置き、餌に近づく鹿が捕獲技術者の匂いを嗅ぐことができないように、卓越風方向を考慮に入れます><。 注:高架スタンドが強く好まれ、安全ハーネスが必要です。さまざまな商用ソースを備えたスタンドにはいくつかのバリエーションがあり、用途は個人の好みによって異なります。たとえば、ロックオンスタンドには、ストラップで木に取り付けられたアクセス用のはしごを備えた座席が含まれます。ポータブルクライミングスタンドは、キャプチャー技術者が持ち込むことができ、キャプチャーサイトに到着したら特定のツリーを選択できるため、機動性が向上します。ポータブルクライミングスタンドは、選択した高さまで枝がないまっすぐな木での使用に限定されています。
  3. ダーツガンと3ccの無線テレメトリーダーツを組み合わせて、テレタミンHCl(4.4 mg / kg)とキシラジンHCl(2.2 mg / kg)の混合物を送達します。
    1. キャプチャ作業をスケジュールして、deer27の典型的な薄明度の活動サイクルと一致するようにします。各キャプチャの試みは、日没の2〜3時間前に開始します。
    2. 日没後2〜3時間、暗視ゴーグルと赤い点レーザーを使用して、日中の時間帯に鹿が捕獲されない場合は、ショットの配置にイベントをキャプチャし続けます。
    3. 鹿が舷側で静止しているときに撃ちます.
      注:鹿の後肢は、かなりの筋肉組織を持ち、心臓や肺から離れた場所にあるため、ターゲットです。
    4. ダーテッドターゲット動物(生後6か月の子鹿または妊娠中の成体女性)が完全に動けなくなるまで約15分待ってから、指向性無線テレメトリー機器でそれを見つけます。
    5. 眼球反射(まばたき)をチェックして、個人が鎮静されていることを確認します。その後、眼科用軟膏を目に塗り、鹿に目隠しをしてストレスを軽減します
      注:体温調節の喪失は、固定化の結果です。
    6. 直腸体温計を使用して、回復後の体温を評価します。動物の体温が37.7°C未満の場合は、加熱した毛布で鹿を温め、動物の体温が40.0°Cを超える場合は、アイスパックで鹿を冷やします。
    7. シカをミリタリースタイルの担架の胸骨の位置に置き、シカを捕獲場所から密閉されたトレーラーに輸送します。
    8. トレーラーに鹿を置いた後、0.125 mg/kgのyohimbine HCl28が付いているキシラジンHClの効果を逆にして下さい。
    9. 捕獲したすべてのシカを目的の捕獲施設(例:ミシシッピ州立大学のラスティドーキンス記念鹿ユニット;MSU Deer Unit)を保管し、ソース地域ごとに分けて保管します。

2. 研究動物の飼育施設と一般的な飼育方法

注:MSUの鹿の単位は5つの0.4から0.8ヘクタールのペンに細分される。

  1. 各ペンのすべての面をシェードクロスで覆い、ペン間の視覚的および物理的なバリアとして機能します。シェードクロスは怪我を減らし、夏の間は日陰を提供します。
  2. 各ペンの一方の端に1〜2個の昇降ボックスブラインドを配置して、データ収集中のダーティングイベントを容易にします。
  3. 各ペンの別々の端に2つのトラフスタイルのフィーダーを配置して、鹿間の食物をめぐる競争を減らします。また、各ペンに水桶を用意します。
  4. 鹿に高品質の食事(20%粗タンパク質鹿ペレット)を自由に提供します.
    注:ここでは、ペン内の追加の利用可能な飼料(Trifolium spp)とfescue(Festuca spp)に加えて、ボランティアの草とフォーブが含まれています。
  5. 存在する場合は、除草剤の混合物を使用してペン内で利用可能な飼料を維持し、それぞれのラベルに記載されている混合率を使用して広葉雑草と草を制御します
    注:生後≥5.5か月のオスを収容するために、キャンパス外の施設を使用することが必要になる可能性があります。これらの施設は、MSU Deer Unitと同様の畜産慣行を持つ3つの不動産のそれぞれに2つの0.7ヘクタールの囲いで構成されていました。

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図2:キャプティブ施設の位置。衛星施設とミシシッピ州立大学(MSU)の鹿ユニットが配置されていた調査エリア。網掛けされた領域は、米国ミシシッピ州オクティベハ郡 (A)、ノクスビー郡 (B)、アタラ郡 (C)、スコット郡 (D)、コピア郡 (E) を示しています。この図は、reference34 から変更されていますこの図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

3. 寄生虫と疾病の駆除

  1. グラムあたりの卵数(EPG)として測定された寄生虫の糞便浮遊を使用して、研究動物の回虫寄生虫(Strongyloides spp)を監視します。
    1. 高レベルで存在する場合は、5月中に飼料22.7 kgあたり約0.77 kgのペレットワーマーの割合でペレット化されたワーマー(有効成分フェンベンダゾール)を投与することにより、寄生虫を駆除します。.
    2. 初期治療後も寄生虫レベルが高いままの場合は、イベルメクチン注入治療(5 mg/mL)29を2 mL/0.45 kgの割合で混合し、動物体重45.4 kgあたり0.45 kgの処理飼料の割合で動物に投与します
      注:流行性出血性疾患は、夏と秋の数ヶ月の間に噛むユスリカ(Culicoides spp)によって広がる致命的なウイルス性疾患であることがあります。存在する場合は、7月1日から10月1日まで週に2〜3回、研究施設に殺虫剤(5%超少量殺虫剤)を投与し、研究動物におけるベクターの有病率を低下させる。この殺虫剤は、公式の日没の約90分前に、各ペン内および施設の周囲に噴霧して噴霧します。寄生虫や病気を制御するための好ましい方法は、各飼育施設に固有です。動物の健康と安全を確保するために、捕獲された野生生物の研究中に獣医師に相談する必要があります。

4. データ収集

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図3:新生児の子鹿のデータ収集。米国ミシシッピ州オクティベハ郡のミシシッピ州立大学ラスティ・ドーキンス・メモリアル・ディア・ユニットで生まれたばかりの子鹿の後足の長さを測定。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

  1. 出産シーズン中に子鹿のために毎日飼育施設を探してください。
    1. 潜在的な感染を防ぐために、タグのオスの端に抗生物質を塗布したイヤータガーを使用して、中型のプラスチック製のイヤータグで新生児の子鹿に独自のマークを付けます。子鹿の耳の中央に耳札を置きます。
    2. デジタル吊り下げスケールで体重(0.01kg未満)を測定し、後足の長さと全身の長さ(mm単位)を測定します。
    3. 毛髪のサンプルを収集し、親子関係の割り当てのためにリモートサイトに送ります(資料の表を参照).
      注:親子関係の割り当ては、独自の非統計的なカスタム構造化クエリ言語データベースに基づくDNAを使用して行われました。ペアワイズ対立遺伝子の比較では、リモートの親子関係割り当てサイトは、テストされたすべての遺伝子座で各親から共有された対立遺伝子に基づいて、1つの種雄と1つのダムを除くすべての種牡馬を除外したときに親子関係を割り当てました(B.G.キャシディ、私信)。この親子関係の割り当て方法は、捕獲されたオジロジカ30,31で行われた以前の研究でも使用されました
    4. CおよびD型トキソイドおよびC型およびD型抗毒素2 ccをClostridium perfringensおよびCおよびD抗毒素を皮下投与し、0.3 cc / kgのイベルメクチンをプロピレングリコール(米国ミシシッピ州立大学獣医学部)に各子鹿に経口投与します。.
  2. データ収集のために、10月と11月に成人男性(≥1.5歳)を化学的に固定します。
    1. 野生動物の捕獲に使用されるのと同じテレタミンHClとキシラジンHClの組み合わせを使用して、囲い込んだ成体を固定します(ステップ1.4)。
    2. 鎮静イベント中は、高架ブラインドが配置されているペンの端までダッシュする技術者を歩きます。2つのブラインドにそれぞれ1人の技術者を配置します。
    3. 技術者をブラインドに歩かせた個人に、ペンの反対側の端まで歩いて戻ってもらいます。
      注:鹿はこれらの技術者から離れて、技術者が各鹿に倫理的なショットを撮る位置にあるブラインドの前に自分自身を配置します。
    4. 鹿が舷側で静止しているときに撃ちます(セクション1.4)。
    5. ダーツを打った動物が完全に動けなくなるまで約15分待ってから、近づいてください。
    6. 眼球反射(まばたき)をチェックして、個人が鎮静されていることを確認します。眼科用軟膏を目や鹿に目隠ししてストレスを軽減します。
    7. ダーターが個々の鹿を首尾よく鎮静させた後、鹿のバイタルレートを監視します。
      1. 直腸体温計を使用して、回復後の体温を評価します。動物の体温が37.7°C未満の場合は、加熱した毛布で鹿を温め、動物の体温が40.0°Cを超える場合は、アイスパックで鹿を冷やします。
    8. シカを軍用スタイルの担架に積み込み、ユーティリティタスクビークルで所定のデータ収集エリアに輸送します。
    9. 輸送したら、出生時に記録されたのと同じ形態測定測定値を記録します(ステップ4.1)。
      1. デジタル吊り下げスケールで体重(0.01kg未満)を測定し、後足の長さと全身の長さ(mm未満)を測定します
        注:個々のシカは、鎮静イベント中に使用される薬物の組み合わせに対して異なる反応を示すため、データ収集が完了する前に個体が鎮静から出てきた場合は、約0.1〜0.3ccのテレタミンHClとキシラジンHClの混合物(個々のシカの体重によって異なります)を投与します。
    10. データ収集
    11. エリアに輸送されたすべてのシカに、抗生物質、イベルメクチン、クロスチドリアールワクチン、およびレプトスピラ症ワクチンを適切な量で投与します(セクション1および3を参照)。
  3. 動物を鎮静させながら、枝角測定テープを使用して、成人男性から3回の角測定を行います。
      枝角を
    1. 取り外す前に、枝角の内側の広がり(メインビーム間の最も広い距離)、基底円周(バリとG1タインの間にある最小直径)、およびメインビームの長さ(枝角の基部からメインビームの先端までの距離)を測定します。
    2. レシプロソーを使用して、バリの約3cm上の角を取り除きます。3cm未満の枝角は取り外さないでください。

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図4:成体男性のデータ収集。捕獲された成体のオスのオジロジカからのレシプロソーによる角の除去。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

  1. 鎮静剤を打った個人からすべてのデータが収集されたら、シカを適切な囲いに入れ、0.125 mg/kg ヨヒンビン HCl28 または 4.0 mg/kg トラゾリン HCl32 を投与して、キシラジン HCl の効果を逆転させます。個人を監視して、鎮静剤から抜け出して完全に警戒するまで胸骨の位置に留まることを確認します。
    注:合併症が発生し、動物を安楽死させなければならない場合、ボルトスタナーによる脳脱臼による安楽死と頸静脈の切断は、動物を派遣するための倫理的な手段です。
  2. 枝角を指定された場所に持ってきて、枝角のサイズの測定を終了します。
    1. メインビームから突き出た個々のタイン(G1、G2、G3など)と追加の異常点をワイヤーの助けを借りて測定します.
      注:反対側のメインビームに一致するポイントがない場合、または一般的なアントラーセットの定義と一致しないポイントは、ブーンとクロケットクラブ33によって定義されます。
    2. タインがメインビームと交差する場所にワイヤーを巻き付け、そのポイントを基準としてマークします。
    3. この基準点からタインの先端まで測定し、各タインについて繰り返します。
    4. G1 と G2 のタイン(H2 の円周)、G2 と G3 のタイン(H3 の円周)、G3 と G4 のタイン(H4 の円周)の間の最小点を特定して、残りの円周の測定値を収集します。
    5. G4タインがない場合は、G3タインの中点とメインビームの端との間の距離を測定し、中間点でのH4円周を測定します。
    6. 枝角に含まれるタインが3つ未満の場合は、4つの円周未満を測定します.
      注:たとえば、2つの一般的なポイントを持つメインビームには、3つの円周測定値のみが含まれます。個人は、枝角のサイズを計算するために他のガイドライン(サファリクラブインターナショナル)を使用することができます。ただし、有効な比較のためには、各動物に対して一貫した方法を使用する必要があります。
    7. すべての測定を行った後、ブーンとクロケットの総非典型的なスコアと同様の枝角スコアを計算します33
    8. 科学的なデジタルスケールを使用して角の重量を0.1 g単位で測定し、角が3 cm未満の1年目の動物には、鹿角の最小臨界質量を1 gに割り当てます。
  3. 成体についても同じ方法を使用して、生後約5.5か月の囲い込まれた少年を化学的に固定し(セクション4.2)、大きなプラスチック製の耳標で少年に印を付けます(ステップ4.1.1)。
    1. 捕獲された成体を動けなくするためには、野生のシカを動けなくするために使われたのと同じ薬物混合率を使用してください(セクション1)。
    2. 出生時に収集されたのと同じ測定値を収集し(ステップ4.1.2)、成人と同じ予防薬を投与します(セクション4.2).
      注:すべてのデータが収集されたら、各少年のオスをトレーラーでランダムに割り当てられた衛星施設に輸送します。

5. 第一世代と第二世代の子孫を育てる

  1. 生後6か月の野生で捕獲された子鹿と、野生で捕獲された母親から飼育施設で生まれた子孫を第一世代の個体として分類します。
  2. 繁殖期には、2匹のオスと7〜16匹のメスを配置し、平均繁殖性比はオス1匹に対してメス8匹になります。
    注:最も健康なオス(最大の角と体のサイズ)は、繁殖期のオスの攻撃的な性質による怪我に苦しむことなく、繁殖シーズン全体にわたってメスにサービスを提供する可能性が最も高いため、身体的外観に基づいてサテライト施設から繁殖オスを選択してください。
    1. シカは、同じ発生源地域の他の個体とのみ繁殖させます(例:デルタオスはデルタメスを繁殖させ、シンローオスはシンローメスを繁殖させ、LCPオスはLCPオスを繁殖させます)。
  3. 第一世代の親によって妊娠したシカを第二世代の子孫として分類します。これらの個体を生まれたときから飼育下で育て、両親と同じ高品質の食事を与えてください。
    注:雌は複数年にわたって子孫を残すことがありますが、通常は毎年異なる種牡馬を産みます。第 2 世代の子孫に関するデータは、第 1 世代および野生で捕獲された個体で収集されたものと同じデータを収集します。

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結果

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個々 の年齢、栄養的な品質、および遺伝学男性オジロジカの表現型に影響を与えます。私たち研究デザインができました栄養鹿の品質を制御するために使用していたし、年クラス内で有効な比較の各鹿の年齢を識別することができました。栄養と私たちの研究デザインと年齢を制御してができますより人口レベルの遺伝学は 2 つの学習集団から男性の表現型が制限されたかどうかを理解することができます。改善された栄養 3.5 歳男性オジロジカ世代変数 (テーブル 1の重要な効果に代表される各ソース領域からのすべての地形計測に肯定的な効果を持っていた図 5および6)。アントラー質量とサイズに改良された栄養は、(図 6)、角サイズの人口レベルの遺伝によって制限されていないことを示唆しているの二世代後 3 つの震源域の間で変わらないでした。本体質量大幅に増加最初から第二世代に野生のすべての集団の栄養制限があることを示唆しかし、第 2 世代の男性 (

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ディスカッション

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我々 のプロトコルに関連付けられているいくつかのステップがあります。ただし、このプロトコルの成功を保障するために取られなければならない 4 つの重要なステップがあります。まず、野生の鹿のキャプチャ中に単一のソース領域 (ステップ 1.1.1) 各地キャプチャする必要があります。複数のキャプチャ場所によってソース領域に関連付けられているすべての遺伝の可変性は鹿の間で表されることになります。第二に、鹿保たれなければならない区切られた震源域で繁殖期 (手順 1.4.9 と 5.2.1)。動物はソースで区切られますを確保する繁殖の際に地域制限、同じ震源域から他の鹿でのみ繁殖する鹿です。各鹿を一意に識別することができるされても重要なステップ正確な年代測定 (ステップ 4.1.1) のことができ 。最後に、栄養はすべて集団 (ステップ 2.4) の定数握られなければなりません。

拘束オジロジカの勉強を評価および/または野生で変わることは困難ではないいくつかの変数を制御することができました。たとえば、老化鹿歯の交換と着用方法35に従ってまたは身体機...

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開示事項

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著者が明らかに何もありません。

謝辞

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野生生物復元法 (W-48-61) 連邦政府の援助からの資源を活用した金融支援、ミシシッピ州野生生物部、水産と公園 (MDWFP) に感謝します。我々 はデータ コレクションの MDWFP 生物学者・ w ・ マッキンリー、A. ブレイロック、A. ゲイリー ・ l ・ ウィルフ広範な関与を感謝します。我々 はまた、施設コーディネーターとして s. タッカーと複数の大学院生、技術者データを収集、彼らの助けのために感謝します。この原稿は、ミシシッピ州立大学森林野生動物研究センターの貢献 WFA427 です。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
シェルドコーン
高架スタンド
安全ハーネス
グラウンドブラインド
モデル196プロジェクターダート、ペンシルベニア州、米国
3cc無線テレメトリーダーツ(ニューダート、ペンシルベニア州、米国)
さまざまなサイズダーツ (Pneu-Dart, Pennsylvania, USA)
テレタミンHCl (テラゾール、フォートドッジアニマルヘルス、アイオワ州、米国)
キシラジンHCl (West Texas Rx Pharmacy, Amarillo, Texas, USA)
Yhoimbine HCl
Tolazoline HCl
Military Style Gurney
Rectal Thermometer
Shade Cloth
20% Crude Protein Deer Pellets (Purina AntlerMax Professional High Energy Breeder 59UB、Purina、Missouri、USA)
トラフスタイルフィーダーコマーシャル
クローバー (Durana Clover, Pennington Seed Co., Georgia, USA)
コマーシャル・フェスク (Max-Q Fescue、Pennington Seed Co.、ジョージア州、米国)
ブランケット
アイスパック
広葉雑草防除(2、4-DB草原、Butyrac 200)
草防除 (ポースト・ハーバサイド、BASF社)
ペレットワーマーセーフガード株式会社、 有効成分フェンベンダゾール
寄生虫ポアオントリートメント (アイボメック、メリアル株式会社)
殺虫剤リップタイド、マクラフリンゴームリーキング株式会社) 
中型および大型のプラスチック製耳タグ (米国テキサス州オールフレックス)
親子関係を割り当てたリモートサイトDNA Solutions Animal Solutions Manager (米国オクラホマ州DNA Solutions)
デジタルハンギングスケール (モールトリー、EBSCO Industries, Inc.) 
巻尺
Clostridium perfringensタイプCおよびDトキソイドエッセンシャル3 (コロラド血清株式会社)
Clostridium perfringensタイプCおよびD抗毒素馬起源(コロラド血清株式会社)
プロピレングリコール
抗生物質(Nuflor, Schuering-Plough Animal Health Corp., New Jersey, USA)
イベルメクチン (Norbrook Labratories, LTD., Down, Northern Ireland, UK)
クロスチドリアルワクチン(Vision 7 with SPUR, Ivesco LLC, Iowa, USA)
レプトスピラ症ワクチン (Leptoferm-5, Pfizer, Inc., New York, USA)
輸送
トレーラー レシプロソー (DEWALT, Maryland, USA)
Scientific Digital Scale (Global Industrail、Global Equipment Company Inc)
アントラー測定テープ
フォガー
プラスチックイヤータグ (Allflex, Texas, USA)
Plastic Ear Tagger(Allflex, Texas, USA)
ニュー中のイベルメクチン用

参考文献

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