Intraganglionic 注入の腰部後根神経節 (DRG) へのアクセスを提供する豚の椎の手法について述べる。注入の進行状況を監視するには、術中と術後後 21 日を確認します。このプロトコルは、DRG の注入を含む今後の臨床研究に使用可能性があります。
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Intraganglionic 注入の腰部後根神経節 (DRG) へのアクセスを提供する豚の椎の手法について述べる。注入の進行状況を監視するには、術中と術後後 21 日を確認します。このプロトコルは、DRG の注入を含む今後の臨床研究に使用可能性があります。
後根神経節 (DRG) は、頭の下のすべての第一次感覚ニューロンが含まれている明確な解剖学的構造です。この事実は、慢性的な痛みの治療を目的とした治療薬の注入の DRG の魅力的なターゲットを作る。小動物モデルにおける各 DRG を囲む椎体骨の外科的切除が含まれるために、DRG の注入を促進する椎弓切除術を使用されています。大型動物種、すなわち、豚の腰部後根神経節の intraganglionic 注射用手法を示す.椎は、DRG 標準脳神経外科技術・機器・材料の使用への直接アクセスを許可するように実行されます。椎弓切除術を介してより広範な骨削除と比べると、後根神経節での十分なアクセスを達成しながら脊髄の解剖学を節約するために椎弓切開術を実施します。DRG 注入の術中の進行状況は、非毒性の染料を使用して監視されます。術後 21 日に安楽死、次の注入の成功は 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 分布の組織によって決定されます。プロトコルを示す生物学上不活性溶液を注入しています。このメソッドは、DRG のターゲット治療解決に応用の将来的に臨床研究で可能性があります。我々 の方法論は、大型動物種で intraganglionic 小動物パラダイムの訳しをテストを容易する必要があります。さらに、このプロトコルは、これらの豚の DRG 注入の前臨床試験を計画の重要なリソースとして役立つかもしれない。
後根神経節 (DRG) は、脊柱に沿って位置する解剖学的離散、神経のコレクションです。各 DRG には、特定の部位からのエンコードおよび中枢神経系 (CNS)、末梢刺激を中継する第一次感覚ニューロンが含まれています。たとえば、変形性関節症の痛みが始まるジョイント約に位置する苦痛の受容器は侵害刺激を認めるとき。このプロセスは侵害受容と呼ばれます。侵害刺激の長期的な意識は、慢性的な痛み1に します。
慢性の苦痛は頻繁に臨床研究2学科 intraganglionic 注入3など DRG に鎮痛薬のターゲットを絞った配信するための便利なメソッドを開発する 1 つの目標があります。ただし、DRG アクセスしにくい椎間孔4のボニーの範囲内に存在するため。いくつかのグループは正常に齧歯動物5,6,7,8,9,10で脊椎外科を使用してこの障害を克服しています。
クリニックで椎弓切除術は一般的な脊椎操作は、椎弓板、それにより脊柱管11を治療の外科的除去を指します。DRG の直接アクセスを余裕に外科的技術の取り込みが齧歯動物5,12で成功している、しかし、翻訳があります関連する構造体のサイズを考慮した非現実的な違いと方法に影響薬物動態学や技術的可能性13,14。たとえば、1 つの研究は、T10 は 3.0、7.0、およびラット、ブタと人間、それぞれ15の 8.2 mm で横脊髄直径を決定しました。したがって、大型動物は良い神経構造のおおよその人間寸法をモデル化します。
豚、Raoreらは複数の脊髄内注射16頚髄へのアクセスにマルチレベル椎弓切除術を使用しました。プロシージャ名は忍容性の段階に私主導臨床試験と同等の治療成績が文書化された17をしました。これらの結果は、技術的な可能性と人間の安全性の予測因子として臨床大動物モデルの継続的な使用をお勧めします。
日には、詳細な方法について手術適応と大型動物種の DRG の注入のために存在しません。この橋渡しのギャップを絞り込むには、DRG 露出豚椎注入のためのプロトコルを報告します。標準脳神経外科技術・機器・材料を用い、現代の手術の実際を模倣するように工夫しました。腰部後根神経節の水溶液を用いた intraganglionic 注射、術後 21 日目後組織を介して配信の成功を確認します。
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ここで説明したすべてのメソッドは、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) メイヨー クリニックのによって承認されている
。1 前提条件の厳しさと再現性
設計の厳しさを確保するため、良い研究所プラクティスはすべての回で、任意の動物の前に IACUC (または同じような委員会) の内部承認の国家基準に従うに2。術前動物愛護
3。手術群位置決め
4。左サイドの注入のため術野の無菌調製
注: このポイントから厳密な滅菌方法で進む
。5。皮膚の切開し、骨膜下郭清
6。シングル レベル椎
7。後根神経節の解剖
8。DRG の注入
9。閉鎖
10。術後動物ケア
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注入液の広がりの組織学的評価
注入液の後根神経節への配信成功は、広がる DAPI の組織学的評価によって決定されます。このテクニックは、DRG の三次元中心部に針の先端を位置決めを伴います。したがって、正常に配信は、針の先端を両方 (中央 DRG セクション) の近くと遠く (末梢 DRG セクション) を組織切片から汚す DAPI の程度を評価することによって決定されます。図 1 a 図 1 bは、1 つの DRG の成功した射出を表しています。中枢および末梢の両方の DRG 実質を介して均等に分散 DAPI 染色します。したがって、成功した DRG 射出は DAPI 染色三次元の DRG アーキテクチャ全体のびまん性の普及によって示されています。サブ最適な注入は、一貫性のない染色によって例証されます。たとえば、最小限の染色 (図 1) または外側の縁が DRG 柔 (図 1<...
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我々 は後根神経節を介して椎と健康的な大型動物種における intraganglionic 注入の手術手技の方法を説明しようとする具体的には、豚。齧歯類で、同様の方法は詳細な12をされており、DRG を8,10やウイルスベクター 6,7,9,12従来の薬理学的薬剤を提供するために使用ことができます。上記小動物研究からの結果は有望であるし、我々 のプロトコルは、豚にこれらの事前の調査結果を翻訳する他の道を開くでしょうと思います。健康と病気の動物は、上記研究は、臨床研究では小動物のユーティリティをサポートに使われました。必然的に、大動物モデルはサイズと注入液分布の観点から人間の DRG に最高の使用可能な比較...
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なし;著者らは本研究に関連する利益相反をあります。
研究は (A.S.B.) にシュルツ財団が支援を行った。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 大型の人道的な動物用スリング | ブリッツ &会社の | 002539 | の開口部を含むように変更 |
| 接着剤患者戻り電極 - 9インチ | メドトロニック | E7506 | - |
| レンジャー血液&体液加温システム | 3M | 24500 | - |
| 乳酸リンガーの液体 | ホスピーラ | 0409-7953-09 | - |
| フォース空気加温装置 | 3M | 77500 | - |
| アプリケーター付きデュラプレップ溶液、26 mL (0.7% ヨウ素ポバクリレックス、74% イソプロピルアルコール) | 3M | 8630 | - |
| 滅菌使い捨て手術用タオル | Medline | ||
| MDT2168286-Ioban 2 切開ドレープ | 3M | 6651EZSB | - |
| 使い捨て吸引キャニスターとチューブ | Medline | DYND44703H-Button | |
| スイッチ電気外科モノポーラペンシル | メドトロニック | E2450H | - |
| ファインスムースストレートバイポーラ電気外科鉗子、4 1/2インチ | Bovie | A826 | - |
| #15ブレード | Miltex | 4-315 | - |
| #11ブレード | Miltex | 4-311-4 | |
| x 4サージカルガーゼ | ダイナレックス | 3262-Weitlaner | |
| 自己保持リトラクター、8インチ | ミルテックス | 11-618 | - |
| Meyerding自己保持リトラクター、1 x 2 3/8インチ | Sklar | 42-2078-Gelpi | |
| 自己保持リトラクター、7インチ | Sklar | 60-6570-Freer | |
| エレベーター、5 mm | Medline | MDS4641518F | - |
| ボーンワックス | Ethicon | W31G-Spurling | |
| 椎間板ロンジャー、3 mm | Sklar | 42-2852 | - |
| スパーリング45度、アップバイトKerrison rongeur、2 mm | Medline | ||
| MDS4052802-Leksell角度付きロンジャー、2 mm | Sklar | 40-4097-Gelfoam | |
| 、サイズ50 | ザー | AZL32301 | - |
| コットンイドパティ | メドトロニック | 8004007 | - |
| フレイジャー吸引チップ、6 | Fr Sklar | 50-2006-Frazier | |
| 吸引チップ、10 Fr | Sklar | 50-2010 | - |
| ダンディ鈍い直角神経フック | Medline | MDS4005220 | |
| -ナイロン縫合糸、6-0 | Ethicon | 697G-Castroviejo | |
| スムーズ マイクロ ニードル ホルダー | Medline | MDG2428614-22 | |
| ゲージ クインケ ポイント脊髄針 | ハリヤード ヘルス | 18397-32 | |
| ゲージ CED 針 ロッキング ルアー ハブ付き | コメント | n/a | を参照してください:Pleticha、J.、Maus、TP、Christner、JA、マーシュ、MP、Lee、K.H.、Hooten、WM、Beutler、AS後根神経節への生物製剤の低侵襲対流強化送達:ブタモデルとヒトにおける前向きモデリングの検証。テクニカルノート。J神経外科。121(4)、851-8(2014年)。 |
| ポリエチレンチューブ、5フィート | サイエンティフィックコモディティ | BB31695-PE / 05-Monoject | |
| シリンジ、3 mL | ドール | SY15352-NanoJet | |
| シリンジポンプ | Chemyx | 10050-DAPI | |
| シグマ-アルドリッチ | D9542 | - | |
| ファストグリーンFCF | シグマアルドリッチ | F7252 | - |
| バルブ灌漑シリンジMedline | DYND20125 | - | |
| 細い歯のアドソン鉗子 | Medline | ||
| MDS1000212-Vicryl縫合糸、0 | Ethicon | J603H-Vicryl | |
| 縫合糸、2-0 | Ethicon | J317H | - |
| ニードルカウンターMedline | NC20FBRGS | - | |
| ステリ-ストリップスキンクロージャー、1/2x4インチ | 3M | R1547 | - |
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