軽度子宮内血流の低下は、17 日ラットの子宮および卵巣動脈を包んだ金属マイクロ コイルを動脈狭窄によって製作されました。この手順は、出生前の低灌流と子宮内胎児発育制限を生産しました。
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この記事について
サマリー
要約
子宮内の血流の低下/虚血は子宮内/胎児の成長阻害、早産、低出生体重の主要な原因の一つです。重度の子宮内の虚血のいずれかのモデルまたは子宮内低灌流のグラデーションの明度を持つモデルではこの現象のほとんどの研究を行った。制服軽度子宮内低灌流 (MIUH) のモデルの研究が行われていません。2 つのモデルは、MIUH の研究に使用されている: 子宮および卵巣動脈と動脈アーケードのいずれかの側の縫合結紮に基づくモデルを形成し、両側卵巣動脈と大動脈の開存性を持つクリップに基づく非定常モデル。これら 2 つの齧歯動物モデル MIUH いくつかの制限があります、すべての胎児が子宮角の位置によって MIUH にさらされるなど。MIUH モデルでは、すべての胎児が子宮内低灌流の対等なレベルにさらされます。MIUH は、すべて 4 動脈、子宮をすなわち、餌両側子宮および卵巣動脈の狭窄によって達成されました。
栄養動脈を包んだ金属マイクロ コイルによる動脈の狭窄。マイクロ コイルを制御、最適化、および非常に少しの間動物変動と低死亡率減少した血流を再現することができましたと動脈狭窄を生産、したがって正確な評価を有効にします。0.24 mm の内径マイクロ コイルを用いて, 胎盤と胎児の血流だった穏やか (胎盤の前狭窄レベルから約 30%) 減少します。MIUH モデルの子孫は、明確に神経学的な解剖学的および行動テスト結果の長期的な変化を示します。
概要
子宮内の成長の制限 (IUGR) (として知られている胎児発育制限) 児 (出生体重 <妊娠年齢の 10 パーセンタイル)、(< 妊娠 37 週で生まれた)、早産や低出産 (< 2500 g) の重量を占めるすべての新生児2,3のほぼ 10%。これらの幼児の多くは脳性麻痺および発達障害 (注意欠陥/多動性障害 (ADHD) や学習障害など) 3,4,5などの神経学的な問題を呈する。それらの条件の類似性とその病因と成果の違いがあります。IUGR の病因は、多因子性と胎盤機能不全子宮内血流の低下に関連付けられている、非異常胎児7の最も一般的な原因と見なされます。早産の病因は多因子同様、絨毛羊膜炎、最も頻繁な原因8。
脳の発達に軽度子宮内低灌流 (MIUH) の影響は不明です。現在子宮内低灌流/虚血の利用可能な動物モデルは主に重度の低灌流や虚血再灌流9,10
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プロトコル
実験動物の世話と国立脳と循環器病センター、吹田、日本の利用委員会によって承認されたプロトコルに従ってすべての実験を行った。
1. 動植物 MIUH 手術のための材料を準備しなさい
- 17、妊娠日タイミング妊娠ラットを準備、すなわち胚日 17 (E17)。ダムの平均体重が 307.0 ± 40.7 g (平均 ± SD、 n = 9)。
- 金属マイクロ コイル; を準備します。内径 0.24 mm、ゴールド コーティングのスチール製。
- 材料表に従ってすべての材料を準備します。
2. MIUH 手術を準備します。
- ラットの配置のための 37 ° C で加熱パッドをウォーム アップします。
- 加熱パッドでの滅菌のおむつを配置します。
- 37 ° c 水のお風呂で暖かく滅菌生理食塩水
3. MIUH 手術を行う
- 無菌条件下での手術の手順を実行します。コイル、鉗子、使用前に 70% アルコールで針を消毒します。滅菌手袋を使用し、時折エタノール スプレーを適用することで消毒します。
- 麻酔誘導ボックスにラットを配置します。ボックス (約 5 分) に 4% イソフルランをご紹介します。
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結果
すなわち、子宮を栄養動脈、両側の子宮および卵巣動脈のすべてにマイクロ コイルを適用した後すべての胎児が低灌流の対等なレベルにさらされます。0.24 mm の内径のマイクロ コイルのアプリケーションを引き起こすそれにより胎盤と胎児への血流の軽度低下を引き起こすそれらの動脈の狭窄 (図 3; 胎盤で前狭窄レベルから約 30% を参照してください詳細については 1 を参照)。ダムから生まれた子犬は、IUGR (表 1) を示しています。
ダムは、手術後、数日中に性的と思われます。それ以外は、ダム顕著な合併症を提示していない、手術後 1 週間で完全に回復。ダムは配信後に長い時間のために生きることが (死亡率は観察のための 0% 期間)、看護師の子犬に。コイルは、同じ場所に残ります。
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ディスカッション
両方の子宮角の卵巣と子宮動脈栓塞狭窄は、すべての胎盤と胎児の一貫性と再現性のある子宮血流の低下を生成します。血流の低下のレベルは、異なる内径マイクロ コイルを使用して変更できます。マイクロ コイル内径 0.24 mm を持つ動脈狭窄したダムから生まれた仔は、IUGR と早産 (詳細については参考 1 を参照) を示しています。子犬は、早産児にみられる症状のような神経解剖学的および行動の変化を示します。これらの神経解剖学的変化、心室の拡大、皮質と脳梁の間伐や脳重量がない明白なセル損失または嚢胞性病変1の減少があります。行動の変化を観察、遅延が含まれます新生児反射、減らされた筋肉強さおよび自発1に変更します。
子宮内の虚血を研究に基づいて重症虚血再灌流と短い期間にわたって動物モデルは頻繁に使用される10,11。卵巣と子宮動脈から形成された動脈アーケードの両端がクリッピングする.......
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開示事項
著者が明らかに何もありません。
謝辞
この作品は、日本学術振興会、CNRS、日本学術振興会科研費助成番号 26860858、ナリシゲ神経科学研究助成の年度 2013年研究交流によって支えられました。有用な議論、夫妻真理子原田芝と塩谷恭子に感謝します。優れたテクニカル サポート恵美田中律子真希、睦坂本マリ古田をありがとうございます。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 実体顕微鏡 | |||
| イソフルラン麻酔器 | |||
| 麻酔誘導ボックス | |||
| 加熱パッド | |||
| おむつ30x40cm | |||
| 脱毛フォームまたはシェーバー | |||
| ウ素消毒液 | |||
| ガーゼ 10x20 cm | |||
| 直径5cm | |||
| 消毒用 | |||
| 綿棒 綿棒 | |||
| 大きな鈍い先端 | |||
| 角度のついた細い先端 | |||
| さみ | |||
| 手術用メス、刃長27mm(No.10, Axel, AS ONE Corporation, 大阪) | |||
| 手術用縫合針 | |||
| 金属マイクロコイル 内径0.24mm、金メッキ鋼製 (サミニ株式会社、静岡県静岡市) | |||
| シルク縫合糸 4-0 | |||
| 滅菌生理食塩水 (0.9% 塩化ナトリウム) | |||
| 加熱ウォーターバス | |||
| プラスチックシリンジ(50ml)と針(18G) |
参考文献
- Ohshima, M., et al. Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity. Sci Rep. 6, 39377(2016).
- Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from: http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html
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再版と許可
