このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

癒しの標準化された生体力学的条件下でマウスの軟骨破壊を分析する低侵襲モデル

7.8K 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/57255

⸱

2018年3月22日

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

この記事について

サマリー

このプロトコルでは、大腿骨の骨折は、癒しのマウスにおける軟骨内骨を分析するための標準化された安定化髄内ねじを用いた低侵襲骨接合法について説明します。

要約

骨の治癒モデルは骨折臨床骨折治療を改善する治癒の複雑なメカニズムを分析する必要があります。過去 10 年間の間に整形外科研究マウス モデルの使用の増加を認め, 最もおそらくマウス モデルは、多数の遺伝子組み換え系統と骨折治癒の分子機構の解析のための特別な抗体を提供していますので。生体力学的条件を制御するためよく特徴付けられる骨接合技術がマウスでも、必須です。ここでは、マウスの大腿骨骨折を安定させるためにデザインと閉じた骨治癒モデルの使用について報告する.医療グレード ステンレス製髄内ネジ破壊圧縮による軸力と回転安定性の完全な欠如を示す主に使用される単純な髄内ピンと比較して軸と回転の安定性を提供します。髄内ネジにより安定性には、軟骨内の癒しの分析ができます。カルス、ねじによる安定化以降の大量では、生化学的・分子解析のための組織を収穫するための理想的な条件を提供しています。ネジの使用のそれ以上の利点は、ネジを軟部組織への損傷を引き起こすことがなく低侵襲技術と大腿骨に挿入できること事実です。結論としては、ネジでは、閉鎖骨折モデル標準化された生体力学的条件を提供を治癒が理想的に使われることができますユニークなインプラントです。

概要

マウスの骨治療の研究は、大きな需要、抗体や遺伝子組み換え動物の広いスペクトルのためこれらの事実は、骨治癒1の分子機構を研究することを。過去数年間では、癒しモデルのマウスがされている別の骨は2を開発しました。これらのモデルは、オープン モデルである骨は切り離した骨オープンの横外科的アプローチを使用しておよび Bonnares、アインホルン3で導入された破壊モデルに基づく骨がフラクチャされて閉鎖のモデルに分けることができます。この手法を使用すると、標準化された横骨折は 3 点曲げデバイスによって作り出すことが、主要な軟部組織の外傷を避ける低侵襲技術で小さな内側 parapatellar 切開髄内インプラントを挿入できます。

髄内ネジは、マウスの閉鎖骨折の安定化のために適用できます。ネジは回転と軸の安定性を提供しています。これは近位撚り糸と、遠位の頭4破壊圧縮によって達成されます。ねじのそれ以上の利点は単純な手技、invasivity、低の低グレード インプラントの重量および、特に、他の髄内と比較して標準化され、制御された生体力学的条件を提供する高い安定性インプラントの5を。実際には、最も閉鎖骨折モデルにおけるフラグメントは回転と軸の安定性の完全....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

すべてのプロシージャの実験動物の使用のための健康の国民の協会ガイドラインに従って行われ、制度ガイドライン (Landesamt für Verbraucherschutz、Zentralstelle Amtstierärztlicher した、ザールブリュッケン、ドイツ)。

1. 手術器械やインプラントの準備

  1. 器具ボックスからメスの刃 (サイズ 15)、小さい綿棒、微細鉗子、27 G 針、5-0 の非吸収性縫合糸、はさみ、ニードル ホルダーを選択します。
  2. 髄内ねじ、ガイド ワイヤ (直径 0.3/0.2 mm、長さ 10 cm) を開梱、センタリング ドリル ビット (0.5 mm 径) と手ドリル (図 1;材料の表を参照してください)。
    注: 髄内ねじ (直径 0.5 mm、長さ 17.2 mm) は、大腿骨への逆行性注入用医療グレード ステンレス鋼の行われます。ネジにはヒントと遠位円錐形の頭 (直径 0.8 mm、0.9 mm の長さ) 軸と回転の安定性と同様、破壊圧縮を達成するために、(直径 0.2 mm、0.4 mm) の鼻を持つ近位部スレッド (直径 0.5 mm、4 mm)。
  3. インプラントと 5 分間消毒ソリューション (96% アルコール) にすべての手術器具を公開または (蒸気滅菌、130 ° C、2....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

創傷閉鎖に皮膚切開から営業時間 20 分であった。ステレオ顕微鏡することがなく手術が行えます。術後、毎日動物を監視しました。動物のどれもこの期間後痛みの形跡が見られたために、術後鎮痛が 2 日後終了しました。動物は術後後 2 日以内通常荷重をまた示した。全体の観察期間中に創感染は認められなかった。

放射線解析カルス組織破壊の橋渡し (図 4 a) の明白な形成を示した 2 週間後。5 週間後、破壊が癒されましたと骨膜のカルスはほぼ完全に改造 (図 4 b)。

カルスと 2 週間後の断層破砕帯の組織学的解析は、軟骨内軟骨軟骨処理中に構築とヒーリングの典型的な組織分布を示した骨 (

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

外科的処置の重要なステップのリーマの骨軸に平行大腿骨顆顆間ノッチだけでなく、針の最適な方向の真ん中にネジ注入の正しいエントリ ポイントを見つけることが、髄腔。不適切なエントリの位置を避けるためには、外科医が最適な表示を達成するまで切り込みを準備しなければなりません。リーマ加工中には方向を制御するため、マウスの大腿骨を安定した位置に指で負うべき。さらに重要なステップだ大腿骨にネジの挿入ガイドワイヤー ガイドワイヤー脱臼骨折の近位骨片から抜け出すことができます。この場合、外科医は骨片を再度、スレッドしようことができますが、この演習がほとんど成功しないと動物は、研究から除外する必要があります。

さらに、手術は、いくつかの合併症を開発可能性があります。たとえば、乳歯に最適なビューを取得する横方向にシフトされている膝蓋靱帯が破裂します。スクリュー挿入後、靭帯の縫合が必要です。乳歯の骨を開くと髄腔リーマの間に乳歯がバーストします。この場合、ネジは遠位端で適切に修正できないし、破壊の圧縮効果が得られないため、トラブルシューティングの可能性はないです。別の合併症は、挿入したガイドワイヤーまたは骨か.......

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

著者は、彼らは競合する金銭的な利益があることを宣言します。

謝辞

この作品は、RISystem AG は、スイスのダボスによって支えられました。

....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
マウススクリューRISystem AG221,100
ガイドワイヤーRISystem AG521,100
センタリングビットRISystem AG590,205
ハンドドリルRISystem AG390,130
綿棒 (150 mm、スモールヘッド)Fink Walter GmbH8822428
縫合糸 (5-0 Prolene)Ethicon8614H
鉗子ブラウンAesculap AG &CoKGBD520R
さみブラウン Aesculap AG &CoKGBC100R
ニードルホルダーブラウン Aesculap AG &CoKGBM024R
27 G ニードルブラウン メルズンゲン AG9186182
メス刃 サイズ 15ブラウン Aesculap AG &CoKG16600525
熱放射Sanitas605.25
脱毛クリームAsid bonz GmbHNDXZ10
眼潤滑剤Bayer Vital GmbH2182442
XylazineBayer Vital GmbH1320422 Ketamine
Serumwerke Bernburg7005294
TramadolGr&うーん;nenthal GmbH2256241
消毒液(SoftaseptN)Braun Melsungen AG8505018
CD-1マウスCharles River22
X線装置Faxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation2321A0988
骨折装置 小型RISystem AG891,100
は器

参考文献

  1. Jacenko, O., Olsen, B. R. Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders. J Rheumatol Suppl. 43, 39-41 (1995).
  2. Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone.....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

さらに記事を探す

マウス骨折モデル髄内スクリュー低侵襲手術生物力学的安定性仮骨組織形成放射線学的解析組織学的解析曲げ剛性測定