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方法論記事

ひと歯肉移植血管新生を監視への新しいアプローチ

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DOI:

10.3791/58535

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2019年1月12日

 ,  ,  ,  , 
1Department of Conservative Dentistry, Faculty of Dentistry, Semmelweis University

この記事について

サマリー

本研究では、レーザー レーザースペックル コントラスト イメージングによるひと口腔粘膜における微小循環動態を測定するためのプロトコルを紹介しています。監視は創傷治癒の口蓋他家コラーゲン移植併用は臨床例で示される後。

要約

レーザー レーザースペックル コントラスト イメージング (LSCI) は、広い領域での表面的な血流を測定する手法です。非侵襲的測定領域との直接接触を回避できますので、人間の患者の創傷治癒過程における血流変化をモニタリングに適しています。口蓋は、角化歯肉の同時拡大と前庭の深さを復元を目指す口腔前庭に歯周外科手術です。この特別な場合は臨床分割厚みのフラップが最初上顎小臼歯で昇格し、他家コラーゲン マトリックスは結果受信者ベッドに合わせられました。LSCI は、1 年間再と人工血管と周囲の粘膜の血管新生を監視する使用されました。プロトコルは、困難や障害の可能性を強調、口腔粘膜の微小循環測定の正しい調整の登場です。

発表した臨床事例研究はことを実証-適切なプロトコルに従う、LSCI はヒトの口腔粘膜の創傷治癒における微小循環をフォローしてくれて適切かつ信頼性の高い方法であり移植統合に関する有用な情報を与えます。

概要

臨床状況における歯肉微小循環人間の長期的な変化を監視する口腔・歯周外科でホットな話題です。しかし、血流の信頼性の評価が難しくなります。侵襲的人間の粘膜の血液循環の変化を測定しない少数の方法だけがあります。2 つこれらの採用、レーザー ビーム1,2,3,4が別の方法で。レーザードップラー (LDF) は、ドップラー シフト レーザー ビーム5,6、中レーザー レーザースペックル コントラスト イメージング (LSCI) 法赤い血の速度を測定する反射レーザー光のスペックル パターンに依存しています。セル7。

LDF を一点でのみ測定し、センサーの位置の再現性のある標準化が望ましいまだ困難なタスク。別の問題は、LDF のプローブは小口径 (1 mm2) です。手術前にあらかじめ決められたポイントで測定はあまりにも特殊で、浮腫、組織の除去、組織の動きや移植の移植は影響を受け術後幾何学の重要な変更を引き起こす術後の循環動態にブラインドがあります。軟部組織。LDF の測定距離は、組織の体積が変化する場合のプローブのため所定の孔を有する歯科スプリントの使用を禁止されている 1 ミリメートル未満のものです。LSCI のローカリゼーションのための任意の特別なツールを必要としない、いくつかの cm2の領域で測定することができます。その結果、創傷治癒は、手術のサイト全体で続くことができます。さらに、LSCI は 20 μ m までの解像度を持つ、2 番目の分数で色分けされた画像に血流を表示できます。

本稿で LSCI デバイスは、小さな測定領域の高解像度が必要な動物の研究用途のほとんど使用されます。しかし、ヒトの口腔粘膜の構造学 (前庭粘膜、歯肉付着歯肉) 領域に領域とは異なるが、血液の循環は異種8ではまた。したがって、高解像度 LSCI は、通常は人間のテストで使用される標準解像度 LSCI 以上の大きな利点を持ちます。

LSCI 計測器では、目に見えないレーザー (波長 785 nm) を採用しています。ビームは、スペックル パターンの作成、測定領域を照射する分岐です。CCD カメラは、照射領域のスペックル パターンをイメージします。このシステムで使用される CCD カメラ 1386 x 1034 ピクセルのアクティブ画像領域があり、解像度は 20-60 μ m/ピクセル ソフトウェア (低、中、高) の設定、測定領域のサイズに応じて。イメージを縮小する場合 16 フレーム/秒、さらに、100 フレーム/秒、最大の速度で画像をかかります。血液灌流は、組み込みソフトウェアによって計算されます。スペックル パターンの変動を分析し、コントラストを定量化します。結果のフラックスは、灌流画像を生成する暗号化された色です。私たちの以前の結果によると LSCI は良い再現性と再現性9と歯肉の血流を評価します。これは短期実験のみならず癒し10を傷や病気の進行を追跡する長期的な研究の中には、口腔粘膜の微小循環の変化を監視するための信頼性の高いツールであることを意味します。

LSCI の高空間分解能により、異種コラーゲン血管の新生血管パターンを明らかにすることを実証する臨床例を提案します。さらに、この場合は、LSCI、その高い信頼性により検出ができた個々 の変化を示します。これは重要なローカル解剖学的バリエーションとして重要と臨床歯周外科手術の標準化が困難なケースの間の異なる全身背景。

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プロトコル

健康登録およびトレーニング センターのハンガリーの委員会から倫理的な承認を付与された臨床試験で報告された方法を用いて (承認番号: 034310/2014/OTIG)。

1. LSCI セットアップ

  1. コンピューターとすべての周辺機器をスイッチします。
  2. 背面パネル上のスイッチで使用される LSCI の楽器を切り替えます。
  3. 少なくとも 5 分間のウォーム アップに楽器を許可します。楽器は、背面パネルに両方の Led が点滅して停止して測定にも対応。
  4. デスクトップ上または [スタート] メニューを介してソフトウェア アイコンをダブルクリックして、ソフトウェアを起動します。
  5. レーザーが暖かいことを示す黄色と背面パネルにある緑の Led は点滅、停止しているまで待つと初期化は完了です。
    注: システムの起動時に、1 つ時折促されるシステムの検証手順を実行します。

2. システムの検証

  1. 供給調整ボックスを使用します。調整ボックスからふたを外し、コロイド懸濁液の沈降を避けるためにそれを振る。
  2. 30 オフ蓋のまま泡を避けるために。
  3. 調整ボックスに戻って、蓋を置きます。
  4. 高度なをクリックして |検証 |楽器を確認。
  5. 検証ルーチンを選択 |次。
  6. ヘッド 90 ° を切り統合された磁石を使って調整ボックスを留める [次へ] をクリックします。
  7. テキスト ボックスに部屋の温度を入力、° C を選択し、開始] をクリックします。
  8. ウィザードの検証手順が完了するまで待ちます。
  9. 検証が成功した後の手順は、完了をクリックしてウィザードを閉じます。

3. 参加者の準備

  1. 恒温室 (26 ° C) で測定を実行することを確認します。
  2. 歯科用椅子で快適な仰臥位で患者を置き、真空 (図 1) 彼の頭の下に枕を置きます。
  3. 患者が、測定を行う前に 15 分間平静のままにします。

4. 微小画像計測

  1. [ツール] メニューで、選択し、プロジェクトのエディターをクリックします。一般的に使用される設定を保存することができます新しいウィンドウが開きます。
  2. [プロジェクト] ボックスで、新しいプロジェクトを作成する新規をクリックします。「Vestibulum」を入力し、、ok をクリックしますします。
  3. [サイト] ボックスで、新しいサイトを作成する新規をクリックします。「歯 14」を入力し、[ok] をクリックします。
  4. 歯 14 内容パネル [ワーキングディ スタンスの必要な距離として"10 cm"を追加し、測定ボックスに幅 3 cm と 2 cm の高さを入力します。
  5. ポイント密度解像度を通常し 16 画像/秒のフレーム レートに設定し、録音時間を 0 に設定する期間のドロップ ダウン メニューから時間を選択: 30。
  6. 「平均で記録」を選択し、色写真取込レートを 1/秒に設定します。
  7. プロジェクト パラメーターを保存するには、「適用」と"OK"をクリックします。
  8. ファイル] メニューの [を選択し、新しい記録をクリックします。新しい画像ウィンドウが開き、セットアップ パネルが表示されます。
  9. レコーディングの設定、[プロジェクトと"歯 14「4.9「Vestibulum」を選択します。サイト。
  10. テーマドロップ ダウン メニューを開いて、[テーマを選択] ダイアログ ボックスで新規をクリックし、患者の名前を入力します。
  11. [Ok] をクリックし、[録音名] フィールド録音の名前を入力: 例えば、1 日目 (術後後経過日) と演算子] フィールドにオペレーターの名前。
  12. 微小画像計測、測定患者の血圧、脈の前に。
  13. 患者の頭部を調査の下の領域に適切な位置に固定する真空の枕から空気を避難させます。
  14. 患者は彼の口を開くことを求めます。
  15. 2 歯科用ミラー (図 1) によって優しく唇を撤回します。
  16. 歯肉の測定領域に平行測定器のヘッドを調整します。組み込みの表示 (650 nm) インジケーター レーザー患者の口を基準にして撮像素子の位置決めが容易になります。
  17. 組織関連計測器で 10 cm の作動距離を調整できます。LSCI デバイスでの距離の測定を連続とソフトウェア、イメージ セットアップ作業距離/測定値として表示されます。
  18. 測定の期間で滞在する主題を指示します。
  19. 録音開始、録音ボタンをクリックします。画像ウィンドウの色は、赤、記録が進行中であることを示すに変わります。セットアップ パネルは、録音パネルに置き換えられます。30 以降後記録が自動的に停止した s。記録を終了すると、画像ウィンドウの変化、青および記録のパネルの色は確認パネルに置き換えられます。
  20. 歯科用のミラーを削除し、彼の口を閉じたり、飲み込む患者。
  21. 記録を再開ボタンを押してライブ画像に切り替えます。
  22. 4.21 へ 4.14 からの手順を 2 回繰り返します。
  23. ファイルを閉じます。データは自動的に保存されます。
  24. 血圧測定、LSCI 測定後パルスします。

5. オフライン解析

  1. 組み込みソフトウェアを使用して LSCI 画像を分析します。イメージまたは分割ビュー (図 2) に移動します。
  2. 利益 (率 ROI) の領域を定義します。注: ROI 内のピクセルの血流値は平均、レーザー スペックル潅流単位 (LSPU) と呼ばれる任意の値で表した ROI の血流値として定義されています。
  3. 右側の ROI ツール パレット内で ROI 形状を選択します。
  4. ROI ツール パレットでは、投資収益率操作を記録のすべてのイメージに適用に適用] オプションを選択します。
  5. クリックして投資収益率を描画し、強度画像にマウスボタンを押したまま、投資収益率を目的のサイズにドラッグ、マウス ボタンを離すボタン (クリックしてフリー フォーム ・ ロワの] をダブルクリックします)。ROI の位置調整、サイズ変更または回転するために必要な場合。
  6. 5.3 からの手順を繰り返します。5.5 ・ ロワ (図 3) の目的の数として多くの倍。
  7. 興味 (TOI) の期間を定義します。これにより、投資収益率の一定期間 (図 2) で灌流を平均化します。
  8. グラフまたは分割ビューに移動します。TOI の追加ツールを選択します。
  9. クリックし、TOI を開始し、目的の終了位置にカーソルをドラッグして位置をグラフを保持します。マウスのボタンを離します。
  10. さらに処理するための平均値テーブルからデータをエクスポートします。
  11. 統計分析のために使用される適切なソフトウェアによって血流曲線を構築します。

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結果

口蓋は、前庭の深さ、角化歯肉と強化された美学と機能の軟部組織厚のゾーンを増やすことを目指して口腔前庭に歯周外科手術です。コラーゲン マトリックスと組み合わせたポンティック部再配置された分割厚さのフラップは、口蓋の頻繁に使用されるプロシージャです。他家コラーゲン マトリックスは角化歯肉11,12,13の量を増やすため自家歯肉移植に代わるただし、データは移植を血行再建術の方向と周囲の組織の微小循環に及ぼす影響について利用できるありません。これらのメカニズムを理解することと、適切なフラップと歯周外科における切開デザインを促進するかもしれない。

上顎第 1 小臼歯で角化歯肉幅が不十分な 17 歳の男性患者は、コラーゲン マトリックスと組み合わせたポンティック部再配置された分割...

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ディスカッション

本研究の目的は、ひと歯肉移植の血管新生を監視するための新たな手法を導入することだった。私たちの以前の結果によると LSCI は、重要な要件として計画されたプロトコルの各ステップの厳格な実施が満たされると良い再現性と再現性9歯肉の血流を評価します。LSCI は、精度と安定性を確保するため定期的にキャリブレーションが必要です半定量的手法と見なされます。検証中に灌流を計算するこの値は検証アルゴリズムで使用されるために、部屋の温度をできるだけ正確に測定しなければなりません。

LSCI メソッドは、作業距離の設定と運動の成果物と同様に非常に敏感です。この研究では、作動距離を 10 cm に修正しました。測定エリアは 2.7 cm × 2 cm、約 3 つの歯幅歯肉領域に相当します。効果的なフレーム レートは 16 画像/秒と 0.06 秒/画像動脈パルス誘導歯肉微小循環9記録から平均化され、拍動変化として。急速なイメージングも動きの人工物のリスクの減少。ただし、不適切な設定や患者の動きの場合録音を...

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開示事項

著者が明らかに何もありません。

謝辞

この作品はハンガリー人間の能力、高等教育の卓越性プログラム療法研究モジュール センメルワイス大学、省の許可番号 K112364 の下でハンガリーの科学研究費による支援から一部で実施された、研究、開発、イノベーション オフィス KFI_16-1-2017-0409。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
PeriCam PSI-HRPerimed AB、ストックホルム、スウェーデンPeriCam PSIシステムは、LASCA技術(LAser Speckle Contrast Analysis)に基づくイメージングシステムです。このシステムは、広い領域にわたる表在性血液の灌流を高速な捕捉率で測定します。これにより、ほぼすべての組織における微小循環の空間的および時間的ダイナミクスの研究に理想的です。
PIMSoftPerimed AB、ストックホルム、スウェーデンPIMSoftは、表在性血液灌流の測定とイメージングのために、PeriCam PSIシステムおよびPeriScan PIM 3システムと一緒に使用することを目的としたデータ収集および分析ソフトウェアです。
Geistlich MucograftGeistlich, Switzerland軟部組織の再生のために特別に設計されたユニークな3Dコラーニュマトリックスです。角質化した組織の増加と不況の補償範囲に適応されます。
オムロンM4ムロンヘルスケア株式会社、京都、日本正確な測定値を提供する血圧計。
Nikon D5200ニコン株式会社、東京、日本口腔内写真の撮影
MS ExcelMicrosoft Corporation、レドモンド、ワシントン、米国データ管理に使用するソフトウェア
IBM SPSS Statistics 25IBM Corp.、アーモンク、ニューヨーク、米国統計分析に使用するソフトウェア
オ

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