マウスの消化管吻合の作成

サマリー

吻合部リークまたは手術後の内訳は、術後合併症と死亡率の主要な原因です。結腸吻合を作成するための手術は、吻合部の治癒のメカニズムを研究するため信頼性が高く、再現性のある方法です。

要約

腸管吻合は、一般科目と創発的操作に実行されます。それでも、吻合部リークは大腸手術の非常に恐れられていた合併症、外科的吻合の 26% までの死亡率 39% まで患者このようなリークをされていると発生する可能性が。現在、吻合部治癒の分子機構の詳細データの少なさが残っています。予防戦略と吻合部リークのための治療法を工夫することは、適切な吻合部の治癒のよりよい理解によって大幅増強する。

マウスモデルはマウスの吻合が他の動物と比較して人間のケースに臨床的に最も似ている以前の研究が示したように最適です。我々 は結腸吻合術吻合部治癒のさらなるイラストは、マウスで簡単に再現できるマウスモデルを提供しています。

概要

腸の外科的吻合の高い恐ろしい合併症は吻合部の内訳や漏れです。腹腔内に管腔内内容の流出を引き起こす、腹部敗血症; に迅速につながる生命脅かすとすることができますは、吻合部のリーク衝撃率 0.3% から 5.5% 次の小腸吻合に変わるや結腸吻合^1,226% と 0.5% の間に上昇します。次のリークの死亡率は、敗血症と腹腔内汚染³の死に急速な進行の迅速な発症のための 39% と高いことができます。予防戦略と治療現在、十分に理解されていない病態に基づいています。

現在、吻合部の治癒は、しばしば比較より広く研究皮膚創傷治癒には比較的貧しいファクシミリをあると証明します。癒しに一連の lag phase で始まる重複のフェーズで発生します。腸吻合の作成後 0-4 日間遅れ相は細胞の残骸の傷を消去する急性炎症反応によって定義されます。次に、3-4 日間で、線維芽増殖とコラーゲンの産生が fibrophasia 相を象徴します。最後に、10 日後コラーゲンリモデ リングの長期間は成熟フェーズと呼ばれます。コラーゲンが堆積⁴まで縫合吻合部の強度は非常に低く、外科的に置かれたステープルの外因性のサポートに依存することが重要です。役割を理解し、タイミング各吻合部創傷治癒および吻合部の故....

プロトコル

次のプロトコルは、オクラホマ大学健康科学センター施設動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) によって承認されているし、研究の動物の使用に関するすべての制度的倫理的なガイドラインに準拠しています。さらに、動物実験に関する制度、州および連邦の規制に従ってすべての実験を行った。

注: このプロトコルの 72 に 12 週齢で女性と男性コンジェニックで飼育された C57BL6/J マウスを使いました。この手順で使用されるすべてのマウスは、ローカルのバイオームに適応する操作の前に、少なくとも 1 週間の私たちの非バリア施設で保たれました。操作の時間供給する動物、経口機械的腸管もプロシージャ前に直腸洗浄を使いました。

1) 吻合の作成

1. オートクレーブ手術用器具、生理食塩水灌漑解決を暖めるし、70% のエタノールで手術表面を徹底的に掃除します。
2. 麻酔を誘導して、気化器に接続されている誘導ボックスにマウスを配置します。マウスを鎮静するまで 1-2 L/分で 2-3% イソフルランを提供します。
3. 低体温症を防ぐために、加熱パッドなど、地球温暖化のデバイスに動物を配置します。
4. 1 つを皮下注入術前抗菌薬予防投与のエンロフロキサシンの 10 mg/kg の線量 0.1 mg/kg ブプレノルフィン (30 g マウス 3 μ g) の術後鎮痛のための時間投与量と....

結果

7 日術後、吻合する必要がありますも癒されます。吻合部は後より 7 日間は、吻合部の治癒の段階を示して前に、時点で収穫することができます。図 9、組織学的分析の結果、線維 (コラーゲン ヒアリンの汚損によって視覚化) 平滑筋 α アクチン陽性芽によって仲介される応答。ただし、マウス、特に再上皮化および吻合部に芽の濃度の程度間組織学的解析の結果が異なることがわかった.この手順は、7 日間でよく治癒吻合を持つマウスを存続の 90% 以上 10% 未満に死亡率を報告する.

図 1:ドレープと手術準備します。A (A

ディスカッション

確実に成功し、この手順に関連する罹患率/死亡率を最小限に抑えるいくつか主要な手順があります。まず、腸組織の慎重な取扱いの確保し、コロンを公開する内臓を回転させるときに牽引損傷に気をつけましょう。腸や腸間膜に過度の緊張は、吻合部から腸や血管原因腸壊死の損傷をことができます。また、シャープな鉗子または歯の鉗子をいない使用腸を処理します。

内臓回転中または鈍的プローブを用いた穿孔による計画的吻合部から別の腸への損傷は動物の安楽死になります。我々 の経験で腸管壊死または損傷腹部敗血症や死と治癒後の吻合部試料の回収が難しく法外大幅に増加炎症反応につながります。

できるだけ多く、できるだけ下行結腸の大腸の切除にまたがる必要がありますが、ないトランセクト腸漿膜、腸間膜との接触には注意が必要があります。我々 の経験は、漿膜を含む断裂で-特に腸間膜が結腸吻合が難しく、引き込められたセグメントを回復しようとすると、それ以上の損傷につながる可能性の近位部の後退につながる。

5-6 縫合と吻合を.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
C57BL6/Jマウス	Jackson Labs	#00664
フィッシャーブランド吸収性アンダーパッド、20 "x 24"	フィッシャーサイエンティフィック	14-206-62
ポリライニング滅菌フィールド、18 "x 24"	ブッセ病院使い捨て	696	長方形の穴を開ける
イソテシア・イソフルラン	Henry Schein	50033
ッシャーブランド滅菌綿ガーゼパッド、4 "x 4"	フィッシャーサイエンティフィック	22-415-469
プラルベワセリン眼軟膏、1/8オンスチューブ	Dechra獣医製品	NDC 17033-211-38
ナイール脱毛クリーム	教会&ドワイト株式会社	22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml	Reckitt Benckiser Pharma Inc	NDC 12496-0757-5
1 ccインスリン注射器、27 G	Becton Dickinson	329412
Chloraprep Shampoo	Medline	APL82287
Webcol アルコール調製スワブ	Covidien	6818
BioGel PI 手術用手袋	Mölnlycke ヘルスケア	ALA42675Z
歯付きマイクロ鉗子	Roboz	RS-5150
ファインハサミ - シャープ	ファイン サイエンス ツール	14060-09
ストレート 鋸歯状鉗子	ファイン サイエンス ツール	11050-10
カストロ ビエホ ニードル ドライバー	ファイン サイエンス ツール	12565-14
0.9% 塩化ナトリウム 灌漑	バクスター	BHL2F7121	37°Cまで暖かい。C使用前の
10mlシリンジ	ベクトンディキンソン	309604
4-0ビクリル吸収性編組縫合糸、18インチ、PS-2針	ヘンリーシャイン
ブルーモノフィラメント縫合糸24インチBV-1 ニードル	ヘンリー・シャイン	8305H	通常、両腕が付属しています。縫合糸を中間点で切断して、使用可能な2つの縫合糸を生成します。
コールパーマーマイクロハサミ、標準グレード、ストレート、4インチ。	コールパー	マーEW-10818-06
メドライン滅菌潤滑ゼリー	メドライン	MDS032273H

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