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方法論記事

体外メゾスケール粒子画像流速測定法研究神経血管の流れ

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DOI:

10.3791/58902

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2018年12月3日

* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

ここで透明な神経血管ファントムを作製し、そこに流れを特徴づけるの簡略化手法を提示します。我々 は、いくつかの重要なパラメーターを強調表示し、フィールドの精度との関係を示します。

要約

粒子画像流速測定法 (PIV) は、幅広い分野、正確に可視化と大規模な時空間の範囲にわたって流の定量化は、機会のために使用されます。ただし、その実装は通常高価で、専門的な計測器より広範な応用を制限する使用を必要です。また、バイオ エンジニア リングの分野で体外流れ可視化研究は、しばしば、さらにそれらのために特に必要な解剖学的構造を要約するだろう商業的供給された生体ファントムの高コストによって制限されます。メソスケール政権 (すなわちミリメートルの長さスケール サブミリ) に します。本明細書で提案する簡易実験プロトコルが重要な要素に 1) 3次元印刷及びシリコン鋳造を用いたメソ組織ファントムを作製する比較的低コスト方法は、これらの制限に対処するために開発、2)メソスケールの流れを測定するための計測時に需要を減らしてオープン ソース画像の解析と処理のフレームワーク (すなわち、数十ミリの最大速度/秒)。まとめて、これは既に多くの工学研究者の処分で資源を活用してのうえ、エントリへの障壁を下げます。私たち刻みフロー解析、神経血管のコンテキスト内でこのプロトコルの適用しかし、それは生体内外のメソスケール アプリケーションの広い範囲に関連するとなっています。

概要

PIV は、流れの可視化と微小循環フロー1,2,3大気から長さスケールで変わる流体運動の定量調査のための実験流体力学で使用されています。その実装の詳細は、その応用として広く異なります 1 つの側面のほぼすべての PIV 研究に共通はトレーサー粒子連続の画像フレームのペア分析に続いて、作動流体内シードのビデオ画像の使用必要な流量特性を抽出。通常、これは、尋問 windows と呼ばれる小さな地域ごとのイメージのフレームを分割で。分散粒子のランダムな位置、結果として各尋問ウィンドウにはユニークな輝度分布が含まれています。ウィンドウ サイズとデータ レートが適切に選択されている場合は、その領域内で平均変位を推定する各ウィンドウで輝度信号の相互相関を使用できます。最後に、倍率とフレーム レートが実験的パラメーターを知られていることを考えれば、瞬時速度ベクトル フィールドは計算して容易に。

PIV のシングル ポイント測定技術上の主な利点は、2 次元または 3 次元ドメイン全体でベクトル フィールドをマップする機能です。血行動態のアプリケーション、特に、恩恵を受けているこの機能から血管疾患や改造 (例えば、アテローム性動脈硬化、血管新生) で重要な役割を果たすことが知られているローカ....

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プロトコル

1. ABS ベース犠牲型作製

  1. CAD ソフトウェアを使用して必要な組織ファントムの逆モデルを設計します。
  2. 建築材料として abs 樹脂 3 D プリンターを用いたモデルを印刷します。

2. PDMS による血管ファントム作製

  1. 混合
    1. (量り売り); PDMS プレポリマー ベースと比 10:1 硬化剤を混ぜる66 g の混合物は、50 cm3をボリュームとファントムの作製のための十分な材料を提供します。
    2. ドガし、気泡の巻き込みを最小限に抑えるために 60 分の真空デシケータで混合物を配置します。繰返し加圧・減圧を使用して、促進するバブル破裂します。
  2. 鋳造
    1. インターフェイスをシールする成形パテを使用してスライド ガラスに印刷された abs 樹脂金型をマウントします。
    2. 慎重に中に気泡の巻き込みを最小限に抑えるため、金型に PDMS の混合物を注ぐ。残留気泡は、針を使用して手動で破裂することができます。
    3. 少なくとも 24 時間室温 (25 ° C) で、cast、ファントムを治します。
      注意: 高温でこのプロセスは加速22

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結果

図 2は、PDMS 組織ファントムの作製プロセスを示しています。ここに設計されたファントム分岐 perforator 動脈近位部と同様に、理想的な首の全体、嚢状、頭蓋内動脈瘤内の流れの研究としています。重要な追加のデザインは、1 があります) すべての船は、液滴形成が起こる小さい容器店怪人 - それ以外の場合より負担のない流体出口を確保するために、ドレイン共通の貯蔵所2) バブル トラップ、気泡の取り出しを容易にする3) 窩の外側壁水平面の容器の並列処理だけでなく、最終的なファントムのスラブの高さ、長さ、および幅の正確な定義を確認するには4) 十分な忠実度でこのような機能を定義する私たちのプリンターのことができないのため、perforator 動脈成形用 21 G 注射針のシャンク (公称外径 820 μ m) の使用。全体のデザインのすべての機能を忠実に再現が観察されます。

現在のプロトコル.......

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ディスカッション

プロトコルは、神経血管を可視化する PIV 研究を実行するための簡易法流生理関連寸法と流量条件体外のアウトラインを記載しました。そうすることで、はるかに大きい長さの考察スケール25またはより低い流れを必要とする非常に異なるコンテキスト内でが、ベクトル場の定量化を簡素化に集中しても他の人によって報告されたプロトコルを補完するために提供しています料金は26,27 (例えば、大気中または微小流れ), と現在のアプリケーションと互換性がないスキームに依存したがって。

PIV の実装を成功させるための最も重要な考慮事項は、フロー フィールドのアーティファクトの最小化と画質の最大化にあります。組織ファントムの作製プロセスにいくつかの手順は、これらの条件の両方に重要です。混合時、ポリジメチルシロキサン内流入する空気量が忠実度の機能と光学的透明度の両方に悪影響を与えることができます最終的なファントム.......

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開示事項

著者申告するものがあります。

謝辞

著者らは、研究所とカリフォルニア大学リバーサイド校で経済発展から共同種の助成金によって提供されるこのプロジェクトの部分的なサポートを認めます。

....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
Solidworks 2015Dassault SystemsN/ACADソフトウェア 
ダウコーニングシルガード184キットエルスワース接着剤184 SIL ELASTキット3.9KGPDMSキット
Stratasys寸法エリートStratasys9180-001053D
プリンターP430モデル材料カートリッジStratasys340-21202ABSビルド材料 
P400 SR可溶性サポート材料カートリッジStratasys340-30200サポート材料
CleanStation DT3PM3ベースバス
LindbergブルーM LGOボックス炉 Thermo ScientificLB305745Mオーブン
21G BD PrecisionGlide ニードルベトコン ディケンソンBD 305167分岐穿孔器 モールドセグメント
デシケーター(真空)Polylab55205デシケーター
ブランソン 1800 Utrasonic クリーニングブランソンCPX-952-116Rソニケーター
アセトンフィッシャーケミカルA9494アセトン
イソプロポールアルコールフィッシャーケミカルA4514イソプロポールアルコール
グリセロールフィッシャーケミカルGW33500グリセロール
10um ポリスチレン 黄緑色 蛍光粒子マグスフィアPSF-010UM蛍光ビーズ
ファントム ミロ ビジョンリサーチミロ M310ハイスピードカメラ
マイクロポンプコール・パーマー81101循環ポンプ
ライカ DM2000ライカ マイクロシステムズDM2000蛍光顕微鏡
ライカ 10X 対物レンズライカ マイクロシステムズ 506259穿孔器用対物レンズ
ライカ 2.5X 対物ライカ マイクロシステムズ11506083対物レンズ動脈瘤嚢
ライカブルーフィルターキューブ L5ライカマイクロシステムズ513840ブルーフィルターキューブ
ライカEL6000ライカマイクロシステムズ11504115光源
アルコノックスアルコノックス1104-1洗剤
ImageJNIHN/Aオープンソース画像解析ソフトウェア
> https://imagej.nih.gov/ij/ Particle Image VelocimetryPIVプラグインQingson TsengN / Ahttps://sites.google.com/site/qingzongtseng/piv
テクノロジー00-00300Rレンズ

参考文献

  1. Grant, I. Particle image velocimetry: A review. Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part C: Journal of Mechanical Engineering Science. 211 (1), 55-76 (1997).
  2. Lindken, R., Rossi, M., Große, S., Westerweel, J.

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再版と許可

タグ

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