患者固有の3Dプリント肺モデルを用いた局所肺堆積の評価

サマリー

我々は、CTスキャン由来の3Dプリントされた肺モデルを調整可能な空気流れプロファイルを用いて、ローブレベルで局所肺堆積を定量化するための高スループットのin vitro方法を提示する。

要約

肺疾患に対する標的療法の開発は、局所エアロゾルの送達を予測する能力を有する前臨床試験方法の利用可能性によって制限される。3Dプリンティングを活用して患者固有の肺モデルを生成し、小葉肺沈着を定量化するための高スループットのインビトロ実験セットアップの設計を概説する。このシステムは、市販のコンポーネントと3Dプリントされたコンポーネントの組み合わせで作られており、肺の各ローブを通る流量を独立して制御することができます。蛍光エアロゾルを各ローブに送達し、蛍光顕微鏡を用いて測定する。このプロトコルは、患者の人口統計および疾患状態の広い範囲をモデル化する能力を通じて呼吸器疾患のための個別化医療の成長を促進する可能性を有する。3Dプリントされた肺モデルの幾何学と空気流れプロファイル設定の両方を容易に変調し、年齢、人種、性別の変化を有する患者の臨床データを反映することができる。ここに示す気管内チューブのような臨床的に関連する薬物送達装置は、肺の疾患領域への治療的送達を標的とする装置の能力をより正確に予測するために、試験セットアップに組み込むことができる。この実験的なセットアップの多様性は、それが吸入状態の多数を反映するようにカスタマイズすることができ、前臨床治療試験の厳しさを高める。

概要

肺がんや慢性閉塞性肺疾患(COPD)などの多くの肺疾患は、疾患特性の地域差を示す。しかし、肺の病気の領域にのみ薬物送達を標的にするために利用可能な治療技術の欠如^{がある 1}.複数の計算流体動的(CFD)モデルは、肺^2,3の特定の流線を特定することによって薬物堆積プロファイルを調節することができることを実証した。地域ターゲティング機能を備えた吸入器と気管内炎(ET)チューブアダプターの開発は、病気の肺領域へのエアロゾル分布を制御するために、当社の研究室で進めています。臨床使用にこれらの原則の延長は、現在の前臨床試験能力によって制限される。肺内の薬物沈着物の正確な位置は、有効性の最良の予測値であることが知られている;しかし、吸入可能な治療薬の現在の医薬品評価は、単に近似^堆積物に粒子サイズのin vitro-in vivo相関を使用して最も頻繁に予測される。この手法では、空間解析を行って、肺の各種ローブを通る地域分布に対する異なる気道ジオメトリの影響を判断することはできません。さらに、このテストは解剖学的に正確な肺の幾何学を欠いている、研究者が示している堆積プロファイル⁵に大きな影響を与えることができる。上気道の追加を通じて、患者固有の肺形状を試験プロトコルに組み込むためのいくつかの努力がなされている。しかし、これらのアプローチのほとんどは、各肺の葉^{6、7、8ではなく、}肺の様々な世代へのエアロゾルの送達^をサンプリングする。以下のプロトコルは、肺⁹の5つのローブのそれぞれで相対粒子堆積を定量化する能力を有する患者固有の肺モデルを生成するハイスループット方法を提示する。

解剖学的に正確なモデルの肺は3D印刷の患者コンピュータ断層撮影(CT)スキャンによって生成される。容易に組み立てられる流動システムと組み合わせて使用する場合、各モデル肺のローブを通る相対的な流量は、独立して制御され、異なる患者の人口統計および/または疾患状態のものを模倣するように調整することができる。この方法により、研究者は、関連する肺幾何学における潜在的な治療方法の有効性をテストし、各方法の性能を疾患形態の進行と相関させることができる。ここでは、私たちの研究室で開発された2つのデバイス設計は、口や気管内のエアロゾル放出の位置を制御することによって、所望の肺ローブの堆積物を増加させる能力についてテストされています。このプロトコルはまた、患者のCTスキャンデータに特異的なモデル肺における治療有効性の迅速な予測を促進することによって、患者のためのパーソナライズされた手順の開発に大きな影響を与える可能性を有する。

プロトコル

1. 3Dプリント実験部品の製造

注: プロトコルで使用されるすべてのソフトウェアは、 資料表に示されています。さらに、使用されるスライスソフトウェアは、 資料一覧に記載されている3Dプリンタに固有のものです。ただし、このプロトコルは、ステレオリソグラフィ (SLA) 3D プリンタの広い範囲に拡張することができます。

1. 患者CTスキャンを3Dオブジェクト(.stlファイル)に変換します。
   注: これらの研究で使用される特定の肺モデルの幾何学的特徴についての詳細な説明は、風らら⁵を参照してください。
   1. CT スキャン ソフトウェアを使用して CT スキャンを 3D オブジェクトにレンダリングします (「 材料表」を参照)。CT スキャンを開き、-800 ~ -1000 の範囲の設定を使用して [しきい値] ツールを使用して空域にマスクを作成します。 3D プレビュー ツールを使用して、3D レンダリングを表示し、オブジェクトを書き出す (ファイル |) を .stl ファイルとしてエクスポートします。
   2. ファイルをメッシュ編集ソフトウェアにインポートする(「表」を参照)は、選択ツール(スカルプト|) を使用して、ジャグジャグフィーチャを削除します。ブラシ: 「シュリンク/スムース」|プロパティ: 強度 (50), サイズ (10), 深さ (0)).サーフェスを滑らかにする(Ctrl +A ||の変形滑らかな|スムージング (0.2)、スムージング スケール (1) )。
   3. メッシュ編集ソフトウェアでは、これらのオブジェクトの壁を 2 mm 延長します(Ctrl+A ||の編集オフセット) をクリックし、内側のオブジェクトが壁だけが残るように中空のままにします。オブジェクトをスライスする([選択]||の編集気管で平面カット)を形成して入口を形成し、世代2または3ではオブジェクトが各ローブに分岐して出口を作成する(図1A)。
      注: 厚さ 2 mm は、 材料表に記載されている 3D プリンタの製造元によって指定された許容可能な機能サイズに基づいて選択されました。この厚さは、モデルの内部ジオメトリが維持されている場合、利用可能な 3D プリンタの仕様に基づいて調整できます。
2. 材料表に記載されている、以前に設計されたローブ出口キャップコンポーネント(図1B,C)と互換性があるように、患者 の肺モデルの出口ジオメトリを修正します。
   1. 内部のCTスキャンを複製する3Dオブジェクトは、壁厚が2mmで、入口と出口で開いている3Dモデリングソフトウェア( 材料表を参照)にソリッドボディ(開|) としてインポートします。メッシュ ファイル |オプション|ソリッドボディ)。
   2. 各コンセントの面に基づいて平面を作成する (挿入|参照ジオメトリ|平面)。スプライシングツールを使用して、平面上のスケッチ内のコンセントの内壁と外壁をトレース|スプライン)。
   3. モデルの内壁と外壁に接続するために、シリンダー(OD 18.5 mm、ID 12.5 mm、H 15.15 mm)をロフトし、各ローブで均一にする出口を伸ばします(特徴|ロフトボス/ベース).キャップに合わせて、アウトレットのエッジの周りにノッチを追加します (機能|押し出しカット|オフセット)。
      注: キャップ (図 1D)は、コンセントの寸法に一致する中空のシリンダで、モデルのコンセントのノッチと相互接続する棚があります。キャップの一方の端は、IDが部品の残りの部分よりも小さくなるようなブロックされ、これは、有刺鉄線の結びつきの周りにしっかりとフィットすることを保証します(図1E)。有刺鉄管接続は、バービングがキャップの開口部を通して収まるように有刺鉄線状のコーン形状ですが、残りの部分は、チューブ接続がキャップにしっかりと収まるようにしません。したがって、キャップは有刺鉄線のチューブ接続と肺モデルの両方の周りにしっかりと収まります(図1F,G)。
   4. 所望の実験条件に応じて、肺モデルの入口を修正する。咽喉および血嚢領域は、自分で呼吸できる患者を模倣するために含めることができる(図1B)。気管の上の領域は、人工呼吸器のサポート上の挿管された患者を模倣するために押し出されたカットを使用して除去することができる(特徴|押し出しカット) (図 1C)
3. 3Dプリンタメーカーが提供するスライスソフトウェアの実験コンポーネントを向き、サポートします。
   1. 3Dプリンタスライスソフトウェアに3Dパーツファイルをインポートし、適切な樹脂を選択します。硬質樹脂を使用して肺モデルと有刺鉄線の接続を印刷し、キャップを印刷するソフトレジンを使用します。
      注:キャップの印刷に使用される樹脂は、ローブの出口の上に伸びて気密シールを作成できるように弾性特性を持っている必要があります。
   2. 「アイランド」と未発明のボリュームが最小化されるように、部品の向きを設定します。肺モデルのための最もよい向きは印刷プラットホームから離れて向いているローブの出口である。有刺鉄線の接続とキャップの両方が印刷プラットフォームに面した広い部分を持っていることを確認します。
      注: 個々のスライスを表示して、パーツの本体に接続せずに、最初にスライスに表示される部分の「アイランド」の外観を確認できます。レビュー機能を使用すると、未開発のボリュームを持つスライス、未硬化樹脂が印刷中に部品の内部に閉じ込められる領域をチェックすることができます。「島」と未発明のボリュームの両方が印刷品質を低下させ、印刷障害につながる可能性があります。
   3. 各スライスを個別に表示し、パーツ内の残りの「アイランド」と、大きな張り出しがある領域にサポートを追加します。印刷用のスライスをエクスポートして表示し、すべての領域が適切にサポートされていることを確認します。
4. メーカーの指示に従って、実験コンポーネントと完全な後処理を印刷します。
   注: 以下に説明する処理後の手順はすべて、 資料一覧に記載されている 3D プリンタに固有のものです。代替プリンタまたは材料を使用する場合は、製造元の指示に合わせてこれらの手順を調整します。
   1. ソフト樹脂で印刷された部品の場合は、≥99%純度イソプロピルアルコール(IPA)で洗浄し、メーカー仕様に従って8時間の対流オーブンで過剰な未硬化樹脂とサーマルキュアを除去します。
      注:柔らかい樹脂で印刷された部品は、印刷直後に非常に繊細になる可能性があるため、クリーニングの段階では特別な注意が必要です。IPAへの暴露は、部品の劣化を防ぐために、材料の溶媒暴露限界以下に保つべきである。
   2. 硬樹脂で印刷されたパーツの場合は、IPAで洗浄して過剰な未硬化樹脂を除去し、UVオーブン(5-10 mW/cm²で365 nm光)で1回1分間硬化します。
      注:3Dプリントレプリカの精度を評価するには、印刷された部品とCTスキャンソフトウェアのμCTスキャンを使用して、元の3Dレンダリングと3Dプリントレプリカの間の変動を定量的に比較することをお勧めします。

流量制御のための管システムの2.アセンブリ

1. ネジ 1/4"有刺鉄管継手は、6つのポート(図2A-6)と残りのポートに取り付けられた3/8"有刺鉄管を備えたマニホールドの側面に取り付けます。
2. 1/4"チューブを所望の長さにカットし、プッシュ接続バルブの両端に挿入します(図2A-5)。マニホールドに挿入された 1/4 インチの継ぎ手の 1 つに各バルブを取り付けます。
3. 流量計(図2A-4)を各バルブの反対側に接続します。
4. マニホールドのシングル3/8"フィッティングがボードの端を越えて伸びるような木製ボードの上にチューブシステムを配置します。所定の位置に固定するには、木製のボードの側面に2本のネジを追加し、ワイヤーを使用してマニホールドをネジに取り付けます。
5. 各バルブと流量計の周囲に4本のネジを追加し、ワイヤーを使用して各ねじを木製ボードに固定します(図2E)。
6. 3/8インチIDチューブの約6"で、マニホールドをインライン0.1 μmの細孔サイズ真空グレードフィルターに接続します。3/8"IDチューブの別の6"を使用して、フィルタのもう一方の端をフローコントローラに接続します。
   メモ:チューブシステムは一度だけ組み立てる必要があります。

患者の肺モデルが付いているローブ出口の帽子のアセンブリ

注: プロトコルのこの部分は、実験を行う前に完了する必要があります。

1. キャップベースの開口部にノズルが突き出ている状態で、有刺鉄線チューブ接続をキャップに挿入します。まず、楕円形の有刺鉄線の接続ベースの一方の端をキャップに挿入します。その後、楕円形のベースの反対側に慎重に柔軟なキャップを伸ばし、細いベースを割らないように特別な注意を払います。
   注:新しく印刷されたキャップは、希望よりも硬く、キャップの内部に沿って2本の指を走らせると伸ばすことができます。
2. 10μmのフィルター紙を、出口面積より若干大きくカットします。ろ取り紙をローブの出口の上に折り、片手で所定の位置に保持します。
3. 一方、ピンセットを使用して、コンセント上に有刺鉄線のチューブ接続でキャップを伸ばします。キャップのノッチがローブの出口の対応するノッチと一致するまでキャップを押し下げる(図2C)。
   注: このステップでフィルターペーパーをリッピングすると結果が無効になる可能性があるため、キャップをコンセントに押し込む際の過度の力を避けるために特別な注意が必要です。
4. 残りのすべてのローブアウトレットに対して繰り返します(図2D)。

4. 臨床的に関連する空気流れプロファイルの生成

注: プロトコルのこの部分は、実験を行う前に完了する必要があります。

1. 各肺モデルローブ出口を対応する流量計とバルブのチューブに接続し、有刺鉄線チューブ接続に横方向の圧力をかけすぎないように注意してください。電子流量計を肺モデルの口口に取り付けて、肺モデルへの全空気流量を測定します。
2. フローコントローラ(図2A-7)と真空ポンプ(図2A-8)をオンにします。フロー コントローラの [テストの設定] 設定を選択し、電子流量計に目的の合計流量が表示されるまで流量をゆっくり上げます。
3. バルブを使用して(図2E-5)、右上(RU)、右中央(RM)、右下(RL)、左上(LU)、左下(LL)の5つの肺ローブのそれぞれを通して流量を調整します。流量計(図2E-4)に示すローブ流量が希望の値で安定したら、電子流量計の全体的な流量を再度確認して、システムに漏れが発生していないかどうかを確認します。
   1. 全体の流量に不一致がある場合は、流量コントローラで流量を下げ、すべてのバルブを完全に開いた構成に設定し、手順 4.2 と 4.3 を繰り返します。
      注:ここで示した結果は、Sul et al.¹⁰によって報告されたデータに基づく空気流れプロファイルを用いて得られたものであり、これらのロバーフロー画分は、患者の肺の薄いスライスコンピュータ断層撮影画像を使用して完全なインスピレーションおよび満了時に計算し、各肺葉の体積の相対的な変化を比較した。結果は、2つの異なる流れ条件(両方とも1 L/minの全体的な流入流量)に対して提示されます。健康な肺葉出口流れプロファイルは、入口流量の次の割合によって各出口に分配されます:LL-23.7%、LU-23.7%、RL-18.7%、RM-14.0%、RU-20.3%。COPDローブ出口流れプロファイルは、入口流量の次の割合によって各出口間に分配される:LL-10.0%、LU-29.0%、RL-13.0%、RM-5.0%、RU-43.0%9、10。
4. フローコントローラの"テスト設定"機能を終了しますが、真空ポンプはオンのままにします。
   注: 流量の設定と堆積実験の間に真空ポンプをオフにすると、生成されるフロープロファイルの不正確さにつながります。エアロゾル蒸着試験を完了するために望ましい流量が設定されたら、真空ポンプをオンにしておくことをお勧めします。

5. 肺モデルへのエアロゾルの送達

注:実験は、噴霧器によって生成されたエアロゾルへの暴露を最小限に抑えるために、サッシを閉じた状態でヒュームフードで行う必要があります。

1. 目的の蛍光粒子の溶液でネブライザーを充填し(図2A-1)、肺モデルインレットに接続する(図2B)。
   注:ここで示した結果は、メタノール中の1μm蛍光ポリスチレン粒子の1:100希釈の30 mLを使用して得られた。
   1. 実験の設定を検証するには、ターゲットデバイスなしで、ネブライザーを直接肺モデルの入口に接続します。
   2. ターゲットデバイスの有効性を測定するには、ネブライザーをデバイスに接続し、装置を肺モデルに挿入します。
2. 圧縮空気ラインをネブライザーに接続し、ヒュームフードサッシをできるだけ閉じます。
3. 10 の試行で実行するようにフロー コントローラーを設定します。スタートボタンを押す前に、圧縮空気バルブを少し開けて、ネブライザー内でエアロゾルの発生を開始します。
4. フローコントローラの[start]を押して、圧縮空気バルブをすぐに完全に開きます。フローコントローラが約9 sに達したら、圧縮空気バルブを閉じ始めます。
5. 圧縮空気バルブが完全に閉じられたら、ネブライザーを圧縮空気ラインから外し、ヒュームフードサッシを完全に閉じ、真空ポンプを遮断し、エアロゾルを煙フードから約10分間クリアします。
   メモ:真空がチューブシステム内に蓄積するのを防ぐために、実行が完了した後に真空ポンプをオフにすることが重要です。
6. 十分な時間待った後、肺モデルをチューブシステムから切り離し、有刺鉄線のチューブ接続をクラックしないように特別な注意を払ってください。
7. キャップの端の下にピンセットを実行し、肺モデルからそっと持ち上げることによって、ローブアウトレットキャップを取り外します。
8. キャップから濾紙を取り出し、プレートのウェルに面した底面に堆積した粒子の側面を持つ24のウェルプレートに入れる。残りの出口に対して繰り返し、各ローブに対応するウェルにラベルを付けます。
   注: 残留粒子の堆積が後続の実験に影響を与えないようにするには、肺モデルとキャップコンポーネントの両方をIPAまたは実行の間に適切な溶媒でリンスすることが重要です。これは、必要に応じて収集して分析に含めることができます。さらに、使用されるすべてのレプリカが部品の整合性を維持するために IPA に最小限の公開されていることを確認するためのログが保持され、使用前に部品の目視検査が推奨されます。

6. アウトレットフィルターペーパーイメージング

1. ウェルプレートをデジタル蛍光顕微鏡に入れ、顕微鏡を4倍の拡大と適切な蛍光チャネルに設定します。
2. 粒子の堆積量が最も多いローブのフィルターペーパーを視覚的に識別し、「オートエクスポーズ」機能を使用します。結果の露出と統合時間の値をメモします。
3. この露出を実行のすべてのフィルターに適用し、この設定によってフィルターのすべての高い堆積領域に対して満足のいくイメージが生成されるかどうかを評価します。
   注: フォーカス設定はフィルタからフィルタに変更できます。ただし、特定の実行のすべてのフィルターは、同じ露出設定で分析する必要があります。一度に1つの焦点フレームしか持てないので、濾紙の曲げや涙は、ビュー内のすべての堆積粒子が焦点を合わせないようにすることができます。これは、フィルターペーパーがウェルプレートの底部に対して平らであることを確認することによって回避することができます。
4. 各ローブのフィルター用紙の画像をランダムな場所で少なくとも3枚撮り、.tiffファイルとして保存します。

7. 粒子蒸着の定量化

1. 特定の実行のすべてのフィルター ペーパーの画像を ImageJ セッションにインポートします。
2. [イメージ] を選択して各イメージの種類を 8 ビットに変更 |タイプ|8ビット。
3. 蛍光が最も高い画像を開き、[ 画像||を調整するしきい値 ウィンドウを開くしきい値。しきい値を調整して、フィルタペーパーからのバックグラウンド信号を最小化し、パーティクルのエッジを明確に定義します。良質および低品質のしきい値の描写については 、図 3 を参照してください。
   注:高い濃度の蒸着を有するフィルタの場合、濾紙繊維による光の回折によって引き起こされる蛍光の「コロナ」は、粒子の大きなグループの周りに観察され得る。これらの画像を閾値にする場合、大きすぎる範囲は、 図3の「不良」しきい値画像に見られるような、これらのグループの周りに小さな点または「羽のような」形状を表示する。これは、粒子自体からの信号を隠すことなく、濾紙繊維からの信号が最小化されるまで、閾値の下限を徐々に増加させることによって改善することができる。
4. 蛍光画像の閾値設定を他のすべての画像に伝播します。
5. [分析]を選択して、パーティクル数と蛍光領域全体を定量 化|パーティクルの解析:
   注: データセットは、シダックの多重比較テストと双方向の分散分析を使用して比較されます。さらに、関心のあるローブのみの堆積は、等分散を想定して学生T検定を使用して比較されます。

結果

このサイズ範囲(1~5 μm)および流れ条件(1-10 L/min)の粒子は、理論上のストークス数とインビボデータの両方に基づいて流体流れ線に従います。したがって、標的送達装置がない場合、肺モデルに放出された粒子は、各ローブに流用された全気流の割合に従って沈着することが予想される。各ローブへの粒子送達量の相対的量は、患者固有の高解像度コンピュータ断層撮影(HRCT)スキャン¹⁰を分析することによって得られた臨床ローブ流量データと比較することができる。検証された実験的セットアップは臨床空気流のプロフィールと統計的に有意な差がない非標的粒子の沈着プロフィールを生み出す。検証データは、正常な肺の1 L/分(図4A)とCOPDの影響を受ける肺の1 L/分の2つの異なるフロー条件に対して提示されます(図4B)。これらの条件の両方の下で、実験的に決定された堆積プロファイルは臨床データと統計的に異ならず、セットアップが各肺葉への空気流の分布を正確に模倣することを実証した。これらのベース...

ディスカッション

完全吸入量の肺薬学的検査のための現在の最新式装置は、次の発電機インコンクター(NGI)であり、エアロゾル⁴の空気力学的直径を測定する。このサイジングデータは、健康な成人男性¹¹のために開発された相関関係に基づいてエアロゾルが堆積する肺の生成を予測するために使用されます。残念ながら、この方法は、地域肺堆積の違いを評価し、医薬品の送達に及ぼす疾患の影響を決定し、様々な年齢層、人種、および性別^12、13、14の堆積プロファイルを予測する能力において制限される。ここで概説するプロトコルは、研究者が計算モデル^3、5、15で以前に示された流体流れの挙動に基づいて、ローブレベルで相対堆積を定量化する能力を持つ調整可能で解剖学的に正確な...

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
1/4 "プラスチック有刺鉄線チューブ継手	マクマスター	カー5372K111
10 umフィルターペーパー	フィ	ッシャー1093-110
1um蛍光ポリスチレン粒子	Polysciences	15702-10
1um非蛍光ポリスチレン粒子	Polysciences	8226
2-Propanol	Fisher	A516-4	参照「IPA」
3/8」プラスチック有刺鉄線管継手	カー5372K117
空気流量計(1 - 280 mL /分)	マクマスターカー41695K32		プロトコルで参照される「流量計」
カーボンM1 3Dプリンター	カーボン3D		https://www.carbon3d.com/、プロトコルで「スライスソフトウェア」
コリソンとして参照される関連ソフトウェアジェットネブライザー	CHテクノロジー	ARGCNB0008 (CN-25)	6 ジェットMREスタイルのガラス瓶との水平衝突、プロトコルでは「ネブライザー」と呼ばれ、http://chtechusa.com/Manuals/MRE_Collison_Manual.pdf
対流オーブン	ヤマト	DKN602
コプリークリティカルフローコントローラー TPK2000 Reve 120V	MSP Corp	0001-01-9810	プロトコルでは「フローコントローラー」と呼ばれる
コプリー高容量ポンプモデルHCP5	MSPコーポレーション	0001-01-9982	プロトコルで「真空ポンプ」
と呼ばれるCytation	BioTek	CYT5MPV	4倍/20倍/40倍の対物レンズとDAPI/GFP/テキサスレッドレーザー/フィルターキューブEPU40樹脂カーボン3D
			を装備した多機能分光光度計/蛍光イメージャーhttps://www.carbon3d.com/materials/epu-elastomeric-polyurethane/、プロトコルで「軟質樹脂」として参照
ポンプ用	フィルターWhatman	6722-5000
流量計モデルDFM 2000	MSP Corp	0001-01-8764	で「電子流量計」
ImageJソフトウェア	ImageJ		https://imagej.nih.gov/ij/download.html
インラインエアフローコントロールバルブ(プッシュ・トゥ・コネクト)	McMaster Carr	62005K333	プロトコルでは「バルブ」
インラインフィルターデバイス	Whatman	WHA67225000
Marine-Grade 合板シート	McMaster Carr	62005K333	プロトコルでは「木製ボード」と呼ばれ
Materialise Mimics Software	Materialise		https://www.materialise.com/en/medical/mimics-innovation-suite、プロトコルでは「CTスキャンソフトウェア」
Meshmixerソフトウェア	Autodesk		http://www.meshmixer.com/、プロトコルでは「メッシュ編集ソフトウェア」
メタノール	フィッシャーA454-4
Opticure LED Cube	APM Technica	102843	プロトコルでは「UVオーブン」と呼ばれます
PR25レジン	カーボン3D		https://www.carbon3d.com/materials/uma-urethanemethacrylate、/化学
薬品用「	マクマスターカー5231K161		1/4 "ID
ネジSolidWorks
ソフトウェア	ダッソーシステムèmes SolidWorks Corporation		https://www.solidworks.com/ は、プロトコルで「3Dモデリングソフトウェア」
ストレートフロー長方形マニホールド	マクマスターカー1125T31
チューブからフローコントローラー	マクマスターカー5233K65		3/8インチID
ワイヤー