同所性骨肉腫および肺転移マウスモデルを生成するための脛骨内骨肉腫細胞注射

Junli Chang; Fulai Zhao; Xingyuan Sun; Xiaoping Ma; Wenlan Zhi; Yanping Yang

doi:10.3791/63072

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方法論記事

同所性骨肉腫および肺転移マウスモデルを生成するための脛骨内骨肉腫細胞注射

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DOI：

10.3791/63072

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2021年10月28日

Junli Chang^*¹^,² , Fulai Zhao^*¹^,² , Xingyuan Sun¹^,² , Xiaoping Ma¹^,² , Wenlan Zhi¹^,² , Yanping Yang¹^,²

¹Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ²Key Laboratory of theory and therapy of muscles and bones, Ministry of Education

^* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

本プロトコールは、同所性骨肉腫および肺転移病変を有するマウスモデルを生成するための脛骨内骨肉腫細胞注射を記載する。

要約

骨肉腫は、小児および青年において最も一般的な原発性骨癌であり、肺を最も一般的な転移部位とする。肺転移を有する骨肉腫患者の5年生存率は30%未満である。したがって、ヒトにおける骨肉腫の発症を模倣したマウスモデルの利用は、骨肉腫の発癌や肺転移の基本的なメカニズムを理解し、新規な治療法を開発する上で大きな意義を有する。ここでは、骨肉腫細胞の脛骨内注射 を介して原発性骨肉腫および肺転移マウスモデルを生成する詳細な手順が報告されている。生物発光またはX線ライブイメージングシステムと組み合わせることで、これらの生きたマウスモデルは、骨肉腫の成長および転移をモニターおよび定量化するために利用される。このモデルを確立するために、骨肉腫細胞を含む基底膜マトリックスをマイクロボリュームシリンジにロードし、麻酔をかけた後に各無胸腺マウスの1つの脛骨に注入した。原発性骨肉腫がIACUC承認プロトコルのサイズ制限に達したときにマウスを屠殺した。骨肉腫を有する脚と転移病変を有する肺を分離した。これらのモデルは、短い潜伏期間、急速な成長、重度の病変、および原発性および肺転移性病変の発症を監視する際の感受性によって特徴付けられる。したがって、これらは、骨肉腫の発癌および肺転移、腫瘍微小環境における特定の因子の機能およびメカニズムを探求し、 生体内での治療有効性を評価するための理想的なモデルである。

概要

骨肉腫は、小児および青年における最も一般的な原発性骨癌であり^1,2であり、主に周囲の組織に浸潤し、患者が診断されると肺に転移することさえある。肺転移は骨肉腫治療の主な課題であり、肺転移を伴う骨肉腫患者の5年生存率は20%〜30%と低いままである^3,4,5。しかし、原発性骨肉腫の5年生存率は、化学療法の導入により1970年代以降、約70%に上昇している⁶。したがって、骨肉腫の発がんや肺転移の根本的なメカニズムを理解し、新たな治療法を開発することが急務となっています。ヒトにおける骨肉腫の進行を最もよく模倣するマウスモデルの適用は、非常に重要である⁷。

骨肉腫動物モデルは、自発的、誘導された遺伝子工学、移植、および他の技術によって生成される。自発性骨肉腫モデルは、長い腫瘍形成時間、一貫性のない腫瘍発生率、低い罹患率、および安定性の悪さのためにめったに使用されない^8,9。誘....