脛骨骨折ピンモデルは、整形外科的外傷の臨床的に関連するモデルであり、髄内釘の内固定を伴う片側の開放脛骨骨折と、前脛骨筋への同時損傷が含まれます。このモデルの熱感度は、45秒のホットプレートパラダイムを使用して測定できます。
このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。
脛骨骨折ピンモデルは、整形外科的外傷の臨床的に関連するモデルであり、髄内釘の内固定を伴う片側の開放脛骨骨折と、前脛骨筋への同時損傷が含まれます。このモデルの熱感度は、45秒のホットプレートパラダイムを使用して測定できます。
脛骨骨折ピンモデルは、整形外科の外傷と手術のマウスモデルであり、このタイプの損傷でヒトに現れる複雑な筋肉、骨、神経、および結合組織の損傷を再現します。このモデルは、以前の整形外科的外傷モデルには、複数の組織タイプ(骨、筋肉、神経)への同時損傷が含まれておらず、人間の複雑な整形外科的外傷を真に代表していなかったために開発されました。したがって、著者たちは整形外科外傷の以前のモデルを修正し、脛骨骨折ピンモデルを開発した。この修正骨折モデルは、髄内釘 (IMN) 内固定と前脛骨筋 (TA) の同時損傷を伴う片側開放脛骨骨折で構成され、損傷後最大 5 週間続く機械的異痛症を引き起こします。この一連のプロトコルは、臨床的に関連する整形外科用外傷脛骨折ピンモデルを実行するための詳細な手順を概説し、その後、整形外科の損傷後の侵害受容性変化を調べるための修正ホットプレートアッセイが続きます。これらの詳細で再現性のあるプロトコルを組み合わせることで、疼痛研究者は整形外科の外傷誘発性疼痛を研究するためのツールキットを拡大することができます。
整形外科の外傷は、世界中で毎年約5億人が受けているすべての怪我の25%を占めています1,2,3。整形外科的外傷は、複雑な筋肉、骨、神経、および結合組織の損傷と関連している可能性があり、適切な回復を確保するために入院と手術が必要です3,4。整形外科的外傷後の急性および慢性の痛みは、患者の生活の質に影響を与える重大な身体的、心理的、および財政的な負担をもたらす可能性があります1,4。さらに、骨折を安定させて固定するための整形外科手術は、重度の急性および慢性の術後疼痛にも関連しています5,6,7,8,9。
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
この研究の実施中に使用されたすべての方法は、米国獣医師会のガイドラインおよび国際疼痛学会に従って、スタンフォード大学実験動物管理委員会(APLAC #33114)の承認を得て実施されました。マウス(C57BL/6J、到着時9-11週齢、研究開始時11-12週齢)をケージあたり2-5匹飼育し、温度制御された環境で12時間の明暗サイクルで維持し、餌と水に 自由 にアクセスできる状態にしました。試験開始時の雄マウスの体重は約25gでした。この研究で使用されたすべての材料の詳細については、 材料の表 を参照してください。
1. ベースライン行動測定
2. 麻酔・準備
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
脛骨骨折ピンオルソ外傷モデルは、複雑なヒトの損傷に見られる骨、筋肉、および痛みのような行動を再現します。図1Cに示すように、脛骨骨折は時間の経過とともに治癒し、骨折部位にカルスを形成し、損傷後4週間でまだ見られます。上記の骨鋸による横方向のアプローチ(ステップ3.5)の結果、前脛骨筋が損傷し、組織全体にコラーゲンが沈着する増加によって見られるように、広範囲に線維化します(図1D)。後肢の感受性は非常に深く、機械的刺激に対する閾値の低下によって証明され、損傷後少なくとも5週間持続します11。さらに、末梢損傷後の痛みのような行動をより完全に探求するために、新しい非反射アッセイを組み込んでいます14,15。図3に示すように、整形外傷は、反射的なひるみと非反射的な行動(舐める、守る)の増加をもたらします。.......
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
プロトコル内の重要なステップ
手術中も無菌状態を維持することが大切です。さらに、手術前、手術中、手術後の適切な動物の世話は、モデルの生成を成功させるために最も重要です。プロトコールで前述したように、手術を行う際には、筋肉の損傷を確実にするために、外側から骨を骨折します。脛骨を骨折しすぎると(脛骨の中央3分の1と遠位3分の1の間の推奨される接合部より下)、骨折の方法、ピンで固定する研究者の能力、および骨折の治癒に影響を与えるため、脛骨を骨折しないように注意してください。
前臨床所見を臨床的に有用な治療に翻訳することをさらに確実にするためには、脛骨骨折ピンモデルを、明確なヒト相関を持つアウトカム指標と組み合わせる必要があります。上記の修正ホットプレートアッセイを使用すると、げっ歯類の慢性疼痛モデルによる温度感受性の観察が可能になります。慢性的な病理学的状態を持つ人は、温度の変化に伴って感受性の増加と痛みを報告することがよくあります。温度が上昇すると、炎症が増加し、組織の膨張と収縮.......
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
著者には、開示すべき関連する利益相反はありません。
GMは、NDSEG大学院フェローシップとスタンフォードBio-X名誉大学院フェローシップによってサポートされています。VLTは、NIH NIGMS助成金 #GM137906 とRita Allen Foundationの支援を受けています。
....アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 27 G 針 | Medsitis | 305136 | https://medsitis.com/products/bd-precisionglide-27-g-x-1-1-4-hypodermic-needles-305136?variant=39724583299 |
| 5-0 縫合 | 糸 suture | SN5668 | |
| https://www.esutures.com/product/0-in-date/2-/132-/16552-medtronic-monosof-black-18-p-11-cutting-SN5668/ アルコール綿棒 | Amazon | B00VS4F91W | https://www.amazon.com/Dynarex-Alcohol-Prep-Sterile-Medium/dp/B00VS4F91W |
| 代替ドリルビット | Rio Grande | 341602 | https://www.riogrande.com/product/BuschTungstenVanadiumRoundBur セット0314mm/341602 |
| ボーンソードリルアタッチメント | アマゾン | B07DSXR3NY | https://www.amazon.com/dp/B07DSXR3NY |
| ブプレノルフィン | フィデリスファーマシューティカルズ | ||
| https://ethiqaxr.com/ordering/ セラミックインプラント(ピンの代替) | RISystem | RIS.221.103 | https://risystem.com/platefixation/mousescrew |
| Chux(吸収性アンダーパッド) | フィッシャー科学 | NC0059881 | |
| https://www.fishersci.com/shop/products/underpad-17x24-chux-300-cs/nc0059881#?keyword=true C57BL/6J マウス | ジャクソン研究所 | ジャックス #00664 | https://www.jax.org/strain/000664 |
| 綿棒 | Uline | S-18991 | https://www.uline.com/Product/Detail/S-18991/First-Aid/Cotton-Tipped-Applicators-Industrial-6 |
| カッティングプライヤー | アマゾン | B076XYVS6Y | https://www.amazon.com/iExcell-Diagonal-Cutting-Nippers-Chrome-Vanadium/dp/B076XYVS6Y |
| ドリル | チューイ | 129044 | https://www.chewy.com/dremel-cordless-dog-cat-rotary-nail/dp/156127 |
| ドリルビット | アマゾン | B00HVIGSX2 | https://www.amazon.com/Universal-Diamond-Dremel-Rotary-Tool/dp/B00HVIGSX2 |
| 電気シェーバー | ケント サイエンティフィック | CL9990-KIT | https://www.kentscientific.com/products/trimmer-combo-kit/ |
| アイルーブ | アマゾン | B07H2NLCX5 | https://www.amazon.com/OptixCare-Lube-Plus-Hyaluron-Horses/dp/B07H2NLCX5 |
| ガーゼパッド 2" x 2" | アマゾン | B07GHDTB53 | https://www.amazon.com/Covidien-Curity-Sterile-Peel-Back-Package/dp/B07GHDTB53 |
| ガーゼパッド4" x 4" | アマゾン | B00KJ6YFTC | https://www.amazon.com/Covidien-6309-Curity-Gauze-Pads/dp/B00KJ6YFTC |
| ハイビジョンビデオカメラ | イメージングソース | DFK 22AUC03 | https://www.theimagingsource.com/products/industrial-cameras/usb-2.0-color/dfk22auc03/?adsdyn&gclid=Cj0KCQiA3-yQBhD3ARIsAHuHT64uIIlImBvh_ toh-3GFSgBcL_fRc1gQTDyXlqDEa Qu4n2_VbWEiRuIaAiueEALw_wcB |
| 吸入麻酔システム | ケントサイエンティフィック | https://www.kentscientific.com/products/vaporizer-with-vetflo-single-channel-anesthesia-stand/ | |
| ヨウ素溶液 | アマゾン | B005FR7XIK | https://www.amazon.com/Dynarex-Povidone-Iodine-Scrub-Solution/dp/B005FR7XIK |
| ヨウ素スワブスティック | アマゾン | B001V9QKMG | https://www.amazon.com/POVIDONE-IODINE-SWAB-1202-25Box/dp/B001V9QKMG |
| イソフルラン | カリフォルニアペット薬局 | https://www.californiapetpharmacy.com/fluriso-isoflurane-250ml.html | |
| NCHプリズムソフトウェア | https://www.nchsoftware.com/prism/index.html | ||
| プラスチックシリンダー | アマゾン | B08R5KM5B6 | https://www.amazon.com/FixtureDisplays-Acrylic-Diameter-Thickness-15140-8-NPF/dp/B08R5KM5B6 |
| 生理食塩水 | フィッシャーサイエンティフィック | NC9054335 | https://www.fishersci.com/shop/products/saline-injection-0-9-10ml/NC9054335 |
| Scalpel | Fisher Scientific | 12-000-162 | https://www.fishersci.com/shop/products/high-precision-10-style-scalpel-blade/12000162#?keyword= |
| Scalpel handle | Amazon | B0056ZX1R8 | https://www.amazon.com/Swann-Morton-Scalpel-Handle-blades/dp/B0056ZX1R8 |
| Thermal配置用選好装置 | BIOSEB | BIO-T2CT | https://www.bioseb.com/en/pain-thermal-allodynia-hyperalgesia/897-thermal-place-preference-2-temperatures-choice-nociception-test.html |
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
この記事は公開されました
動画は近日公開