専任チームは、メイヤー・ロキタンスキー・クスター・ハウザー患者に、腹腔鏡下膣形成術時に制御された卵巣刺激と卵母細胞の凍結保存を行うオプションを提供できます。
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方法論記事
マイヤー・ロキタンスキー・クスター・ハウザー症候群の治療のための膣形成術中の腹腔鏡下卵母細胞回収と凍結保存
* These authors contributed equally
この記事について
サマリー
要約
腹腔鏡下膣形成術を予定しており、生物学的母性を希望するメイヤー・ロキタンスキー・クスター・ハウザー症候群(MRKHS)患者において、凍結保存のために腹腔鏡下卵母細胞回収を併用することを提案する。卵母細胞回収は腹腔鏡検査の開始時に追求される。左右の5mmのトロカールを配置し、それを通して17Gの卵子吸引針を使用してそれぞれ右卵巣と左卵巣の穿刺を行います。卵胞の露出を容易にするために、卵巣を動員し、腹腔鏡下鉗子で保持する。
複数の卵胞を互いに近く吸引する場合、卵巣皮質がトランスフィックスされる回数を減らすために針先が卵巣に保持され、出血の固有のリスクがあります。その後のステップは、膣形成術のためのDavydov腹腔鏡下修正技術と比較して変更されていません。手術前に、ゴナドトロピンホルモン放出ホルモン(Gn-RH)アンタゴニストプロトコルを使用して制御された卵巣刺激が行われ、卵母細胞回収と膣形成術の付随する手順は、最終的な卵胞成熟トリガーの36時間後に予定されています。卵胞液は、経膣卵母細胞回収時に使用されるのと同じ10 mL滅菌チューブに収集され、加温ブロック(37°C)で生殖補助医療検査室に移され、そこで成熟(中期II)卵母細胞がガラス化されます。
この場合、MRKHの一連の23人の女性、卵母細胞が正常に回収され、すべての患者で凍結保存されました。その後,膣形成術はそのまま施行し,術後入院・外来診療(尿道カテーテル抜去日,退院日,拡張器使用,経過観察時の快適性)は影響を受けなかった.術後合併症は1例(術後5日目に発熱,経腹腔超音波で腹腔内液検出)を合併し,保存的治療後に消失した.このアプローチは、MRKH患者の外科的膣形成術を行い、卵母細胞回収を遅らせるのではなく、両方の手順を1回の腹腔鏡検査に組み合わせることで、外科的侵襲性と麻酔リスクを最小限に抑えます。
概要
4〜10,000人の女性に約1人の発生率で、MRKHSは原発性無月経症例の15%の原因です。MRKHSは、膣および子宮の上部部分の先天性欠如によって特徴付けられるが、尿路および骨格異常はさまざまに関連している。より具体的には、通常、深さ1〜2 cmの膣金庫が存在し、2つの初歩的な子宮角が見つかることがあります1。
過去には、MRKHSの主な医学的関心は正常な性交を可能にすることであり、それは一般的に非外科的または外科的アプローチのいずれかによって新膣を構築することを必要とする2。しかし、生殖医学の進歩により、現在、代理出産3,4または最近では子宮移植5のいずれかによって、MRKHS患者の遺伝的母性が可能になりました。子宮移植はまだ実験的な手順ですが、代理出産は世界中の多くの国で利用可能であり6、報告されている産科および心理社会的結果は、標準的な体外受精および卵母細胞提供の結果に匹敵します7。
代理出産と子宮移植はどちらも卵母細胞回収と体外
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プロトコル
MRKHSの三次紹介センター(IRCCSサンラッファエーレ大学病院、イタリア、ミラノ)の地元の倫理委員会は、2017年7月に実施される前にプロトコルに通知され、承認されました。すべての患者または保護者は、膣形成術中の腹腔鏡下卵母細胞回収と凍結保存、および科学的目的での匿名化された臨床/検査データの使用について、署名されたインフォームドコンセントを与えました。
1.チーム構成
- 経験豊富な腹腔鏡外科医、経験豊富な膣外科医、不妊症の専門家、専任の心理学者、献身的な看護師で構成される専任チームを指定します。
- 手順のセットアップと実行全体を通して、チームとして患者を支援します。
2.診断精密検査とカウンセリング
- 卵巣の視覚化と胞状卵胞数(AFC)の推定のために、患者に経腹骨盤および腹部超音波検査を実行します。抗ミュラー管ホルモン(AMH)の血中濃度を評価して、制御された卵巣刺激のためのゴナドトロピン開始用量を最適化します。組織/配偶子の凍結保存のための国/地域のプロトコルに従って、感染症(HIV-Ab、HCV-Ab、HBV-Ab、RPR-TPHA)の血清学的検査を実施します。
- 非外科的および外科的膣形成術、代理出産に関連する費用と法律、実験プログラムの文脈での子宮移植の視点....
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結果
表2には患者の卵巣刺激データが含まれていますが、主な外科的および機能的転帰は表3に記載されています。卵母細胞回収と膣形成術の付随する腹腔鏡手術は、すべての患者でうまく組み合わされました。平均11.4±5.4(平均±SD)の卵母細胞を回収し、9.6±4.3のMII卵母細胞を凍結保存しました(表3)。ARTを受けている患者における卵母細胞の凍結保存に関する私たちの経験では、このガラス化プロトコル(細胞質内精子注入時の形態学的に無傷の卵母細胞の割合として定義される)に従った温暖化後の卵母細胞の生存率は84.5±19.3でした。総平均手術時間は114±17分であり、術中出血はすべての患者でわずか(<50 mL)であり、術中の有害事象は観察されませんでした。.尿道カテーテルと膣ガーゼは、すべての患者で手術後2日目に除去されました。術後3日目に拡張器のデイリー使用を開始し,6.0日目±1.0日目に退院した.術後合併症は1例に発生しました(術後5日目に発熱し、経腹腔超音波で腹腔内液が検出されました)。患者は経口投与された抗生物質で正常に治療され.......
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ディスカッション
このプロトコルは、膣形成術と卵母細胞回収の手順を組み合わせることにより、MRKHSの治療における侵襲性を軽減します。そのためには、COS、外科手術、卵母細胞ガラス化のタイミングを効率的にスケジュールするために、専任チームを任命することが重要です。
この併用腹腔鏡法が最も有益であると予想されるMRKHS患者は、骨盤壁に沿って横方向に位置する骨盤外卵巣14、または肝臓や胆嚢9などの臓器の近くに位置する骨盤外卵巣、または骨盤腎臓の存在のために、経膣回収が技術的に困難または実行不可能であると考えられる患者です。これらの患者では、経腹的アプローチが仮説を立てることができ、文献で報告されていますが、それにもかかわらず、平均数は4.92±1.7卵母細胞が収集され15、技術的な制限による最適ではない検索を示唆しています。さらに、腹壁の厚さが著しい患者や、腸16のループが上にあるために卵巣の視界が悪い患者など、.......
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開示事項
著者は、開示する利益相反はありません。
謝辞
この作業に対する具体的な資金は受け取られていません。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 卵子回収手順 | |||
| Equipment | |||
| CO2 O2インキュベーター | Sanyo | ||
| キュベーター | Thermo Scientific | ||
| Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
| ポータブルインキュベーター | クーパー外科用 | ||
| 実体顕微鏡 | ニコン | ||
| 消耗品 | |||
| 14 mL ポリスチレン丸底チューブ | ファルコン | 352057 | |
| 4ウェルディッシュ | Nunc | 144444 | |
| 60 mm シャーレ | Nunc | FA9150270 | |
| 90 mm ペトリディッシュ | ヌンク | FA9150360 | |
| ヒト血清アルブミン 100 mg/ml 生理食塩水 (5%) | Origio | 3001 | |
| 胚培養用ミネラルオイル | Origio | 4008 | |
| ウェル ディッシュ | Oosafe | OOPW-CW05 | |
| クイン's Advantage 受精培地 SAGE | Origio | 1020 | |
| Quinn'HEPES | Origio | 1024 | |
| 滅菌ガラスパスツールピペット | |||
| <ストロング>卵子剥離 | |||
| 機器 | |||
| CO2 O2インキュベーター | 三洋 | ||
| フレキシペット 調整可能ハンドルセット | クック | G18674 | |
| インキュベーター | Thermo Scientific | ||
| 層流フード | クーパー 外科用 | ||
| 実体顕微鏡 | ニコン | ||
| 消耗品 | |||
| 4 ウェルディッシュ | Nunc | 144444 | |
| CSCM (Continuos single culture) 培地 | 富士フイルムアーバインサイエンティフィック | 90165 | |
| ヒトアルブミン100mg / mL正常生理食塩水(5%) | Origio | 3001 | |
| アルロニダーゼ | フイルムアーバインサイエンティフィ | 90101 | |
| 体外受精培養60mmペトリディッシュ | Nunc | FA9150270 | |
| 胚培養用ミネラルオイル | Origio | 4008 | |
| ウェルディッシュ | Oosafe | OOPW-CW05 | |
| クイン'HEPES | Origio | 1024 | |
| Serum Substitute Supplement | Fujifilm irvine Scientific | 99193 | |
| 滅菌ガラスパスツールピペット | |||
| ストリッピングピペットチップ (140 μm) | クック | K-FPIP-1140-10BS-5 | |
| ストリッピングピペットチップ(170μm) | クック | K-FPIP-1170-10BS-5 | |
| 卵子ガラス固化 | |||
| 35 mm シャーレ | NUNC | 150255 | |
| 60 mm シャーレ | NUNC | 150270 | |
| 90 mm シャーレ | NUNC | 150360 | |
| 冷却ラック用コンテナ | 北里 | ||
| クライオデバイス/クライオトップ | 北里 | 81111 | |
| 電子タイマー | |||
| フレキシペット | COOK | K- 1000 | |
| ギルソン ピペットマン | ギルソン | F123601 | |
| ラボ プリンター LabXpert | Brady | XSL-86-461 | |
| ヒント 20-200 & マイクロ;L | Thermo Scientific | 2160G | |
| Tips 2-20 µL | Thermo Scientific | 2139-HR | |
| Visotubes | Cryo Bio System | 20 | |
| ガラス固化凍結キット | 富士フイルム アーバイン科学 | 90133-SO | |
| ガラス化融解キット | 富士フイルム アーバイン科学 | 90137-SO |
参考文献
- Committee on Adolescent Health Care. ACOG Committee Opinion No. 728: Müllerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment. Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).
- Reichman, D. E., Laufer, M. R. Ma....
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