本プロトコルは、流体パーカッション誘発性外傷性脳損傷のラットモデルを記載し、その後、支配的および従順な行動の発達を理解するための一連の行動試験を行う。この外傷性脳損傷のモデルを特定の行動テストと組み合わせて使用 することで、脳損傷後の社会的障害の研究が可能になります。
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方法論記事
外傷性脳損傷後の成体ラットにおける優性服従行動の評価
* These authors contributed equally
この記事について
サマリー
要約
食物、領土、配偶者などの資源をめぐる競争は、動物種内の関係に大きな影響を与え、しばしば支配的-従順な関係に基づく社会的階層を通じて仲介されます。支配的 - 従順な関係は、種の個体間の通常の行動パターンです。外傷性脳損傷は、社会的相互作用障害および動物ペアにおける支配的 - 従順な関係の再編成の頻繁な原因である。このプロトコルは、流体パーカッションモデルを使用した外傷性脳損傷の誘発後の成体雄Sprague-Dawleyラットの従順行動を、誘導後29日から33日の間に実施された一連の優性服従試験を通じてナイーブラートと比較した。優勢-従順行動テストは、脳損傷が食物を求めて競争する動物に服従行動をどのように誘発できるかを示しています。外傷性脳損傷の後、げっ歯類は、対照動物と比較して、フィーダーで過ごす時間が少なく、トラフに最初に到着する可能性が低いことから示されるように、より従順でした。このプロトコルによれば、従順な行動は、成体雄ラットにおける外傷性脳損傷後に発症する。
概要
種内競争は、同じ種のメンバーが同時に限られた資源をめぐって競争するときに発生します1。対照的に、種間競争は2つの異なる種のメンバー間で発生します2。種内競争は、干渉(適応)と搾取(競争)の2つのタイプに分けられ、食料や領土3など、競合する資源の種類に応じて発生します。
社会的階層の存在は、支配的 - 従順な関係(DSR)なしでは不可能です。支配は動物のペアの中で「勝つ」として現れ、従属は「負ける」として現れます4。ただし、DSR はペアだけでなく、3 つ以上のグループでも表示されます。1922年、Thorleif Schjelderup-Ebbeは家禽の優勢階層について説明しました。優勢動物と従属動物の主な区別の兆候は、フィーダーで過ごした時間と攻撃的な行動でした。優位性階層は、線形と非線形の2つの形式に分けられます5。線形優勢には、AとBの2つのグループが含まれます。推移的関係6 のこのパラダイムでは、グループ A がグループ B を支配するか、グループ B がグループ A を支配する。非線形ドミナンスは、A が B を支配し、B が C を支配、C がA....
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プロトコル
実験は、ヘルシンキと東京の宣言と欧州共同体の実験動物の世話と使用のためのガイドラインの勧告に従って行われたネゲブのベングリオン大学の動物管理委員会によって承認されました。本研究では、体重300〜350 gの成体の雄のSprague-Dawleyラットを使用しました。.動物を22°C±1°Cの室温および40%〜60%の湿度で明暗サイクルで飼育した。
1.動物の準備
- 無作為に30匹の成体オスラットを選択し、それらをTBIと偽の2つのグループに分けます。
- チャウチャウ( 材料表を参照)と水を 自由に提供します。
注意: テストのすべての手順を同時に実行して、動作パフォーマンスに対する時刻の影響を制御します。一般的な活動による妨害を避けるために、午前中(午前6:00から午後12:00の間)に行動テストを実施するのが最善です。 - ステップ3および 表1に詳述されているように、両方のグループのラットにおいて損傷前の神経学的重症度スコアのベースライン評価を実施する。
- ラットを4%(誘導用)および1.5%(維持用)イソフルランで麻酔する。ブプレノルフィンを注射します(0.05-0.1 mg / kg;SC)先制鎮痛のための。
- 覚醒剤に反応して動きの欠如またはペダル反射をテ....
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結果
神経学的重症度スコア評価
神経学的欠損は、NSSを用いてTBI後の雄ラットにおいて評価された。ラットを2群に分けた:1群のTBI群と対照群1群。対照群を偽手術に供した。NSSは、ポイントシステム22,23による運動機能と行動の変化の評価を可能にしました。スコア24は重度の神経機能障害を示し、スコア0は無傷の神経学的状態を表した。手術前1時間時点の神経学的欠損に、TBI群と偽手術群の間で有意差はなかった。術後48時間での神経学的欠損は、偽手術ラットと比較してTBIラットにとって十分に大きかった(5-7、平均:6対0-0、平均:0;U = 0, p < 0.01, r = 0.89)(図2A)。 手術後28日目の時点で、TBI群と偽手術群の差はわずかであった(Mann-Whitney U検定19)(
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ディスカッション
臨床研究は、脳損傷が精神障害のリスクを高める可能性があることを示しています26,27。さらに、TBIは社会的行動の発達に影響を与えます28,29。このプロトコルでは、TBIモデルは支配的-従順な行動の提示に影響を与えました。支配的 - 従順な行動は、フィーダーに費やされた時間と誰が最初にフィーダーに来たかという点で現れました。
ここで実行される行動タスクに加えて、居住者と服従の関係を評価するための他のタスク、たとえば居住者と侵入者のパラダイム30,31または食糧状況32,33,34の複雑なダイビングが存在します。
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開示事項
著者は開示するものは何もありません。
謝辞
行われた研究は、ドミトリー・フランクの博士論文の一部です。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 70%アルコール溶液中の2%クロルヘキシジン | シグマ-ALDRICH | 500 cc | 手術室の皮膚の一般的な消毒のために |
| の異なる4つのボード(1.5 cm、2.5 cm、5 cm、8.5 cm) | これは神経学的欠陥 | ||
| 4-0 ナイロン縫合糸 | 4-00 | ||
| ボトル | テクニプラスト | ACBT0262SU | |
| ブピバカイン0.1 % | |||
| ダイヤモンド穴鋸ドリル 3 mm径 | ガラス穴鋸キット | オプション | |
| デジタル体重計 | SIGMA - ALDRICH | Rs 4,000 | |
| 解剖ハサミ | SIGMA - ALDRICH | Z265969 | |
| エタノール 99.9 % | 薬局 | 機器の洗浄と臭気の除去に使用される 5%-10% 溶液 | |
| 大学のワークショップ | 流体パーカッション装置 | 特定のブランドは推奨されません。 | |
| ガーゼスポンジ | フィッシャー | ||
| グローブ(薄い実験用手袋) | オプション。 | ||
| 温度計付きヒーター | Heatingpad-1 | モデル:HEATINGPAD-1/2 | 特定のブランドはお勧めしません。 |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| イソフルラン、USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | 吸入用麻酔液 |
| ロジクール ウェブカメラソフトウェア | ロジクール | 2.51 | ビデオカメラ用ソフトウェア |
| 手術鉗子 | SIGMA - ALDRICH | ||
| 手術用ハサミ | SIGMA - ALDRICH | ||
| USV記録およびデータ分析用のPCコンピューター | Intel | Intel Core i5-6500 CPU @ 3.2GHz、16 GB RAM、64ビットオペレーティングシステム | |
| 狭い通路 | 2つの透明な30 cm× 20 cmの狭い15 cmの20 cmのプレキシガラスボックス; 15 cm× 60 cm | ||
| Purina Chow | Purina | 5001 | ラットに与えられたげっ歯類の実験室用チャウ、 生物医学研究で使用されてきたライフサイクルの栄養物です |
| ラットケージ(ラットの家のケージまたは別のエンクロージャ) | Techniplast | 2000P | 特定のブランドは推奨されません |
| メスブレード 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| SPSS | SPSS Inc., Chicago, IL, USA | A 20パッケージ | |
| 脳定位固定装置 | 大学のワークショップ | でカスタムメイド特定のブランドは推奨されません | |
| タイミングデバイス | インターバルタイマー:USVを記録するためのタイミングは | オプションです。複数のラットをくすぐっている場合はインターバルタイマーを使用すると便利ですが、どのタイマーでもかまいません | |
| ビデオカメラ | Logitech | C920 HD PRO ウェブカメラ | デジタルビデオカメラ 支配的な従順なテストの下でのラットの行動を高解像度で記録します |
参考文献
- Birch, L. C. The meanings of competition. The American Naturalist. 91 (856), 5-18 (1957).
- Crombie, A. C. Interspecific competition. The Journal of Animal Ecology. 16 (1), 44-73 (1947).
- Riechert, S. E. Game theory and animal contests.
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再版と許可
