中枢神経系および末梢神経系マウスの全解剖

Krystina Rhéaume; Zhiguo Chen; Yong Wang; Camille Plante; Dhanushka Hewa Bostanthirige; Maude Lévesque; Sameh Geha; Lu Q. Le; Jean-Philippe Brosseau

doi:10.3791/64974

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方法論記事

中枢神経系および末梢神経系マウスの全解剖

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DOI:

10.3791/64974

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2023年2月24日

Krystina Rhéaume^*¹ , Zhiguo Chen^*² , Yong Wang^*² , Camille Plante¹ , Dhanushka Hewa Bostanthirige¹ , Maude Lévesque¹ , Sameh Geha³^,⁴ , Lu Q. Le²^,⁵^,⁶^,⁷ , Jean-Philippe Brosseau¹^,⁴

¹Department of Biochemistry and Functional Genomics, Université de Sherbrooke, ²Department of Dermatology, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ³Department of Pathology, Université de Sherbrooke, ⁴Centre de Recherche du Centre Hospitalier de Universitaire de Sherbrooke, Université de Sherbrooke, ⁵Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁶UTSW Comprehensive Neurofibromatosis Clinic, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁷Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas

^* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

ここでは、マウスの中枢神経系と末梢神経系の解剖を完了するためのプロトコルを紹介します。解剖された組織は、肉眼的写真の撮影や組織学などの下流アプリケーションでさらに分析されます。

要約

動物モデルは、神経科学分野の主力製品です。それにもかかわらず、今日では、完全なげっ歯類の神経系を解剖するための段階的なプロトコルはまだなく、自由に利用できるそれを表す完全な概略図もありません。脳、脊髄、特定の後根神経節、および坐骨神経(別々に)を採取する方法のみが利用可能です。ここでは、マウスの中枢神経系と末梢神経系の詳細な写真と概略図を提供します。さらに重要なことは、その解剖を実行するための堅牢な手順を概説することです。30分間の解剖前ステップにより、内臓や皮膚のない筋肉で椎骨内の無傷の神経系を分離することができます。その後、2〜4時間の解剖を顕微鏡顕微鏡で行い、脊髄と胸部神経を露出させ、最後に中枢神経系と末梢神経系全体を死体から剥がします。このプロトコルは、世界中の神経系の解剖学と病態生理学を研究する上で大きな前進を表しています。例えば、神経線維腫症I型マウスモデルから解剖された後根神経節は、腫瘍進行の変化を解明するための組織学のためにさらに処理することができる。

概要

この方法の全体的な目標は、マウスの中枢神経系と末梢神経系を一体に分離することです。現在、げっ歯類の神経系全体を解剖して地球規模で研究するプロトコルはありません。神経科学者は通常、坐骨神経を任意の末梢神経1の代理として用い、L3からL5の神経節²を任意の神経節の代理として用いる。これらの方法を使用しても、結果が特定の神経/神経節に特異的であるかどうかを結論付けることは不可能です。少なくともいくつかの神経病理がすべての神経と神経^{節に等しく}影響を与えるわけではないことが知られているため^3,4,5、¹つは、それをグローバルに研究するために完全なげっ歯類の神経系の分離を可能にする技術を開発する必要があります。

長年にわたり、私たちはマウスの中枢神経系と末梢神経系を完全に解剖する方法を開発し、改良してきました。最初のステップは、基本的に、顕微鏡解剖顕微鏡下でのマイクロ解剖ステップに備えて、マウスの肉眼的解剖です。ステップ2から4では、脊髄と胸神経を露出させ、脳を解剖し、死体から脊髄全体と末梢神経を剥がします。