Method Article

CRITICとボックスベンケン応答曲面法の組み合わせに基づくザンバを用いた鉄板川の加工技術の最適化

DOI:

10.3791/65139

⸱

May 12th, 2023

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1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

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本プロトコルは、CRITICとBox-Behnken応答曲面法を組み合わせたザンバ炒め鉄板川の効率的かつ標準的な無害化処理方法を記載しています。

Abstract

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中国語でTiebangchui(TBC)と呼ばれる トリカブト振り子 ブッシュの乾燥根は、最も有名なチベット薬の一つです。中国北西部で広く使用されているハーブです。しかし、TBCの強い毒性と、その治療用量と毒性用量が類似しているため、中毒の多くの症例が発生しています。したがって、その毒性を低減するための安全で効果的な方法を見つけることは緊急の課題です。チベット医学の古典を検索すると、ザンバで炒めたTBCの加工方法が「青海省のチベット医学の加工仕様書(2010)」に記録されていることがわかります。ただし、特定の処理パラメータはまだ明確ではありません。そこで本研究では、残葉炒めTBCの加工技術の最適化と標準化を目的とする。

まず、TBCのスライス厚、残波量、処理温度、時間の4因子について一因子実験を行った。残葉炒めTBC中のモノエステルおよびジエステルアルカロイド含量を指標として、CRITICとBox-Behnken応答曲面法を組み合わせて、残葉炒めTBCの加工技術を最適化しました。残葉炒めの加工条件は、TBCスライス厚2cm、残葉3倍、加工温度125°C、炒め物60分とした。本研究により,残葉炒めTBCの最適かつ標準的な加工条件が決定され,残葉炒めTBCの安全な臨床利用と工業生産の実験的基礎が得られた。

Introduction

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トリカブト振り子ブッシュとA.フラバムハンドの乾燥した根は、最も有名なチベット薬の1つであり、中国語でTiebangchui(TBC)と呼ばれています1,2。TBCの乾燥した根は、寒さや風を払いのけ、痛みを軽減し、ショックを和らげるのに役立ちます。「中華人民共和国保健部の医薬品基準(チベット医学)」の第1巻に記録され、TBCの乾燥根は関節リウマチ、あざ、その他の風邪病の治療に一般的に使用されていると述べています3。しかし、TBCの臨床治療用量はその毒性用量と同様であり、不適切な使用による中毒または死亡の事件が頻繁に報告されています4。したがって、TBCの毒性を低減し、有効性を維持することは、長年にわたって研究のホットスポットとなっています。

チベット医学では、処理はTBCの毒性を軽減するための最も効果的な方法の1つです。「青海省のチベット医学の加工仕様(2010)」によると、元のハーブ(TBC)を鉄鍋に入れ、ザンバが黄色くなるまでザンバと一緒に炒めた後、ザンバを取り除き、ハーブを空気中で乾燥させます5,6。しかし、....

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Protocol

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残葉炒めTBC処理法は、CRITICとボックスベンケン応答曲面法を組み合わせて最適化および標準化されました。ベンゾイルアコニチン、アコニチン、および3-デオキシアコニチンをこの手順中の評価指標として使用しました。

1. サンプル溶液の調製

  1. 標準物質原液を調製する。電子分析天びんで9.94 mgのベンゾイルアコニチン、8.49 mgのアコニチン、および6.25 mgの3-デオキシアコニチン(材料表)を正確に計量し、10 mLメスフラスコに入れます。次に、0.05%塩酸メタノール溶液を加えて固形分を溶解し、容量を10mLにします。最後に、混合物をよく振って、0.9940 mg / mLベンゾイルアコニチン、0.8490 mg / mLアコニチン、および0.6250 mg / mLの3-デオキシアコニチンの標準物質ストック溶液を取得します。
    注意: 塩酸は腐食性の高い物質です11.手袋、白衣、ゴーグル、ヒュームフードなどの適切な保護具を使用してください。
  2. 試験サンプル溶液を調製する。
    1. 残葉炒めたTBC粉末2gを円錐フラスコに入れて炒めます。
      1. TBC30g(2cm)と残波90gの重さを量り、予熱した炒め機に入れて残波炒め物を作ります。炒め物の時間と....

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Results

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この研究では、使用した溶出勾配は、デバッグを繰り返した後に決定された、残葉炒めTBCの3つのインデックス成分に対して良好な分解能(図1)を示しました。残葉炒めTBCの3つの指標成分は、特定の濃度範囲内で良好な線形関係を示した(表2)。残葉炒めTBCの精度(表5)、安定性(表6)、再現性(表7)、サンプル回収率(表8)は、いずれも中国薬局方(第4巻、2020年)22に規定された方法論的範囲内であり、この方法が実行可能であることを示しています。したがって、HPLC法は残葉炒めTBCの分析を行うのに信頼性があった。

各因子が加工技術に及ぼす影響を一因子検定を用いて解明し、その結果を 図2に示す。残葉炒めTBCの総合得点の傾向を異なる条件で可視化した。スライ.......

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Discussion

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TBCは、風邪をほぐし、痛みを和らげる効果がある重要なチベット薬です。それは何千年もの間中国で外傷性損傷とリウマチ性関節痛を治療するために主に使用されてきました24,25,26。ジテルペノイドアルカロイドは、TBC27,28,29の有効成分と毒性成分の両方です。TBCのトリカブトアルカロイドの主な毒性作用は、神経毒性、心毒性、および胃腸毒性です30,31。TBCは通常、毒性のリスクを軽減するために経口使用前に処理されます。蒸し、デコッキング、砂揚げなどのさまざまな加工方法、およびヘジ煎じ薬、チンケワイン、ザンバによる加工は、TBCの有効性を維持しながら.......

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Disclosures

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著者は、開示すべき利益相反はありません。

Acknowledgements

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この研究は、中国国家自然科学基金会(第82130113号)、中国ポスドク科学基金会(第2021MD703800号)、四川省科学技術部青年科学財団(第2022NSFSC1449号)、成都中医薬大学の「興林奨学生」研究促進プログラム(第2022NSFSC1449号)の財政的支援を受けました。BSH2021009)。

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
3-デオキシアコニチン成都Desiteバイオテクノロジー株式会社DST221109-033
Aconitine成都Desite Biotechnology Co., Ltd.
酢酸アンモニウム津ケルメル化学試薬有限公司クロマトグラフィーグレード
ベンゾイラコニチン成都Desiteバイオテクノロジー株式会社
Design-ExpertソフトウェアStat-Ease, Inc., ミネソタ州ミネアポリス, USAversion 13.0
電子分析天秤Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.FA1004
高速液体クロマトグラフィー島津製作LC-20A
高速スマッシングマシン北京中興Weiye楽器有限公司FW-100
ミリポアフィルター天津Jinteng実験装置有限公司φ13 0.22 Nylon66
炒め機常州Maisi Machinery Co., LtdType 5
TiebangchuiGannan Baicao Biotechnology Development Co., Ltd20211012
超純水全身RephiLe Bioscience, Ltd.Genie G
超音波洗浄機寧波信義超音波機器有限公司SB2200
Zanba27 Chuanzang Road、Ganzi県-
DSTDW000602天DSTDB005502所

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Li, C. Y., et al. Aconitum pendulum and Aconitum flavum: A narrative review on traditional uses, phytochemistry, bioactivities and processing methods. Journal of Ethnopharmacology. 292, 115216(2022).
  2. Wang, J., Meng, X. H., Chai, T., Yang, J. L., Shi, Y. P.

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Tiebangchui ProcessingZanba Stir FryBox Behnken MethodCRITIC MethodResponse SurfaceHigh Performance Liquid ChromatographyAlkaloid ContentProcessing OptimizationToxicity ReductionQuality Control

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