方法論記事

背根神経節痛の圧迫を伴うラットモデルに対する推拿の鎮痛効果

DOI:

10.3791/65535

2023年7月14日

* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

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本稿では、推拿療法を用いたラットの後根神経節の慢性圧迫を治療するためのマニピュレーションと、疼痛挙動と病理組織学的結果に基づいてその有効性を評価する方法を紹介します。

要約

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神経因性疼痛は、人口の6.9%〜10%が罹患し、腰椎椎間板ヘルニア、脊柱管狭窄症、椎間孔狭窄症などのさまざまな病因による神経損傷に起因する一般的な状態です。中国の伝統的な手技療法である推拿は、神経因性疼痛の治療のための臨床診療で鎮痛効果を示していますが、その根底にある神経生物学的メカニズムは不明のままです。動物モデルは、推拿の基本原理を解明するために不可欠です。この研究では、後根神経節(DRG)を圧迫したラットの標準化された推拗プロトコルを提案し、ステンレス鋼の棒を椎間孔に挿入してDRG圧迫を誘導し、制御された環境で場所、強度、頻度の特定のパラメーターで推拿操作を実行し、 推拿治療の行動および組織病理学的結果を評価します。この記事では、この研究の潜在的な臨床的意味と限界についても議論し、推拿に関する将来の研究の方向性を提案します。

概要

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臨床現場では、様々な原因による神経根圧迫による神経病理学的疼痛を観察することが一般的です。この神経障害性疼痛の最も典型的な形態は腰椎椎間板ヘルニア(LDH)であり、これはしばしば持続し、再発し、治癒が困難です。世界人口の約9%がLDHに罹患しており、大きな社会的・経済的負担をもたらしています1。このタイプの神経障害性疼痛の発生率は年々増加しており、人間の生産とライフスタイルの変化により、患者は若年化する傾向にあります2。非ステロイド性鎮痛剤を使用しても、患者の症状を完全に緩和することはできません。その結果、LDHによる疼痛を治療するための推拿などの代替療法がますます注目されています。

LDHの保存的治療の一種である推拿療法は、腰痛の予防と治療のために世界中のさまざまな臨床診療ガイドラインで広く推奨されています3,4。研究によると、推拿はLDH患者の血清IL-6や腫瘍壊死因子α(TNF-α)などの炎症因子を有意に低下させ、患者の痛みや腰機能障害を改善することができます5。しかし、推拿療法の鎮痛効果の背後にある具体的なメカニズムは不明のままです。

動物モデルは、LDH....

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プロトコル

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この研究は、復旦大学神経生物学研究所の疼痛研究室で実施されました。実験は承認され、すべての外科的処置と動物の取り扱いについて、国際疼痛学会(LASP)によって確立された実験動物保護のためのガイドラインに厳密に準拠しました。本研究では、40〜50日齢の32匹の雄で構成され、平均体重220〜1.38 gのクリーングレード±Sprague-Dawley(SD)ラットを使用しました。これらのラットは、中国科学院上海生命科学院実験動物センターから入手しました。動物は適切に世話され、独立した換気、調節温度(22±1°C)、湿度(40%〜50%)を備えた専用の部屋に収容されました。ネズミはケージの中で十分な餌と水を得ることができました。実験動物室は、ラットの概日リズムの規則性を維持するために12時間の明暗サイクルに従い、指定された担当者が定期的にパッドを交換しました。X線検査は、上海中医薬大学附属岳陽中医薬統合病院放射線科で行われました。

1. 研究参加者とグループ分け

  1. 32匹のラットを、ナイーブ(対照)、偽(偽手術)、CCD(慢性後根神経節圧迫)、CCD+推拿(8ラット/群)の4つのグループに割り当てます。ネズミは動物施設で餌と水を自由に入手できました。
    注:ナイーブラットには介入がなかったが、偽グループはCCDグループのラットと同じ外科的処置を受けたが、L4およびL5椎間孔に「L」字型のステンレス鋼棒を残さなかった。CCD群の....

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結果

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推拿療法は、CCDモデリングによって引き起こされるラットの機械的および熱的刺激の閾値を下げるのに役立ちます
17日間の推拗療法後、歩痂塞療法を受けたCCDラットと未治療のCCD群の間でPWT閾値に有意差が観察された(P = 0.021、<0.05)(図6 および 表1)。

CCD群のラットは、治療開始時から疼痛閾値の改善を示し、モデリング後の14日目からCCD群と推拿療法群との間で熱痛閾値に有意差が認められました(P = 0.0047、0.0056、0.0049、<0.01)(図7 および 表2)。

推拿療法の適用は、CCDモデルによって引き起こされる細胞壊死を改善しませんでした
後根神経節のHE染色に基づき、L字型.......

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ディスカッション

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私たちの研究グループは、初期段階の推拿操作のパラメータに関する関連研究を行ってきました。まず、推拿操作の力の強さを設定することが重要です。臨床推拿では、施術者は自分の経験や患者の主観的な感情に応じて力の強さを調整し、コミュニケーションを通じて最高の推拿効果を実現します。しかし、動物実験では実現不可能です。動物実験では、推拿操作の強度を定義するために「応答閾値」が使用されます。これらは、動物の本能的な反応に基づいて、加えられた推拿力が適切かどうかを判断します。Randall17 は、この方法を用いて、ラットの炎症モデルにおける疼痛挙動を研究しました。違いは、ランドールが局所的な炎症領域で操作したのに対し、この実験は損傷のない領域で操作したことです。トゥイナを激しく操作すると、ネズミは叫び声をあげ、反射神経から逃れることができます。この重力強度の設定は、形式的推拿力強度がこの重力強度よりも小さいことを決定します。150匹のラットの5-25N間の最大悲鳴および逃避反射の押圧値の分布に基づいて、平均と標準偏差が9.93と3.018(図11.......

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開示事項

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著者は何も開示していません。

謝辞

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この研究は、ShanghaiCritical Clinical Specialties ConstructionProject(許可番号:Shslczdzk04001)の支援を受けました。上海科学技術委員会のセーリングプログラム(助成金番号:22YF1444300);上海中医薬大学(補助金番号:2021LK091)の予算内のプロジェクト。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
「L」ステンレス鋼棒(長さ4mm、直径0.4mm)手作り/CCDモデル用
ALMEMO広告測定装置ahlborn2450-1機械的回収閾値試験
恒温スライサー CM-1900ライカ1491950C1US試料製造用
消毒剤(ヨウ素) 100mL/ボトルLIRCON/山東リルカン/消毒用
使い捨て滅菌シリンジ 5mL上海ミーシャワ医療工業/注射用
電子顕微鏡 CX-31オリンパス、日本BJ002318標本観察用
指圧録音蘇州長賢 光電子技術CX1003wトゥイナ操作用
フォームボード (35 cm x 20 cm)手作り/ネズミを固定するための自家製装置
です MERSILK W2512Johnson &ジョンソン/組織縫合用
中性バルサムシノファーム 化学試薬10004160試料製造
用 パラホルムアルデヒド中国国家化学試薬/試料製造用
ペントバルビタールナトリウムシグマ・アルドリッチP3761ラットの麻酔用
マウスおよびラットの足底試験装置(ハーグリーブス法)IITC 生命科学/足の引き出し潜伏遅延実験
用精密電子スケールJY3002精密科学機器/ラットの体重測定
バリカンフィリップHP6341/00ラットの毛皮のシェ
ービングラット同済大学(自作)/同済大学製の自家製装置で、ネズミを効果的に固定し、後肢を完全に露出させることができます。
Tissue-Tek O.C.T. CompoundSAKURA4583試料作製用
浦壇中国国家化学試薬/の麻酔用
XR-600東莞Kaso Electronic Technology/CCDモデル
xyleneShanghai Sinopharm Group100092試料作製用
上海ラットスラットX線検出器の検討

参考文献

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  1. Vos, T., et al. national incidence, prevalence, and years lived with disability for 328 diseases and injuries for 195 countries, 1990-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016. The Lancet. 390 (10100), 1211-1259 (2017).
  2. Amin, R. M., Andrade, N. S., Neuman, B. J.

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