この記事では、口腔鼻腔瘻のあるマウスモデルを確立するための段階的な手順を概説します。口腔鼻瘻は、加熱された眼科焼灼を使用して硬口蓋の正中線部分を損傷し、口腔と鼻腔の間に開口部を形成することによって作成されました。
このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。
この記事について
サマリー
要約
この研究は、口腔瘻を調査するための実行可能なモデルを開発するために加熱された眼科焼灼を利用する方法を提示します。C57BL/6マウスを用いて、口腔鼻腔瘻(ONF)モデルを確立した。ONFを作製するために、マウスに麻酔をかけ、固定し、硬口蓋を露出させた。外科的処置中、眼科焼灼を使用して硬口蓋の正中線に2.0 x 1.5mmの全層粘膜損傷が誘発されました。実験を成功させるためには、ONFのサイズを制御し、出血を最小限に抑えることが重要でした。ONFモデルの有効性の検証は、解剖学的評価と機能的評価の両方を含む、術後7日目に実施されました。口腔内に鼻中隔が存在し、口腔内に注射した際の鼻孔からの滅菌水の流出により、ONFモデルの確立に成功しました。このモデルは、死亡率が低く、体重が有意に変化し、ONFサイズの変動が最小限であることを特徴とする、実用的で成功した口腔鼻腔瘻を実証しました。今後の研究では、口蓋創傷治癒のメカニズムを解明し、口腔鼻腔瘻の新しい治療法を探求するために、この方法論の採用を検討する可能性があります。
概要
口腔と鼻腔の間の異常な開口部である口腔瘻(ONF)は、臨床的には歯槽突起から口蓋垂までの構造領域の欠損として現れ、口蓋裂修復後の合併症として一般的に発生します1。ONFの患者は、食物逆流、構音障害、および咽頭機能障害を経験し、生活の質に大きな影響を与えます2,3,4。術後ONFの割合は、裂け目の幅、Veauタイプ、および手術方法5,6,7,8などの要因により、2.4%から55%の範囲です。さらに、ONF修復後の再発率は0%から43%の範囲で高くなっています9。
最近、さまざまな材料、薬物、および新しい技術を含む、いくつかの新しい治療法がONFの分野で有望であることが示されています10,11,12,13,14,15,16,17。<....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
プロトコル
この研究のすべての動物手順は、四川大学西中国口腔病学学校の倫理委員会によってレビューおよび承認されました。本研究では、成体C57BL/6マウス(雌)を用いた。
1.手術の準備
- 手術に必要な手術器具を集めます:発芽器、眼科用焼灼、顕微手術用ハサミ、顕微手術用ピンセット、注射器、針(26 g x 0.63インチ)(図1A、B)( 材料表を参照)。
注意: 外科的処置の前に、眼科用焼灼、マイクロサージェリーピンセット、マイクロサージェリーハサミなどの手術器具を102.9 kPa(1.05 kg / cm2)および121°Cで20分間オートクレーブします。 - 手術用ドレープ、ラテックス手袋、滅菌綿、滅菌シート、滅菌金属ホイル、手術用プラットフォームとしての発泡スチロールボード、輪ゴム(医療用ラテックス手袋を引き裂くことで入手できる)、テープ(図1C)( 材料表を参照)など、必要な手術用品を集めます。
注意:手術野用の注射器や滅菌シートなど、マウスごとに個別の消耗品セットを使用してください。 - 手術部位と器具(光源、発泡スチロールボード、温度維持....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
結果
この実験法の実現可能性と安定性を評価するために、10匹のマウスで同様の手順を実行し、死亡率、創傷サイズの変化、体重、および組織学的分析に関する観察を行いました。マウスは7日目に安楽死させた。
この手順は低い死亡率を示しました。図1A-Cに示されている眼科焼灼と発芽器は、この実験で使用された主要な器具でした。ONF モデルは、提供されたプロトコルに従って作成されました。手術した10匹のマウスのうち、術後7日目に死亡したのは1匹だけでした。実験全体の死亡率は約10%でした。
その結果、記載された方法を使用して生成されたONFのサイズに顕著なばらつきがあることが明らかになりました。手術当日、すべてのマウスに長さ2.0mm、幅1.5mmの楕円形の創傷が認められました。術後7日目にONFの形成を評価すると、ONFサイズの有意な変動が観察されました(P = 0.0085)(
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
ディスカッション
研究者は、ONF 10、11、12、13、14、15、16、17を治療するためのさまざまな材料、薬物、および新しい技術を探求してきました。外科的処置の進歩により、ONFの発生率と再発は減少しています。しかし、この疾患のユニークな特性により、診療所のONF患者の数は限られており、潜在的な治療法を研究するための標準化されたモデルが必要です。ONFモデルを作成するためのいくつかの方法が説明されていますが18、19、
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
開示事項
著者は何も開示していません。
謝辞
本研究は、四川大学華西口腔病院研究開発プログラム(RD-02-202107)、四川省科学技術支援プログラム(2022NSFSC0743)、四川省ポスドク科学基金会(TB2022005)のH. Huangへの助成金の支援を受けて行われました。
....アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| Germinator | Electron Microscopy Sciences | 66118-20 | 加熱および消毒装置 |
| ラテックス手袋 | Allmed | または類似の | |
| ライト | オリンパス | A1813 | |
| メロキシカム | MedChemExpress | HY-B0261 | 破砕; 5 mg/kg |
| 顕微手術器具 (はさみとピンセット) | 江蘇通慧医療機器 (株) | M-Y-0087 | 手術器具 |
| 眼科焼灼 | Suqian Wenchong Medical Equipment Co. | 1.00234E + 13 | 手術器具 |
| 滅菌綿、 | Yancheng Begu Technology Co. | または同様の | |
| 滅菌金属箔 | バイオシャープ | または同様の | |
| 滅菌シート | 3M | XH003801129 | または同様の |
| 外科用ドレープ | Yancheng Begu Technology Co. | または同様の | |
| シリンジYancheng | Begu Technology Co. | S-015301 | または類似 |
| のテープ | Bkmamlab | または同様の | |
| 温度維持装置 | ハーバード装置 | LE-13-2104 | |
| ゾレチル50 | ビルバック | 80mg/kg |
参考文献
- Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
- Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
再版と許可
