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方法論記事

抗毒素生産のための Tityus serrulatus (ブラジルの黄色いサソリ)の飼育下維持と毒抽出

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DOI:

10.3791/65737

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2023年10月6日

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この記事について

サマリー

ここでは、ブラジルの医療システムの需要を満たすために、その後のサソリの抗毒素生産に毒を提供することを目的として、大規模な Tityus serrulatus Lutz and Mello(ブラジルの黄色いサソリ)の飼育に成功した維持および毒抽出プロトコルを紹介します。

要約

サソリの毒は、いくつかの熱帯および亜熱帯諸国で公衆衛生上の問題です。 Tityusのserrulatus Lutz and Mello, 1922 (ブラジルの黄色いサソリ) は、ブラジルで年間約 150,000 件の毒素感染例の原因であり、そのうち 10% は生命を脅かす毒の影響を逆転させるために抗毒素治療を必要としています。そのため、数千匹の T. serrulatus 個体が毒液抽出のために管理された飼育下で維持され、その後、サソリの抗毒素の全国供給の生産に使用されます。Instituto Butantan は、ブラジルの主要な抗毒素製造研究所であり、ブラジルの医療システムに約 70,000 バイアルのサソリ抗毒素を提供しています。したがって、畜産プロトコルと毒液抽出方法は、大規模で標準化された毒液生産を成功させるための重要なポイントです。この記事の目的は、 T. serrulatus の飼育プロトコルについて説明し、飼育ルーチンと毒液抽出手順を網羅し、適正製造基準に従い、動物福祉を確保することです。これらの慣行により、最大20,000頭の動物を飼育下で維持することができ、抗毒素製造の需要に応じて毎月3,000〜5,000匹のサソリを搾乳し、平均90%の確実な抽出を達成しています。

概要

サソリは、約2,621種からなるクモ目、サソリ目に属する節足動物です1,2。これらの動物は地理的範囲が広く、南極大陸1を除くすべての大陸に生息しています。サソリによって引き起こされる毒は、世界中で毎年何千人もの人々の罹患率または死亡を引き起こします3。2019年には、これらの動物によって引き起こされた事故は年間120万件以上、死亡者は3,500人以上と推定されています。ブラジルでは、症例数は指数関数的に増加しており、2017年以降、年間100,000件以上に達しています4,5,6。過去数十年間にブラジルで観察された無秩序な都市化は、環境悪化と気候変動に関連して、適切な下水処理とゴミの定期的な収集と処分なしに、T. serrulatusなどの侵略的なサソリの増殖の条件を提供し、人間との接触を増やし、その結果、有害な事故を引き起こしました4,7,8<....

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プロトコル

無脊椎動物を含むプロトコルは、動物の使用とケアに関するInstituto Butantanの委員会の承認を免除されています。しかし、ここで述べるサソリの飼育は倫理的な基準に従い、動物福祉は種のニーズに応じて尊重される。

1. 住まい

  1. サソリは、最大350匹の動物を含む囲い(高さ35 cm、幅35.5 cm、長さ72 cm)として、共同のポリプロピレン容器に保管してください。
  2. 動物の囲いが収容されている部屋は、ライトが点灯した状態で24時間、ライトがオフの状態で14時間の光サイクルで、24°C(±0.5°C)の制御された温度に維持されます。
  3. 各容器の囲いの床(底部)をクラフト紙で裏打ちし、動物が紙の下に入り込まないように、四方の端をマスキングテープで固定します(図3A)。
  4. 4つの段ボールトレイ(卵トレイ)を垂直基板として使用し、容器の片側に積み重ね、各トレイの間に硬い段ボールシートを置きます(図3B、C)。
  5. 囲いの反対側に浅いポリプロピレントレイ(水トレイ)を置き、動物の水源として浸した綿を入れます(図3B)。
  6. 空気....

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結果

各手順に対して30の標準作業手順書(SOP)が作成され、技術者間での手順の再現性と品質パラメータへの準拠が保証されています。摘出術後の平均死亡率は約12%であり、電気刺激のルーチンと、処置を適用することでストレス要因がうまく減少する飼育環境を考慮すると、低いと考えられる。

動物の健康を保つために、箱の一方の端に綿と水で覆われたトレイが置かれ、反対側には段ボールシートと卵トレイが層状に配置され、 T. serrulatus の自然の暗くて湿った生息地をシミュレートします(図3D、E)。記載された基質は、限られた空間で多数の動物を維持し、十分な避難所と空間を提供し、したがってそれらの福祉を確保するのに有効であることが証明されている。

毎年、T. serrulatusの毒液の生産量は80グラムを超え、これは13グラム以上の凍結乾燥毒液に相当します。1頭当たりの平均搾乳量、頭数、月当たりの毒液量などの生産指.......

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ディスカッション

記載された方法を適用することで、 T. serrulatus の個体を大量に飼育することができ、年間の毒の生産に必要なサソリの数を一貫して予測することができます。このようにして、抗毒素の製造プロセスに供給するのに十分な毒液のバッチを事前に提供することができます。同時に、メンテナンス、給餌、および毒液抽出のために事前に確立されたスケジュールの作成は、活動の重要な部分であり、説明されているプロトコルの遵守に役立ちます。したがって、継続的な生産を維持するためには、ルーチンの確立が必須です。

著者の知る限り、毒の生産を目的としたサソリの飼育飼育に関する科学的に記述されたプロトコルはありません。したがって、記載された方法の開発および適用は、本稿で提示されているように、生産数の増加を達成するための効率的で成功したプロトコルを提示することを目的としている。ここで紹介する毒液抽出のプロトコルは、大量の毒液を得る必要があるため、手順を可能な限り簡素化する目的で開発されたため、以前に説明した他の方法論とは異なります。したがって、提示された方法は、短期間に多数の動物を抽出することを可能.......

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開示事項

著者には開示すべき利益相反はありません。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
段ボールシートNANA
卵トレイNANA36個置き 卵トレイ
電気刺激装置Instituto ButantanART-FV-01内部的に毒抽出用に設計されています 
クラフト紙NANAレギュラークラフト紙
メイキングテープNANA ホワイトマスキングテープ (24 mm x 50 m)
ポリプロピレン容器NANA70 L ポリプロピレンボックス (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L - 72 cm)
ポリプロピレントレイNANA ポリプロピレントレイ (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L - 30 cm)
粘着プラスチックNANA
段ボール

参考文献

  1. Polis, G. A. The biology of scorpions. , Stanford University Press. (1990).
  2. Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138(2022).
  3. Reckzi....

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