ラットにおけるノテキシン誘発性筋損傷に関するDing's Roll法の模倣

サマリー

このプロトコルは鼎のロール方法をまねる簡単な装置を記述し、骨格筋傷害のラット モデルを確立し、血清の損傷のマーカーの変更を検出するために傷つけられたティッシュおよび酵素つながれたimmunosorbentの試金の病理学を観察するのにヘマトキシリンeosinの汚損を使用する。

要約

ディンのロール法は、伝統的な中国式マッサージ(推拿)クリニックで最も一般的に使用されているマニピュレーションの1つであり、中国で最も影響力のある現代のトゥイナマニピュレーションの1つです。これは、一本指禅のジャンルで一般的に使用される伝統的な圧延方法に基づいており、鼎のロール法と呼ばれています。抗炎症作用と血行促進作用により、鼎のローリング法はミオパチーに効果があります。Dingのロール法は、ヒトの皮膚にかかる力の領域が大きいため、ラットやウサギなどの皮膚面積が小さい実験動物では実行が困難です。また、人体に施す推拿の強度は実験動物に施す強度と異なるため、実験中に推拿の治療効果が得られない強度が高すぎたり低すぎたりすることがあります。この実験は、Dingのローリング操作パラメータ(強度、頻度、推拿持続時間)に基づいて、ラットに適した簡単なマッサージャーを作成することを目的としています。この装置は、動物実験における操作を標準化し、主観的要因による異なる動物に加えられる推拿力の変動を減らすことができます。ノテキシン誘発性骨格筋損傷のラットモデルを確立し、血漿損傷マーカーであるクレアチンキナーゼ(CK)と脂肪酸結合タンパク質3(FABP3)を使用して、骨格筋損傷に対するTuinaの治療効果を評価しました。その結果、この推拿マッサージャーはCKとFABP3の発現レベルを低下させ、骨格筋の損傷の程度を遅らせることができることが示されました。したがって、ディンのロール法を模倣した本稿の推拿マッサージャーは、実験研究における推拿操作の標準化に寄与し、その後の推拿のミオパチーに対する分子機構の研究に大いに役立つ。

概要

筋肉損傷は、臨床および日常生活における一般的な外傷性損傷であり、外部打撃(挫傷)または筋線維の慢性的な過度の緊張(緊張)などによって引き起こされ、筋肉の機能障害や痛みを引き起こし、^{患者の生活の質に}深刻な影響を与えることさえあります1。急性運動過多損傷後のできるだけ早い時期にリハビリテーションを開始することは、スポーツ復帰までの期間を短縮し^{2、痛みを軽減する}ための鍵となります^3,4。現代の西洋医学では、筋肉損傷の臨床応急処置は、筋肉組織への有害な出血を止めるための安静、氷、圧迫、挙上(RICE)の原則に従い⁵、痛みを和らげるための非ステロイド性抗炎症薬⁶。エクソソーム⁷や組織工学⁸などの新しい治療法の発見は、骨格筋疾患の潜在的な治療戦略となり、以前の薬理学的治療の欠点を補うものとなった。しかし、それはまた、患者の治療費を増加させ、彼らを途方もない経済的圧力にさらす可能性があります⁹。したがって、筋骨格系の問題を治療するには、代替療法および補完療法が推奨されます

プロトコル

動物が関与する処置は、湖南中医薬大学の施設ケアおよび使用委員会によって承認されています。

1.ローリングマッサージャーの組み立て

1. ゴムローラー、フォークホルダー、スプリング、リミットバッフル、調整スプリント、ネジ、アクリルハンドルで構成されるマッサージャーを選択します(図1)。ゴムローラーの長さ3cm、直径1.6cm、スプリングの長さ3cm、直径0.9cm、リミットバッフルの長さ3cm、幅2cm、ハンドルの長さ12cm、直径0.9cmを確認してください。
2. 力制御:文献結果²³によると、鼎のロール法の下向き圧力は体重の約10%であることが判明したため、前方転がりの設計中に加えられる圧力はラットの体重の約10%(0.2〜0.3 N)です。リミットバッフルの角度を調整して、計量コントローラーのマッサージャーの最大圧力が約0.3Nになるようにテストします。この圧力要件は、ラットのニーズを満たします。
3. ロールバック時の最小圧力が約0.08Nであることを確認してください(図2)。圧力が、前方力と後方力の比率が3:1であるというDingのロール法の要件に正確に準拠していることを確認してください。
4. 治療前に、オペレ....

結果

損傷後のラット骨格筋の形態学的特性を観察するために、腓腹筋をヘマトキシリンとエオシンで染色し、染色した画像を、1群あたり8匹のラットのプロトコルに記載されているように解析ソフトウェアで読み取った。ノテキシンによって誘発された腓腹筋損傷ラット(NTX群)では、多くの筋細胞が破裂、萎縮、壊死し、不規則に配列した。また、患部周辺には好中球やリンパ球の浸潤が多く見られました(図4B)。しかし、ローリングマッサージャーによる推拿治療後、NTX+Tuina群の筋細胞の病態は改善し、NTX群と比較して破裂細胞、萎縮細胞、壊死細胞が少なく、浸潤する炎症細胞の数も少なかった(図4C)。対照群では、ラットの筋肉細胞は均等にサイズ化され、密に配置され、炎症細胞浸潤はありませんでした(図4A)。

Dingのローリングマッサージャーを利用したラットの腓腹筋損傷に対するTuinaの治療効果をさらに確認するために、ELISAを使用して.......

ディスカッション

ここでは、ラットの骨格筋損傷に対する推拿治療のプロトコールを記載し、治療後の骨格筋損傷の程度を解析し、その有効性を検証した。特に、薬物誘導(ノテキシン、ブピバカイン)¹⁶、鈍的挫傷²⁶、挫傷²⁷、虚血再灌流²⁸を含むがこれらに限定されないラット骨格筋損傷モデルは、推拿で介入することができる。病理組織学的変化を観察するためのHE染色と骨格筋損傷のマーカーを決定するためのELISA検出により、ノテキシンがラットの腓腹筋に深刻な損傷を与えるのに対し、ディンロール法をシミュレートするマッサージャーは筋肉の損傷を軽減できることが直感的に示されました。これらは、骨格筋損傷の治療におけるTuinaの有効性について説得力のある証拠を提供します。

Dingのロール法を模倣したラットで推拿を行う際に考慮すべきいくつかの必要な手順があります。治療の前に、推拿オペレーターは、ローリングマッサージャーを少なくとも3回使.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
1 mLシリンジ	JIANGXI FENGLIN	20220521
1.5 マイクロチューブ	Servicebio	EP-150X-J
15 mL 遠心分離管	Servicebio	EP-1501-J
30G 針	CONPUVON	220318
5 mL 採血管	Servicebio	QX0023
アクリルハンドル	広東 Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd	65643645
調整スプリント	CREROMEM
綿棒	INOHV	22080215
酵素標識器具	Rayto	RT-6100
エタノール	INOHV	211106
フォークホルダー	永康康哲健康技術有限公司	JL001
脱毛クリーム	Veet, France	LOTC190922002
ヘマトキシリン染色液セット	武漢 Google Biotech	G1005
イメージングシステム	ニコン、日本	ニコン DS-U3
IODOPHOR ディフェクション ソリューション	Hale&Hearty	20221205
Light microscope	ニコン	Eclipse, E100
リミットバッフル	CREROMEM	20220724
Notexin	Latoxan S.A.S.	L8104-100UG
ペントバルビタールナトリウム	メルク KGaA	P3761
ラット クレアチンキナーゼ (CK) ELISA キット	LunChangShuoBiotech	YD-35237
ラット脂肪酸結合タンパク質 3 (FABP3) ELISA キット	LunChangShuoBiotech	YD-35730
ゴムローラー	河北 Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd	202207
スクリュー	Weiyan	B05Z122
スプレイグドーリーラット湖	南スレイクKingda実験動物株式会社	SYXK2019-0009
スプリング	Bingzhang ハードウェア	TH001
外科用ブレード	Covetrus	#23
計量コントローラー	Iyoys	HY-XSQ

20220729ハードウェア