熱可塑性マイクロ流体チャネルの作製

サマリー

ここでは、ホットエンボス加工とヒートシールを使用して熱可塑性マイクロ流体チップを作製する方法を示します。その後、我々は、複合固相カラムを形成するために密封されたチップを介してその場の光監督接ぎ木面や重合で使用する方法を示します。

要約

私たちの研究室では、我々が正常に直接ポリマー/ナノ粒子複合材料のマイクロ溶解し、固相抽出カラムを用いて、ヒト血液、尿や便のマイクロリットルとsubmicroliterボリュームから核酸を単離した。回収したサンプルは、追加のクリーンアップを行わず、PCRableな集中、少量のサンプルです。ここでは、ホットエンボス加工とヒートシールを使用して熱可塑性マイクロ流体チップを作製する方法を示します。その後、我々は複合固相カラムを形成するために密封されたチップを介してその場の光監督接ぎ木面や重合で使用する方法を示します。私たちは、細菌の細胞溶解のために移植し、カーボンナノチューブ/ポリマー複合列の重合を実証。私たちは、その後、シリカ/ポリマー複合カラムを用いてチップ上のサンプルからの核酸の固相抽出に続いて溶解処理を示しています。添付のプロトコールは、溶解し、固相抽出カラムの両方を作成する方法に関する詳細な指示が含まれています。

プロトコル

マイクロ流体チャネルは、環状ポリオレフィン（ゼオネックス® 690R、ゼオンケミカル（株）、ルイビル、ケンタッキー州）で製造されています。ゼオネックスは、多孔質モノリスの形成に使用される光の指示化学に不可欠である、136 ° Cのガラス転移温度（T _g）を持ち、透明なUVです。マイクロチャネルは、マイクロ流体プラットフォームの負の（逆）機能を持っているニコ電鋳マスターモールドとのマイクロホットエンボス加工によって製造される。ホットエンボス加工は、次のとおり行われます。

1. 金型およびポリマー基板は、2つの平行な金属のプラテンの間に配置されています。
2. プラテンは、ゼオネックスの_T gを上記の30 º Cであるエンボス加工温度（166℃）、まで加熱されています。
3. プラテンは、その後約5分間一緒に押され、圧力は250 psiで維持されます。
4. モールドと基板は、その後1〜2分のために冷却し、加熱されたプラテンから削除し、手動で互いに分離される。
5. 1.5 mm径の井戸は、サンプル導入および収集のためのチャネルの両端で掘削されています。
6. エンボス加工プラスチック基板は、熱的に同封のマイクロ流体チャネルを形成するために、ゼオネックスの別の部分で接着されている。エンボス加工基板とカバー部分は、UV -オゾンやシール効率を向上させ、密閉チャネル構造（はなはだとKlapperich、2007）の再....