ここでは、寒冷凝固・うっ血性ラットの原発性月経困難症の治療において、へそにハーブ分割灸を施す際の手術手順と注意点について詳細に述べます。これにより、月経困難症ラットの身もだえ反応を大幅に改善し、痛みを緩和することができます。
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方法論記事
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ここでは、寒冷凝固・うっ血性ラットの原発性月経困難症の治療において、へそにハーブ分割灸を施す際の手術手順と注意点について詳細に述べます。これにより、月経困難症ラットの身もだえ反応を大幅に改善し、痛みを緩和することができます。
原発性月経困難症(PDM)とは、明らかな骨盤の病状を伴わない下腹部の痙攣性疝痛の発生を指し、しばしば他の全身症状を伴い、PDMの女性の生活の質を大幅に低下させ、月経女性の45%〜95%が影響を受けます。PDMの発生率が高いにもかかわらず、PDMはしばしば十分に治療されておらず、関連する研究者や女性自身によって無視されています。ハーブ分割灸(HPM)は、中国の病気の治療に広く使用されている伝統的な中国医学(TCM)の特徴的な外用療法です。患者のツボに漢方薬を塗り、灸治療用の薬草薬に灸スティックを点火することで病気を治療します。この研究で利用されたハーブの主な効果は、経絡の活性化と暖かさであり、気の循環を促進して痛みを和らげます。灸の熱刺激は、ハーブの人体への注入を早める可能性があります。したがって、ツボ、ハーブ、熱刺激を組み合わせたHPMは、婦人科疾患、特にPDMなどの機能性疾患の治療に適しています。この論文では、雌の実験ラットのShenque(CV8)ツボでのHPMの手順と注意事項について詳細に説明し、PDMのへそへのHPMの適用と開発をより良く促進するための実験的基礎を提供します。
原発性月経困難症(PDM)は、機能性月経困難症とも呼ばれ、思春期の少女や月経中の若い女性に影響を与える最も一般的な婦人科疾患の1つです1。それは、苦痛や子宮圧迫(けいれん)などの副作用と、骨盤の病状の証拠がない月経前後の腹部の炎症性の問題を特徴としています2。月経開始後8〜72時間で始まり、月経流出の増加の最初の数日間でピークに達する下腹部のけいれん3,4、時には背中や太ももに広がることは、多嚢胞性PDMの特徴的な症状です。状態の定義が異なり、月経痛の強度を評価するための標準化された方法がないため、女性の月経困難症の推定有病率は45%〜95%3,4,5です。生殖年齢の女性の約10%〜25%は、非常に重度のPDMに苦しんでいると考えられています6。PDMの有病率は20歳から24歳の年齢層で最も高く、その後徐々に減少します2。PDMは周期的な下腹部痛を特徴とし、腰痛、吐き気、嘔吐、頭痛、食欲不振、下痢7、さらにはうつ病や不安などの精神症状8,9などの他の全身症状を伴うことがよくあります。月経中、月経困難症の女性は全体的な生活の質の低下を経験します4,8,10。
さらに、研究によると、月経痛を繰り返すと中枢神経系の機能に影響を及ぼし、痛みを伴うステージと痛みのないステージの両方で痛みの知覚が変化する可能性があることがわかっています11。PDMの病因はプロスタグランジン(PG)に基づいているため、PDMの最も一般的な薬物治療は非ステロイド性抗炎症薬(NSAID)12,13であり、次いで経口避妊薬14です。薬物の副作用に加えて、10%〜20%の人がNSAIDsや避妊薬に反応しません3。現在の研究の大部分は、月経困難症が脳の解剖学と生理学に及ぼす影響に関係しており、治療アプローチにはほとんど注意が払われていません。そのため、臨床現場で広く適用でき、有効性が確立され、患者に受け入れられやすい治療戦略を見つけることが急務となっています。
ハーブ分割灸(HPM)は、中国で病気の治療に広く使用されている伝統的な中国医学(TCM)の特徴的な外用療法です。その利点には、最小限のコスト、副作用なし、良好な長期的効果、簡単な操作、および患者による容易な受け入れが含まれます。HPMがへそに及ぼす影響はPDMに有意であることがわかってい15、これは、子宮の冷熱欠乏症と過剰、さらには肥満細胞と関連受容体16の調節と密接に関連している可能性があります。研究チームは、HPMが月経痛をすぐに和らげることができることを証明しました17。
張中京は最初に月経困難症の概念を記録しました 女性のその他の病気と治療 黄金の部屋の、月経流出がベルトの下で好ましくなく、腹部が痛みに満ちていると書いています18。その主な症状によると、月経困難症は伝統的な漢方薬における月経痛と月経腹痛のカテゴリーに起因する可能性があります。月経困難症の症候群は、気と血液欠乏症の5つに分けることができます。冷凝固とうっ血;湿った熱蓄積;気の停滞とうっ血;肝臓と腎臓の欠乏症16。関連する研究によると、冷え凝固とうっ血の症候群は、PDM19,20の最も一般的な症候群です。TCMは、PDMと風邪病原体は密接に関連していると考えています21。月経中またはその前後には、雪海では過剰な血液の流れがあり、そのエネルギー的な性質により気の血液が急速に枯渇します。その結果、女性は、十分な健康エネルギーの欠如と、子宮とチョンとレンの経絡22の気と血液の急速な変動のために、病気の原因に対して脆弱です。体格がよく発達している女性は、生の食べ物や冷たい食べ物を摂取しないように、また月経中に風邪をひかないように予防策を講じる必要があります。そうしないと、冷たい病原体が子宮に侵入し、子宮内やチョン経絡とレン経絡内の血液の凝固と停滞につながる可能性があります。その結果、血流の停滞の結果として、個人は痛みを経験します。外部からの風邪病原体の侵入と体内の陰の寒さの存在の両方が、経絡の閉塞と凝固を引き起こす可能性があります。
月経困難症の位置はチョン子午線とレン子午線にあり、発症は気と血液の変化に関連しています。TCM理論では、灸は陽気を刺激し、経絡を温め、寒さを分散させ、血流を増やして痛みを和らげることで機能します。霊書23のジンフーによると、脈拍と血栓が真ん中にあり、凝固した血液と冷血がある場合、それは灸に適しています。これは典型的な外用月経困難症の治療です。以前に発表された作品では、24 のヨモギ の葉は 苦くて刺激的で、ほぼ疲れ果てた元の陽を回復し、12の経絡を接続し、3つの陰の経絡を通り抜け、気と血液を調節し、寒さと湿気を払拭し、子宮を温めます。灸は、対応するツボの助けを借りて、病原性因子を外部に排出することができます。 気と血液を内部で調節することで、経絡の調節、血液循環の活性化、痛みの停止に役割を果たします。へそはシェンケ(CV8)とも呼ばれ、レン子午線に属し、デュ子午線、チョン子午線、ダイ子午線を接続しています。TCMの理論によると、シェンケはファイブザンとシックスフー25に関連していると考えられています。それは先天的な基盤であり、陰陽バランスのピボットと見なされています。解剖学的には、PDMは骨盤に近接しており、子宮と密接に関連しています。PDM疾患は特に子宮に影響を及ぼし、その病因には気と血液の不均衡、および内臓の不均衡が含まれます。シェンクポイントを刺激することにより、子宮の気と血液の状態に直接影響を与え、月経困難症を効果的に治療することが可能です。前述の理論に基づき、月経困難症の症状改善と痛みの緩和を目的として、腹部に位置するShenqueツボの刺激をHPM治療に選択しました。
冷凝固とうっ血を伴うPDMへのTCMの介入をできるだけ忠実に模倣するために、雌ラットのへそでHPM技術を再現しました。へそのHPMには明確な鎮痛効果があり、月経困難症のラットの身もだえ反応を軽減できることが発見されました。PDMの改善と促進のためにへそへのHPMのメカニズムを調べるために、ラットを固定し、腹のShenqueツボでHPMを行う技術を検討しました。
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この実験プロトコルは、浙江中医薬大学の実験動物管理および倫理審査委員会によって承認されました。動物に対するすべての実験操作は、実験動物福祉倫理および動物実験安全規則に準拠しています。この研究では、浙江中医薬大学の実験動物センターの8〜10週齢の成体の雌Wistarラットを使用しました。実験に先立ち、ラットに制御された環境(温度:23-25°C、湿度:40%-60%)で1週間適応食を与えました。ラットは、8:00から20:00までライトが点灯し、餌と水に無制限にアクセスできるように、12時間の明暗サイクルで維持されました。次のプロトコルでは、寒冷凝固およびうっ血モデルの確立を伴う PDM とへそ治療手順の HPM について説明します。このプロシージャの表現を 図 1 に示します。
1. 冷え凝固とうっ血を呈するPDMの確立
2. 冷え凝固とうっ血を呈するPDMモデル雌ラットに対するHPMへそ療法
注:HPMへそ治療のための4つの最も重要な材料を準備します( 材料の表を参照)。
3. 行動テストの実施
4. 行動試験後の検体採取
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本研究では、安息香酸エストラジオールとオキシトシンの併用により、HPMへそ療法の効果を観察するための冷冷凝固型およびうっ血型のPDMモデルを誘導した。まず、ラットの身悶え行動を観察することにより、冷え凝固とうっ血のPDMラットがうまくモデル化されたかどうかを判断し、ラットの痛み行動、モデリング、および子宮への治療をWS、WL、および子宮指数を通じて評価します。モデリングの6日目 から10日目 まで、CV8(Shenque)で1日1回、毎回30分間、HPM治療を行いました。モデリングの11日目 に、ラットを麻酔下で安楽死させ、子宮を摘出してヘマトキシリンとエオシン(HE)の染色に使用して、子宮の病理学的状態と子宮組織に対するHPMの影響を評価しました。実験プロセスの概略図を 図1Aに示します。
冷え凝固とうっ血を呈したPDMラットの身もだえ行動に及ぼすHPMへそ療法の効果
冷え凝固とうっ血のラットにおけるPDMの程度を評...
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現在、冷冷凝固型とうっ血型を伴うPDMにはさまざまなモデリング方法がありますが、主な方法は、月経困難症のモデリングのためのオキシトシンと組み合わせた安息香酸エストラジオールであり、これに基づいて異なります。この研究では、モデリングに安息香酸エストラジオールとオキシトシンを組み合わせた全身凍結法を使用しました。全身凍結法の温度は-20°Cでした。 前回の事前実験では、温度が-25°Cの場合、ラットは重度の凍傷や尾の切断さえもすることが判明したため、温度を-20°Cに調整しました。私たちは、身悶えスコアと子宮HE染色によってモデリングの成功を確保し、それがその後の研究に使用できること、および参照意義があることを示しました。
HPM療法は、クローン病、潰瘍性大腸炎、月経困難症など、さまざまな疾患に効果的です15,32,33。しかし、臨床...
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著者は、宣言する利益相反を持っていません。
この研究は、浙江省自然科学基金会、Exploring Program Q(LQ20H270012)、浙江伝統中国医学技術計画(NO.2020ZB124)、浙江中国医科大学研究プロジェクト(NO.2021JKZKTS056B)、および浙江中医科大学第三附属病院の病院レベルプロジェクト(NO.ZS22ZA01)。実験条件を提供してくださった浙江中医科大学実験動物センターと浙江省鍼神経学重点研究室に感謝いたします。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 0.9%生理食塩水 | 杭州Gaoshengバイオテクノロジー株式会社 | SLYSZ1A | コントロールグループの注入用 |
| 1 mL使い捨て滅菌シリンジ | Changzhou Yuekang Medical Equipment Co., Ltd. | 3000-0515-14 | 薬物注射用 |
| 3mL(拡張)パスツールピペット | Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd. | YCKJ-HC-007245 | |
| 75%消毒アルコール | 杭州アウトップバイオテクノロジー株式会社 | N/A | 治療部位の滅菌用 |
| 接着剤コーティングガラススライド | 浙江省 Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 188105W | HE染色用 |
| 生化学インキュベーター | Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. 医療機器工場 | N/A | HE染色の組織脱ろう用 |
| 布素材 | 社内準備 | N/A | ラットを収納できるポーチ |
| デジタルマネージャー スライススキャンシステム | 浜松 | C13210-01 | HEスライススキャン用 |
| 使い捨てラテックス手袋 | 広州Ligeの技術Co.、株式会社。 | LG10-102-1I | 操作中に使用 |
| 安息香酸エストラジオール | 合肥 Xinkexin 動物製薬株式会社 | N/A | 月経困難症モデルを確立するため |
| エクセルシオール AS 全自動脱水機 | サーモサイエンティフィック | エクセルシオール AS | HE染色組織脱水症用 |
| メスのウィスターラット | 実験動物センター 浙江中医薬大学 | N/A | 220–250 g |
| 小麦粉 | 自社調製 | N/A | ハーブ分割灸治療用 |
| 鉗子 | 浙江 Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | |
| ホルムアルデヒド | 上海霊風化学試薬有限公司 | 441244-1KG | 組織固定用 |
| Gemini ASスライドステイナーThermo | Scientific | Gemini AS | 染色機 |
| Hemostat | 浙江Tuzhiの薬剤技術Co.、株式会社 | lsnz | 検体採取用 |
| HistoCore | Leica ( Arcadia H ) | 14039357258 | HE染色組織包埋用 |
| 医療用コットンボール滅菌 | 浙江中国医科大学第三附属病院 | N/A | 滅菌部位の滅菌用 |
| メチレンブルー染色液(0.1%) | 北京紅湖ユナイテッドケミカルプロダクツ株式会社 | G1300 | 発情周期の |
| マイクロダイセクションシャースクリーニング | 杭州Gaoshengバイオテクノロジー株式会社 | XWJ12A | 標本採取用 |
| 顕微鏡カバーガラス(24mm×50mm) | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | 10212450C | HE染色用 |
| ミクロトーム | ライカマイクロシステムズ | RM2255 | 組織切片用 |
| 美的冷凍庫 | 合肥美的冷蔵庫株式会社 | N/A | 冷凝固とうっ血を伴う月経困難症モデルを確立するため |
| 臼歯鉗子 | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | YGJD-11 | 試料採取用 |
| 封入剤 | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | CS9603-100mL | 組織装着用 |
| 灸スティック | 浙江中国医科大学第三附属病院 | N/A | ハーブ仕切灸治療用 |
| ペントバルビタールナトリウム | 杭州大文生物有限公司 | N/A | 検体採取用 |
| リン酸緩衝生理食塩水(PBS) | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | P1010-2L | 検体採取 |
| 用ハサミ | 浙江Tuzhi製薬技術有限公司 | lsnz | 標本収集用 |
| 切片切片刃 | Shanghai Saihan Technology Co., Ltd. | LEICA-819-box | HE染色パラフィン切片調製用 |
| シェーバー | Shenzhen Cordes Electrical Appliance Co., Ltd. | N/A | ラットの毛を剃る |
| ナトリウム | 化学試薬(株) | A501218-0001 | 試料採取用 |
| ショ糖 | 浙江省 Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | S11055-500g | 勾配脱水 |
| 用断熱容器 | 浙江省Tuzhi製薬技術有限公司 | lsbwx8l | パラフィン切片脱ロウ用 |
| ティッシュ埋め込みカセット、長方形、壊れやすい蓋付き。 | 浙江Tuzhi製薬技術有限公司 | 31050102W | HE染色組織用 |
| ワイド粘着テープ | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | N/A | 治療手順中にラットを安定させるため |
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