精神動物モデルにおけるプレパルス阻害と神経活動を評価するための行動ボックスの開発

Summary

このプロトコルは、マイクロコントローラーベースのビヘイビアボックスを提供し、ボックスの下のセンサーから加速度データを収集することにより、プリパルス阻害(PPI)を評価します。このデータは、社会的に隔離されたラットの感覚ゲーティング障害を評価し、行動障害に関する神経生理学研究を進めるために、データをニューロン活動と同期させる方法が追加されています。

Abstract

幼少期の苦痛は、神経発達障害の潜在的な前兆として認識されています。この状態を動物モデルで調査するアプローチの1つは、離乳後の社会的孤立です。げっ歯類におけるこの幼少期の苦痛は、統合失調症患者で観察されるものと同様、前頭前野の体積の減少、樹状突起脊椎密度の減少、腹側被蓋領域でのドーパミン作動性活性の増加など、神経変化を引き起こすことが示されています。プレパルス阻害(PPI)パラダイムは、ヒトモデルと動物モデルの両方で感覚ゲーティングの欠損を評価するための確立された方法です。PPIとは、より弱い音響事前刺激(例えば、65dBパルス)が先行する場合に、より強い音響刺激(例えば、120dBパルス)に対する驚愕反射の抑制を指す。この現象は、精神疾患患者や精神疾患の動物モデルではしばしば軽減されます。この記事では、統合失調症のアクセス可能で費用対効果の高い動物モデルの使用と、モデルからのニューロン記録(電気生理学的記録など)と行動ボックスの同期を可能にする、PPI研究用の行動ボックスを構築するためのプロトコルを紹介します。このカスタマイズされた行動ボックスは、離乳後の分離を受けた自由に行動するげっ歯類の驚愕反応を効果的に検出し、同時にニューロンを記録するPPI評価を促進しました。

Introduction

統合失調症(SCZ)と診断された人は、しばしば感覚運動障害を呈します。感覚刺激に対する反応の低下と、多様な感覚入力からの関連情報の識別の困難さは、これらの患者でしばしば報告されます^1,2。健康な人にとっては、強い刺激の前に弱い刺激を与えると、強い刺激に対する通常の驚愕反射が減少します³。この現象はプレパルス阻害 (PPI) として知られており、SCZ 患者および SCZ⁴ の動物モデルにおける感覚ゲーティング欠損の調査に使用されています。

音響PPI課題では、単一の強い音響パルス(例えば、~120dB)に対する驚愕反応と、同じ刺激が短い間隔(30〜500)で弱い刺激(例えば、~65dB^{)によって}先行された場合の驚愕反応と比較される^3,4。健康な人では、弱いプレパルスが提示されると、パルスに対する驚愕反応は減少します(単一の強いパルスのみに対する驚愕反応と比較した場合)。この現象は、SCZの個人では抑制され、強いパルス^1,5,6,7,8の前に弱いプレパルスが提示される場合でも、驚愕反応の抑制が少なくなります。

SCZ患者と同様に、中脳辺縁系ドーパミンの過剰活動を持つラットも音響PPI⁹の低下を示し、このパラダイムは統合失調症の動物モデルにおける行動的および生理学的変化を調査するための有用なツールとなっています。一般に、PPI用の市販の装置は、センサー、スピーカ、および実験パラメータ(パルス間間隔や刺激強度など)の設定、げっ歯類の驚愕反応の記録、およびデータの処理のためのソフトウェアを含む音響チャンバーで構成されています。ただし、商用システムでは、カスタマイズ オプションが限られていることが多く、コストがかかります。柔軟な研究装置を構築するためのDIY(Do-It-Yourself)アプローチは、機器へのアクセスを増やし、知識を移転しています¹⁰。PPIのような感覚運動ゲーティングメカニズムを研究するためのDIYソリューションは、有効性と信頼性を確保するためにいくつかの重要な要素を考慮する必要があります。重要な考慮事項には、設計仕様、環境と光の制御、音の減衰、刺激供給システム、行動測定センサー、データ収集と分析などがあります。

行動ボックスのDIYソリューションは、オペラント舐め実験¹¹、聴覚識別課題^12、前肢機能¹³など、さまざまな機能のために開発されてきた。ビデオトラッキング¹⁴に焦点を当てたDIYアプローチがいくつかありますが、このタイプのデータを分析するには高い計算リソースが必要です。オープンソースのハードウェアおよびソフトウェアプラットフォームを使用して、カスタマイズされた実験^15,16,17をテストし、自由に行動する動物のニューロン記録を同期させる柔軟性を備えた低コストのPPI行動ボックスを構築することができます。

この記事では、SCZ様症状の発症に寄与する早期ストレスである離乳後隔離ラットモデルを調査するための低コストのプラットフォームでPPIを評価するための行動ボックスを開発する方法を紹介します。

Protocol

動物実験は、「実験動物の世話と使用に関するガイド」に従って実施しました。このプロジェクトは、CEUA Santos Dumont Instituteの倫理委員会によって承認されました(承認番号04/2016)。PPI試験では、35匹のWistarラット(3か月齢、290-490 g、雄19匹、雌16匹)をPPIボックスで個別に評価しました。35匹のラットはすべて、離乳後の隔離のプロトコルを受け、温度23°C、湿度70%の12/12時間の光サイクルの下で、食物と水に 自由 にアクセスできる制御された施設で個別に飼育されました。本試験で使用した試薬および機器の詳細は、 資料表に記載されています。

1. PPIボックス

1. 長さ25cm、幅20cm、高さ25cmのアクリル製の透明ボックスを作成して、有線のヘッドステージで自由に行動するラットを維持します。この高さは、ラットが逃げるのを防ぎ、神経細胞の記録のためにヘッドステージを自由で安全に保つために重要です。
   1. 粘着性のゴムパッドを使用して、アクリルボックスを外部の機械的振動(例:実験室のベンチと他の機器)から隔離し、加速度計を他の部品(例:ベンチやワイヤー)と物理的に接触しないようにボックスの下に取り付けます。
      注意: タスクの要件(マウス、ラット、マーモセットなど)に応じて、透明なアクリルボックスのサイズを調整します。
2. リボンケーブル(26 AWG)を加速度計ボードの4つのピン穴(VCC(電圧)、GND(グランド)、SCL(シリアルクロック)、SDA(シリアルデータ))に直接はんだ付けします。アクリルの中央と加速度計の平らなフェースボードを清掃します。シアノアクリレート接着剤またはエポキシ樹脂を使用して、加速度計をアクリルボックスの下にしっかりと取り付けます。
   1. 完全に治るまで待ちます(図1)。リボンケーブルの反対側を、VCCから3.3V、GNDからGND、SCLからSCL(I2C SCL)、およびSDAからSDA(I2C SDA)のようにマイクロコントローラに接続します。加速度計は、他の部品(ベンチやワイヤーなど)と物理的に接触しないように、ボックスの下に取り付けてください。
      注:DYI加速度計とマイクロコントローラーにはいくつかのブランドがあります。マイクロコントローラと加速度計のサイズとタイプは、使用目的とボックスの寸法/仕様によって異なります。各テストセッション後のクリーニング手順を検討し、必要に応じて、はんだ接合部と回路に電子ワニスの層を塗布して、加速度計の金属部品への偶発的な飛沫を絶縁して保護します。比較のために、DYI加速度計と市販の加速度計を箱の下に並べて取り付けました。
3. 厚さ15mmの中密度繊維板(MDF)を使用して、正面ドアと80cmのエッジを備えた防音チャンバーを作成します。ボックスの内側をアコースティックフォームで裏打ちします。アクリルボックスの20cm上にスピーカーを置き、ヘッドステージとケーブルが自由に動くようにします。
   1. 市販のオーディオ検出器を介して、コンピュータのオーディオ出力をマイクロコントローラボード(アナログ入力およびGND)とスピーカに接続すると、スピーカから音響刺激を受信し、TTL(トランジスタ-トランジスタロジック)イベントマーカーを生成して、行動データとニューロンデータを同期させます(図2)。
      注:実験要件に従って音響チャンバーを構築します(たとえば、カメラ、追加の照明、スピーカーの必要性を考慮してください)。抵抗分圧器(10kΩおよび10kΩの抵抗など)を使用して、コンピューターのオーディオを0〜5Vのマイクロコントローラーアナログ入力範囲に出力します。市販のオーディオ検出器デバイスは、オーディオ入力を受け取り、コンピューターから送信される各音響刺激に対して、刺激開始マークとしてTTL(Transistor-Transistor-Logic)を送信します(0〜0.4 Vはロー状態、2.8〜5 Vをハイステートと見なされます)。一般に、電気生理学システムには、TTLまたはアナログ信号(オーディオ刺激など)を受信するためのメスBNC入力ポートがあります。
4. マイコンボードとパソコンをUSBケーブルで接続します。マイクロコントローラボードの統合開発環境ソフトウェアを開きます。
   1. 対応する マイクロコントローラボード、 COMポート、および ボーレートを選択します。ファイルスケッチを開き、コンパイルして、コードをマイクロコントローラーボードにアップロードします。 モニターのシリアルポート をクリックして、受信データを確認します。開発環境ソフトウェアを閉じます。
      注意: マイクロコントローラーボードをUSB 経由で コンピューターに接続すると、COMポートが割り当てられます。Windowsのコントロールパネルでデバイスマネージャを開き、 ポート (COMおよびLPT)をクリックして、マイクロコントローラに割り当てられたCOMポート(COM番号)を確認します。COM 番号は、開発ソフトウェアの COM ポート設定と一致している必要があります。スケッチの例は、https://github.com/neurodeveloperISD で入手できます。
5. デジタルサウンドレバーメーターは、動物が箱に入るのと同じ場所に置きます。ドアを閉めた状態でチャンバー内のバックグラウンドノイズを確認してください。音響刺激を再生し、サウンドレベルメーターの検出範囲(30〜80 dBまたは80〜130 dB)を調整して、コンピューターから送信される音響刺激レベルを調整します。
   注:実験プロトコルによれば、好ましいオープンソース言語(Pythonなど)を使用して、異なる刺激シーケンスを作成することができます。この研究では、68 dBのホワイトノイズをランダムなプリパルスとパルスの組み合わせで7分間示しました。ファイルをwaveファイルとしてエクスポートし、プレパルス/パルスの組み合わせのテーブルシーケンスをオフライン解析用にエクスポートします。
6. 優先するオープンソースソフトウェアプログラムを開いて、シリアルポートデータを取得して保存します。COMポート、マイクロコントローラボード、およびボーレートを設定します。 [接続 ]をクリックして、生データまたはチャートを読み取ります。 「保存 」をクリックして、実験のデータの記録を開始します。
   注:シリアルポートを記録するためのオープンソースソフトウェア(CoolTerm、Pythonなど)と市販のソフトウェア(Matlabなど)があります。
7. 動物を配置する前に、各コンポーネント(刺激伝達、反応検出)が適切に機能していることを確認してください。刺激のタイミングとシーケンスを確認します(選択したPPIプロトコルに従って)。加速度計の応答を正確に検出し、記録することを確認します。
8. 応答データを収集して分析し、PPI効果を評価します(ステップ5)。統計ツールを使用して結果を解釈し、感覚運動ゲーティングの欠損を評価します。

図1:ビヘイビアボックスの下にしっかりと取り付けられた加速度計。 この図は、データ比較用の低コストの加速度計ボード(左)とハイエンドの商用加速度計(右)を示しています。加速度計はアクリルボックスにしっかりと取り付け、フラットケーブルはアクリルに取り付けて、清掃手順や動物の交換によるアクリルの破損を防ぐ必要があります。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

図2:統合マイクロコントローラベースのビヘイビアボックス。 アクリルボックスの中にネズミがいて、有線のヘッドステージが脳電気生理学記録システムに接続された様子を模式図で示しています。マイクロコントローラーに接続されたボックスの下にある加速度センサーは、3軸加速度センサーのデータをコンピューターに送信し、オフラインデータ処理のための刺激トリガーマークを取得します。スピーカーがノイズ、バックグラウンド、サウンドパルスを再生し、加速度計データのマーカーをトリガーします。マイクロフォンは、音響刺激を取得して電気生理学的データと同期します(たとえば、タスク中の発声行動を取得します)。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

2. ラットの離乳後隔離法

1. 離乳直後(生後17^日目から 21^日目 )にラットの子犬を個々のケージに隔離し、出生後最低90日間隔離します。
2. 確立されたプロトコル^18,19 を使用して、出生後 90 日後に脳神経外科微小電極アレイ インプラントを実行します。
3. 手術後7〜10日後にPPIタスクを実施します(ステップ4を参照)。

3. 電極アレイ脳移植術の手技

1. 微小電極アレイは事前に滅菌する必要があります(この研究では、直径50μmのタングステンワイヤーを32本使用しました、 図3A)。イソフルラン麻酔(0.5 L / min O₂で5%)を備えた隔離された箱に動物を置きます(施設で承認されたプロトコルに従って)。
2. 動物を箱から取り出し、麻酔鼻コーン(0.5 L /分O₂で1%)を使用してイソフルラン麻酔下に保ちます。アトロピンを0.05 mg / kgの筋肉内投与します。.消毒液を使用して椎弓板で動物の頭を剃ります。5分後、ケタミンを70 mg / kgで腹腔内投与し、キシラジンを3 mg / kgで筋肉内投与します。.
3. 吸入可能なイソフルラン(0.5 L / min O₂で1%〜5%)の多軸定位固定装置で37±0.2°Cの加熱パッドに動物を置きます。.直腸センサーを挿入して加熱パッドを制御し、直腸センサーを挿入してPO₂ の飽和度と心拍数を監視します。酸素飽和度が95%を超え、心拍数が200〜300bpmであることを確認してください。
   注:外科的処置全体を通してこれらのパラメータを観察し、必要に応じてイソフルラン濃度を調整します。
4. 滅菌眼科用潤滑剤を動物の目に塗布し、滅菌外科用ドレープで動物を覆います。.
   注:無菌条件下で次のすべての外科的処置を実施します。
5. 動物の頭部領域の手術野を開き、縫合糸(4-0)を使用して皮膚で固定します。リドカイン20%を動物の頭蓋骨に皮下投与し、頭部皮膚の縦方向切開(~1.5 cm)を行い、続いて頭蓋骨膜を切除します。.過酸化水素で骨表面を洗浄します。
6. 開頭術の精度を高めるために、特に複数の脳領域から記録する場合は、ブレグマとラムダを同じ水平面に位置合わせします (この研究では、腹側被蓋野、扁桃体、側坐核、海馬、前頭前野から記録されました、 図 3B)。
7. ロボットドリルでバリ穴の位置に印を付け、硬膜に穴を開けずに開頭術の頭蓋骨の離れた場所の分散位置に3〜4本のネジを挿入します(図3C、D)。
8. 手動頭蓋切除術¹⁹を実施し、デンタルドリルを使用して脳ターゲットに対して最高速度で開頭術の周囲をドリルアウトします(図3E)。
9. 骨を取り除き、硬膜を滅菌生理食塩水で保持し、硬膜を取り除きます。
   注:深度の精度を危険にさらす可能性のある脳損傷を防ぐために、硬膜を抽出するプロセス全体に注意してください。
10. アレイの電極を頭蓋切除位置に配置し、最も深い位置の電極が脳組織に軽く触れるまで電極アレイを下に移動します。電極の電気的接地には、頭蓋骨の表面に配置し、4本のネジの周りに配置したワイヤーを使用します(図3F)。
    注:別の被験者を使用した動物モデル¹⁹ の脳神経外科インプラントのトレーニングを参照してください。
11. 100μmごとに電極を目標位置まで挿入し、デンタルセメントで固定することで、コネクターを頭蓋骨にしっかりと固定し、皮膚から出ないようにします。
    注意: 歯科用セメントを脳組織やコネクタのピン穴に落とさないように注意してください。

図3:微小電極アレイインプラント (A)前辺縁系および下辺縁系PFC、VTA、AMY、NAcc、およびhipc用の50μmのタングステンワイヤー32本を備えた微小電極アレイ。(B)脳のターゲット、ブレグマ、ラムダを示すラットの頭蓋骨。(C)頭蓋切除術とネジの穴あけ位置。(D)微小電極アレイインプラントと頭蓋切除術の図面をサポートするためのネジ。(E)硬膜のない頭蓋骨の開口部。(F)脳を貫通する微小電極。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

4. PPIとニューロンの記録

1. ヘッドステージをラットの頭蓋骨のコネクタインプラントに非常に慎重に接続します。
   注意: この手順は、ヘッドステージオスコネクタのマイクロピンが壊れたり、頭蓋骨の歯科用アクリルが損傷したりしないようにするために重要です。動物は、必要に応じて接続を助けるために、イソフルラン麻酔(0.5 L /分O₂で5%)を備えた箱に入れることができます。麻酔を使用してヘッドステージを接続するときは、イソフルランが洗い流されるのを待って、PPIの行動や脳の活動に影響を与えないようにします。
2. ニューロンデータ収集システムの電源を入れ、マイクロコントローラーまたはオーディオ検出器またはマイクに接続されたTTLジェネレーターを介して音響刺激からデータを受信することを確認します。手順1.6で以前にチェックしたシリアルポートオープンソースレコーダーの電源を入れます。
   注:ラボ施設によっては、これらの同期手順が異なる場合があります。
3. 電気生理学取得ソフトウェアを使用して、電気生理学的(スパイクおよび局所電位)および加速度計データの取得を開始します。
   注意: 入力データを確認し、ゲイン設定を調整して、信号がクリッピングされたり、スパイク波形やスパイク検出しきい値が検出されなくなったりしないようにします。記録システムと記録されたデータにもよりますが、ゲインとスレッショルドはオンラインモードでのみ調整できます。低周波信号 (LFP) (通常は 0.5 Hz から 100 Hz)、高周波 (スパイク) (通常は 300 Hz から 5000 Hz)、低周波ノイズ (通常は 50/60 Hz) のフィルタ設定が正しく指定されていることを確認し、オフライン解析を可能にするようにします。
4. 動物を白色バックグラウンドノイズ(~68 dB)に7分間さらし、すべてのタイプのパルスを各タイプに10回ランダムに提示します(図4)。 図 4 は、このプロトコルで使用される 5 種類のパルスの例を示しています: パルス 1 (75 dB プレパルス、30 ms インターバル、120 dB パルス)、パルス 2 (85 dB プレパルス、30 ms インターバル、120 dB パルス)、パルス 3 (75 dB プレパルス、100 ms インターバル、120 dB パルス)、パルス 4 (85 dB プレパルス、100 ms インターバル、120 dB パルス)。 パルス5(120dBシングルパルス)。
5. 録音セッションの最後に、集録ソフトウェアの電源を切り、headstageコネクタを外します。

図4:聴覚刺激の種類。 7分間のホワイトノイズと5種類のプレパルス+パルスの組み合わせのイラストセッションがランダムに提示されました。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

5. 電気生理学的・行動学的解析

1. 脳データ、加速度、音響刺激を含む生データを信号処理プラットフォームにインポートします。各音響刺激を中心としたエポックを抽出します。
2. それに応じて平均を正規化して、動物間の値を比較します。シングルパルス(このプロトコルではパルス5)を最大応答として使用し、他のパルスに対する反射をこの値に正規化します。
3. パルス 5 の驚愕振幅を 100% とし、他のパルスをパルス 5 の関数と考えます。
   注:振幅は、3つの加速度計軸(図5A)の二乗平均平方根(RMS)を使用して抽出され、n個の値のセットで驚愕の大きさ(図5B)を表します。RMS は数式²⁰ で、ここで、次のようになります。
   
   ax = 加速度計の x 軸、ay = 加速度計の y 軸、az = 加速度計の z 軸
   t = 音響刺激の開始に 200 ms を加えた値
   n = コレクション値
   パルス 5 に関連するパルス 1 から 4 の RMS 驚愕の割合を計算するには、次のようにします。
   
   RMS_パルス = パルス 1、2、3、4 の RMSstartle
   RMS_pulse5 = パルス 5 の RMSstartle
4. 神経細胞データ収集システムに送られたTTLを用いて、音響刺激を取り巻く脳のデータを解析し、それに応じて反射反応を解析します。

図5:3軸加速度計のデータとRMS。 (A)例示的な三軸加速度計(x、y、z軸(g))のデータは、ベースラインとランダムホワイトノイズ80 PPI刺激の6分間に記録されました。(B) 3 つの加速度計軸 (x、y、z で強調表示された灰色の列、 B で展開) からの RMS 計算を驚かせます。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

Results

プレパルス阻害は、パルス5(120dBのみ)と比較してパルス1と3に差は見られませんでしたが、パルス2とパルス4(p < 0.05)には統計的な差が示されました(図6)。

図6:5種類のパルスにおける聴覚刺激に対する平均応答振幅。 パルス1とパルス3のPPI%はパルス5と違いはありません。パルス2と4(*)のPPI%はパルス5とは異なります。エラーバーは標準エラーを表します。

Discussion

このプロトコルは、脳データ(この例では、局所電界電位とスパイク活性)を記録しながら、自由に行動するWistarラットのプレパルス阻害課題を研究するためのDIY行動ボックスを提示しました。このボックスは、神経科学研究所で一般的に見られるコンポーネントを使用して構築およびカスタマイズできるため、入手しやすく安価です。このようなDIYソリューションにより、実験の設計とパーソナライズの柔軟性も高まります。

DIYシステムを使用すると、低コストや使いやすさなど、多くの利点が観察できます。オープンソースのソフトウェアとハードウェアにより、新しいプロトコルの構築とテストが可能になり、さまざまなアプリケーションでの利用が容易になります。一方、より高度なマイクロコントローラやシングルボードコンピュータに比べて処理能力が低いなどの欠点や制限により、複数の入力センサ(サンプルレートの高いセンサなど)を使用する、より複雑で計算負荷の高いアプリケーションでのDIYシステムの使用が制限される可能性があります。

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
アクリルボックス	カスタムメイド		厚さ5mmのアクリル板、20cm×25cm×25cm
粘着ゴムバンパーパッド	ゴリラのグリット	MPU6050	直径0.8インチ、高さ0.38インチ。アクリルボックスを安定させ、外部振動から隔離するゴムパッド。箱の下にMPU6050があるため、高さは5mm以上にする必要があります。
Arduino 宇野	Arduino	ATmega328P	ATmega328PをベースとしたArduinoマイクロコントローラボードで、14個のデジタル入出力ピン、6個のアナログ入力、16MHzのクロック速度を備えています。
Cedrus stim tracker(オーディオ検出器)	セドラス	https://cedrus.com/stimtracker/index.htm	Cedrus stim trackerは、音響刺激を検出し、TTLマーカーを加速度計データに送信します。
シネプレックスリサーチシステム	プレクソン	https://plexon.com/plexon-systems/cineplex-behavioral-research-system/	電気生理学的データと同期した動物の録画ビデオ。
シアノアクリレート接着剤		MPU6050	箱の下にMPU6050をしっかりと貼り付ける瞬間接着剤。
デジタルサウンドレバーメーター			実験前に設定された刺激を校正するためのデシベルメーター。
IBM SPSS	SPSS(社会科学統計パッケージ、米国)		IBM SPSS Statistics ソフトウェア・プラットフォーム。
マトラブ	マスワークス	https://www.mathworks.com/products/matlab.html	データ解析、アルゴリズム開発、モデル作成のための MATLAB プラットフォーム。
マイクロステンレス鋼ネジ			直径1.2mm、長さ4mmのメガネネジ。
マイクロエレトロードアレイ	社内でカスタムメイド		オムネティクスコネクタとカリフォルニアファインワイヤーのパリレンでコーティングされたタングステン50ミクロンワイヤーを使用しています。
マイク			電気生理学的データと同期した音響刺激を取得するためのマイク。
MPU-6050	インベンセンス	https://invensense.tdk.com/products/motion-tracking/6-axis/mpu-6050/	MPU-6050は、3軸ジャイロスコープと3軸加速度計です。
マルチチャンネルアクイジションプロセッサ	プレクソン	スパイク/LFP	MAP Plexonは、神経細胞の電気生理学的データSPIKE/LFPおよび補助チャネル(マイク、TTLマーカー、加速度計)を取得します。
ニューロエクスプローラ	ネックス	https://www.neuroexplorer.com/	連続記録信号とタイムスタンプ(スパイクトレイン、行動イベント)のNeuroExplorerデータ解析プログラム
ニューロエクスプローラー	ネックステクノルギー	https://www.neuroexplorer.com/	SPIKEおよびLFP神経生理学的データ解析のためのソフトウェア
オフラインソーター	プレクソン	https://plexon.com/products/offline-sorter/#38957t34842	オフラインスパイク選別用ソフトウェア
オフラインソーター	オフラインソーター	https://plexon.com/products/offline-sorter/	Offline Sorterは、オフラインのスパイクソーティングソフトウェアです
直腸動物用SpO2センサー	KTMEDの	FS-03型	小動物用SpO2センサー
リボンケーブル			Arduinoに接続するための細いリボンケーブルMPU6050。
ロボティドリル	ニューロスター	https://robot-stereotaxic.com/drill-injection-robot/	ニューロスター定位固定装置に用いるロボットドリル手動ドリルで交換できます。
話者			スピーカーの範囲は100〜40kHzで、強度は最大150dBです。
定位固定装置	ニューロスター		げっ歯類の脳神経外科に使用される定位固定