ロータリータトゥーマシンによる Xenopus laevis のタトゥー方法

サマリー

ここでは、回転式タトゥーマシンで大人の Xenopus laevis (アフリカの爪のあるカエル)の入れ墨の方法について説明します。適切な入れ墨は、数ヶ月間持続し、研究や記録管理の目的で動物を簡単に区別できるようにする、暗くて読みやすい数字をもたらします。

要約

動物モデルは生物医学研究の範囲を広げ、発生生物学、分子生物学、細胞生物学の理解を深め、研究者がヒトの疾患をモデル化することを可能にします。個々の動物を記録し追跡することで、研究者は研究に必要な動物の数を減らし、動物の健康を改善するための実践を洗練させることができます。哺乳類のマーキングと追跡には、耳のパンチングや耳のタグなど、いくつかの十分に文書化された方法が存在します。しかし、水生両生類の種をマーキングする方法は限られており、既存の資源は時代遅れであったり、効果がなかったり、法外に高価であったりします。この原稿では、ロータリータトゥーマシンで Xenopus laevis をマーキングする方法とベストプラクティスを概説します。適切な入れ墨は高品質の入れ墨をもたらし、研究者が個人を簡単に区別できるようにし、動物の健康へのリスクを最小限に抑えます。また、入れ墨がすぐに消えて動物に不必要な害を及ぼす可能性のある、質の悪い入れ墨の原因を強調します。このアプローチにより、研究者や獣医師は両生類に印を付けることができ、生物学的複製やトランスジェニック系統を追跡し、動物の健康状態を正確に記録することができます。

概要

動物モデルは、人間の健康に関する問題を調査するための便利なツールです。実際には、動物モデルを用いた生物医学研究では、健康な動物コロニーを慎重に組織し、維持する必要があります。倫理的な動物の取り扱いと飼育のためのベストプラクティスは、実験に必要な動物の数を減らし、動物福祉を確保するための実践を洗練することを目的としています¹。Xenopus laevis(X. laevis;アフリカツメガエル)とXenopus tropicalis(X. tropicalis;Western Clawed frog)は、1930年代に南アフリカの医師が最初の妊娠検査を行うためにX. laevisを使用して以来、生物医学研究に使用されてきました²。現代の妊娠検査薬ではカエルは不要になりましたが、Xenopus研究の役割は続いています。生物医学研究にXenopusを使用する利点には、よく注釈されたゲノム³、大量の卵の年間にわたる排卵誘発性⁴、体外受精に適した外部産卵などがあります。これらの特徴により、脊椎動物の発生学と発生学

プロトコル

記載されているすべての動物処置は、ダートマス大学の施設内動物管理および使用委員会によって承認されました。

1. 機器のセットアップ

注:手順のワークフローとベンチセットアップの例が含まれています(図1)。

1. タトゥーガンとフットペダルを電源に接続します。フットペダルを作業面の下に置きます。
2. タトゥーガンの組み立て
   1. 六角レンチまたは六角ドライバーを使用して、グリップのネジを緩めます(図2A、赤丸で囲んだ部分)。
   2. プラスチック製の先端をグリップの奥まで挿入します。ネジを締めて所定の位置に固定します。
   3. グリップの背面に金属チューブを挿入します(図2A)。こちらは調整されますので、半分の長さに差し込んでいきます。ネジを締めて所定の位置に固定します。
   4. タトゥー針をグリップの背面に挿入して、グリップの前面にあるプラスチック製の先端に快適に収まるようにします(図2B)。
   5. 針と金属チューブの背面をチューブクランプに通します。針がプ....

結果

高品質の入れ墨は、カエルの胸に暗くて読みやすいストロークがあり、数フィート離れた場所から明確に区別できます(図5A)。一般に、数字やマーキングは読みやすくするために大きいほど優れていますが、長い名前や数字は、カエルの胸に快適に収まるように小さくすることができます。入れ墨の寿命を判断するのはより困難ですが、高品質のカエルの入れ墨は、少なくとも3〜6か月間は暗くて読みやすいままである必要があります(図5D-D ')。タトゥーが色あせたら、同じ技術で修正することができます。

技術が不十分であっても動物に害を及ぼすことはありませんが、入れ墨がすぐに消える可能性があり(図5B)、より頻繁なタッチアップにつながる可能性があります。過度に入れ墨をすると出血や発赤を引き起こす可能性があり、カエルを間違った回復位置に置くと、意図しない溺死を引き起こす可能性があります。

ディスカッション

人間を入れ墨することは何千年も前にさかのぼる芸術形式であり、人間が自分自身を入れ墨している限り、彼らは動物にも入れ墨をしたり、ブランド化したりしてきました²³。動物、特に哺乳類をマーキングするための機器と技術は、十分に確立され、十分に文書化されており、広くアクセス可能です。動物にマーキングすることは、もともと家畜と盗難の抑止力を区別するためのものでした^が23、生物医学研究におけるその役割も同様に重要になっています。

両生類の入れ墨の利点は、入れ墨が24時間以内に治癒し、良い入れ墨が数ヶ月間続くことです(図5D ')。入れ墨は、両生類の住居と飼育に複数の利点を提供します。入れ墨は、研究者や獣医スタッフが、暗い色合いのタンクでも、見やすく解釈しやすい数字を使用して個々の動物を容易に区別することを可能にします¹⁹。この手順は、2歳以上のカエル

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
3本針ラウンドライナー	ワールドワイドタトゥーサプライ	1203RLB	パッケージ滅菌
5本針ラウンド使い捨てウルトラ	ワイドタトゥーサプライ	HTIPRS5-U	パッケージ滅菌
5本針ラウンドライナー	ワールドワイドタトゥーサプライ	1205RLB	パッケージ滅菌
7本針ラウンドライナー	ワールドワイドタトゥーサプライ	1207RLB	パッケージ滅菌
クリップコード	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
フットペダル	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
インクポット	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
キムワイプ、繊細なタスクワイプフィ	ッシャーサイエンティフィック	06-666A
RCA接続	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
スクリームインクピッチブラック、1オンス	ワールドワイドタトゥーサプライ	SI101
炭酸ナトリウム(NaHCO3)	シグマアルドリッチ	S5761
ステンレススチールグリップ	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
ステルス2.0ロータリータトゥーマシン	ワールドワイドタトゥーサプライ	N / A
ステルス2.0ロータリータトゥーマシンボックスセット	ワールドワイドタトゥーサプライ	STEALTH2セット
発泡スチロール島	N/A	N/A	これは発泡スチロールの冷たい輸送容器の蓋です
トリカイン(エチル3-アミノベンゾネートメタン硫酸塩)	シグマ-アルドリッチ	E10521	注意:刺激性
無漂白ペーパータオル	グレイン	ジャー2U229	ペーパータオルは無漂白でなければなりません、漂白剤は両生類に有毒です
電圧供給	ワールドワイドタトゥーサプライ	N/A
ウォッシュボトル(カエルに安全な水付き)	フィッシャーサイエンティフィ	FB0340923T	カエルの安全な水は脱塩素化されています、pH 7.0-8.5、導電率1200-1800 uS
X. laevis成人女性	Xenopus1	N / A
ジップトップビニール袋	N / A	N / A	このバッグは、発泡スチロールの島を保持するのに十分な大きさである必要があります

ワールド重ック