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方法論記事

肝臓メタボロミクスを用いた貧血治療のための伝統的なハーブシロップのメカニズムの評価

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DOI:

10.3791/67225

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2024年8月30日

 ,  ,  , 
1School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Chinese Medicine, 2School of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, 3Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.

この記事について

サマリー

この研究では、主に、貧血の治療におけるShi-Liu-Bu-Xue Syrupの有効性を調査するための肝臓メタボロミクスの応用を紹介します。

要約

ウイグルの有名な薬として、Shi-Liu-Bu-Xueシロップ(SLBXS)は、20年以上にわたって中国で貧血の治療に広く使用されてきました。しかし、貧血の治療におけるその有効性の根本的なメカニズムは不明のままです。この研究では、貧血の治療におけるSLBXSの潜在的な調節メカニズムを決定するために、肝臓メタボロミクスが主に採用されました。アセチルフェニルヒドラジン誘導性貧血マウスモデルにおけるSLBXSの作用機序を特徴付けるために、肝臓メタボロミクスプロファイリングを実施しました。SLBXSは、肝臓指数、白血球数、血小板数を減少させ、赤血球数、ヘモグロビン、ヘマトクリット値を増加させることが示されました。コアターゲットは、ウェスタンブロッティングを用いた検証のために選択しました。SLBXSは、貧血マウスの肝臓組織におけるHIF-1α、NOS3、VEGFA、およびGLAタンパク質のダウンレギュレーションによって示されるように、主にガラクトース代謝とHIF-1シグナル伝達経路を調節することにより、貧血に対する有意な治療効果を示しました。本研究は、貧血治療におけるSLBXS投与による肝代謝の潜在的な制御機構を明らかにするものである。

概要

貧血は、世界人口の25%、あらゆる年齢の人々、特に青年や妊婦に影響を及ぼし、差し迫った蔓延する世界的な健康問題です1,2,3。早産や妊産婦死亡のリスク増加と関連しており、身体発達障害や心血管機能の低下につながる可能性があります4。この状態はまた、青年期の健康状態に悪影響を及ぼし、感染症や心不全を引き起こす可能性があります5。現在の治療法には、主に輸血、鉄補給、エリスロポエチン療法などがあります。しかし、これらの治療法には、アナフィラキシー、胃腸の不調、鉄分過剰、じんましんなどの欠点や副作用があります1。したがって、貧血の治療には副作用の少ない効果的な薬剤を特定することが重要です。

ウイグル医学を含む伝統的な中国医学には、多因子製剤、マルチターゲット効果、マルチリンク相互作用、多因子疾患の予防と治療における副作用の少なさなど、いくつかの利点があります。Shi-Liu-Bu-Xue Syrup(SLBXS)は、ウイグル医学の注目すべき伝統的な薬剤で、血液強壮剤や血液産生に使用されます。肝臓の熱を減少させる血液調節薬として認められており、貧血治療のためのマイノリティ医薬品の臨床使用に関するガイドラインにも掲載されています。また、中国国家食品薬品監督管理局(Z20026094)6,7,8によってライセンスされています。過去20年間、SLBXSは貧血関連疾患の治療に中国で広く使用されてきました。しかし、貧血を治療するためのその潜在的なメカニズムは不明のままであり、さらなる研究が必要です。メタボロミクスは、疾患、薬物介入、または環境条件9に対する生体システムの動的代謝応答を調べるもので、外部刺激後の生体試料中の代謝バイオマーカーの変化を評価することにより、伝統的な漢方薬の作用機序を解明するためにますます利用されるようになってきている9,10。

したがって、この研究では、貧血の治療におけるSLBXSの根本的な治療メカニズムを決定するために、肝臓メタボロミクスアプローチが採用されました。まず、アセチルフェニルヒドラジン(APH)誘導性貧血マウスモデルを確立しました。次に、肝臓メタボロミクスとガスクロマトグラフィー-質量分析法(GC-MS)およびSLBXS投与後の多変量データ法を用いて、内因性代謝産物の代謝経路を調査しました。最後に、SLBXSの抗貧血効果と分子メカニズムを解明するために、主要な標的を実験的に分析しました。

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プロトコル

すべての実験手順は、湖北中医薬大学(HBUCMS201912015)の実験動物倫理委員会によって承認されました。雄のC57BL/6マウス(体重20-22g)を、相対湿度50%-60%、温度22°C±2°Cの特定の病原体フリールームに収容し、12時間の明かり/12時間の暗サイクルにかけ、餌と水への自由なアクセスを提供しました。実験が始まる前に、すべてのマウスが環境に順応するために1週間与えられました。マウスは、対照群、モデル、Fu-Fang-E-Jiao Syrup(FFEJS、陽性薬、7.8mL/kgで胃内投与)、SLBXS(11.7mL/kgで胃内投与)の4群(n = 12)のいずれかにランダムに割り付けられました。対照群とモデル群のマウスは、同量の生理食塩水を受け取りました。すべてのグループのマウスに、対応する薬物の胃内投与を1日1回、2週間行いました。この研究で使用された薬剤、試薬、および機器の詳細は、 資料表に記載されています。

1. マウスにおける貧血モデルの確立

  1. 電子天びんを使用して2 gのアセチルフェニルヒドラジン(APH)を秤量し、150 mLビーカーに移します。.生理食塩水100mLを加え、APHが完全に溶解するまでガラス棒で攪拌します。
  2. ステップ 1.1 で調製した 2% APH を 1日目、4 日目、7 日目に 200 mg/kg、100 mg/kg、100 mg/kg の用量で皮下注射することにより、貧血のマウスモデルを確立します 11。
    注:初日から、FFEJS(7.8 mL / kg)およびSLBXS(11.7 mL / kg)グループのマウスに、1日1回2週間胃内投与を行いました。対照群とモデル群のマウスは、同量の生理食塩水を1日1回、2週間投与されました。

2.肝臓指数の決定

  1. 実験の最後に、電子スケールを使用して各マウスの体重を量ります。
  2. 2%イソフルランを吸入してマウスに麻酔をかけます。マウスの眼球を絞って、充血して突き出るようにします。鉗子で眼球をすばやく取り除き、ヘパリン処理されたサンプルチューブに血液を採取します。
  3. ステップ2.2で麻酔したマウスを手術用マニピュレーションプレートに固定します。
  4. メスで腹部の正中線に沿って完全に切開します。無傷の肝臓組織12を慎重に解剖して分離し、次いで電子天秤でその重量を測定する。
    注:各マウスの肝臓指数は、次の式を使用して計算されます:肝臓指数=肝臓重量/体重。

3. 血液学的解析

  1. 血液凝固を防ぐために、ステップ2.2からヘパリン化された血液サンプルを含むチューブを静かに振ってください。.
  2. 血液サンプルを注射針の下に置いて、注射針に完全に浸されていることを確認します。
  3. 自動検出ボタンをクリックすると、全自動血液細胞分析装置を使用して赤血球数(RBC)、ヘマトクリット(HCT)、白血球数(WBC)、ヘモグロビン(HGB)レベル、および血小板数(PLT)が測定されます。

4. 肝臓メタボロミクス研究

  1. 肝臓サンプル調製
    1. ステップ2.4の肝臓組織サンプル(50 mg)を、予め冷却したメタノール1 mLでホモジナイズします。18,759 x g で4°Cで10分間遠心分離し、沈殿物を除去します。
    2. 上清200μLをピペットでサンプルバイアルに移し、凍結乾燥機で35°Cで2時間真空乾燥します。
    3. 乾燥したサンプルを、ピリジン中の塩酸メトキシアミン40 mg/mL溶液40 μLと40 μLを30 °Cで90分間反応させます。 次に、80 μLのN-メチル-N-(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド(MSTFA)と1%トリメチルクロロシラン(TMCS)を加え、37°Cで60分間インキュベートします。
    4. 10 μLのn-ヘキサンをバイアルに添加して、誘導体化反応を終了します。
  2. 肝臓代謝分析
    1. 誘導体化したサンプル(1 μL)をGC-MSシステムを使用して分析します。DB-5MS キャピラリーカラム (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm) を使用して誘導体を分離します。
      注:オーブン温度プログラムの条件は次のように設定されました:60°Cで1分間。10 °C/分の速度で325 °Cまで上昇させ、10分間維持します。インジェクター、イオン源、MSの温度はそれぞれ250°C、230°C、150°Cに設定しました。キャリアガスにはヘリウム(99.999%)を流速1.1mL/minで用い、分割比を10:1とした。70 eVの電子ビームエネルギーと5.9分の溶媒遅延時間を使用しました。
  3. データ処理と分析
    1. 互換性のあるMassHunterソフトウェアを使用して、生のGC-MSデータを取得および変換します。
    2. Automated Mass Spectral Deconvolution and Identification System(AMDIS)ツール12を使用してスペクトル解析を実施します。
    3. NISTおよびHMDBデータベースを使用して、すべての代謝物を同定します( 「材料表」を参照)。
    4. データをMetaboAnalystツールにインポートして、偏最小二乗判別分析(PLS-DA)、 t検定、経路分析、およびネットワーク分析12を行います。

5. ウェスタンブロット解析

  1. マウスの肝臓組織から総タンパク質を抽出します
    1. ステップ 2.4 の肝臓組織 50 mg と細胞溶解液 250 μL を 1 mL ガラス製ホモジナイザーに加え、氷上で 5 分間粉砕します。
    2. ステップ5.1.1の肝臓組織ホモジネートをピペッターを使用して1.5 mLの微量遠心チューブに移し、18,759 x g で4°Cで10分間遠心分離します。 次に、ピペッターを使用して上清を新しい1.5 mLチューブに移します。
  2. タンパク質濃度の測定とタンパク質サンプルの前処理
    1. ステップ5.1.2から2μLの上清、18μLのPBS、および180μLのBCAワーキング溶液を96ウェルマイクロタイタープレート8に加えます。
    2. プレートを発振器で30秒間振動させ、37°Cで30分間放置し、マイクロプレートリーダーを使用して562nmでの吸光度を決定します。
  3. SDS-PAGEを用いて全タンパク質を分離し、ポリフッ化ビニリデン膜に移し、5%脱脂乳でブロックします8。
  4. ステップ5.3のメンブレンをHIF-1α(1:1000)、VEGFA(1:1000)、GLA(1:1000)、NOS3(1:1000)、およびβ-アクチン(1:5000)に対する一次抗体と4°Cで一晩インキュベートします。
  5. ステップ5.4のメンブレンを抗体インキュベーションボックスに入れ、TBST10 mLを加え、室温で111 x g で水平に振とうして、結合していない一次抗体をそれぞれ5分間3回洗い流します。
  6. ステップ5.5から各メンブレンにヤギ抗ウサギIgG (H + L)-HRP (1:1000)200 μLを添加し、室温で2時間インキュベートします。次に、ステップ5.5を繰り返して、未結合の二次抗体(ヤギ抗ウサギIgG(H + L)-HRP)を洗い流します。
  7. ステップ5.6から各メンブレンの表面に200μLの超高感度ECL化学発光溶液を添加し、自動化学発光イメージング分析システムを使用してタンパク質バンドをすぐに可視化します。

6. 統計分析

  1. 統計ソフトウェアとグラフ作成ソフトウェアを使用して、一元配置分散分析とそれに続くテューキー検定を使用してデータを分析します。
  2. 結果を平均±標準偏差(SD)として表示し、0.05< P値を 統計的に有意と見なします。

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結果

貧血のマウスモデルの成功した確立を確認し、貧血に対するSLBXSの影響を分析するために、肝臓指数と血液学的パラメータが最初に調査されました。 図1 は、モデル群が対照群と比較して、赤血球数(RBC)、ヘモグロビン(HGB)、およびヘマトクリット(HCT)の有意な減少(P < 0.01)を示したことを示しています。逆に、モデル群の肝臓指数、白血球数(WBC)、血小板数(PLT)は著しく高かった(P < 0.05 または P < 0.01)。これらの結果から、貧血モデルが成功裏に確立されたことが確認された。肝臓指数、WBC、およびPLTは、モデル群と比較してSLBXS群で有意に低かった(P < 0.05 または P < 0.01)一方、モデル群の減少したRBC、HGB、およびHCTは、SLBXSによる治療後に著しく上昇しました(P < 0.05 または P < 0.01)。SLBXS群とFu-Fang-E-Jiao ...

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ディスカッション

貧血は、世界中の多くの人々、特に発展途上国で罹患している一般的な状態です1。中国では、患者は貧血の兆候や症状を緩和するために、ウイグル医学を含む伝統的な漢方薬を頻繁に使用しています。SLBXSは、長年にわたって臨床診療で使用されてきたウイグルの薬です。しかし、貧血に対するその正確な作用機序は、まだよくわかっていません13。本研究では、アセチルフェニルヒドラジン(APH)誘発性貧血のマウスモデルを確立し、メタボロミクス解析を通じてSLBXSの貧血治療の根底にあるメカニズムを解明しました。

メタボロミクスは、生体サンプル中の低分子代謝物の定性的および定量的分析を通じて、疾患の診断、潜在的なバイオマーカーの発見、疾患の病因の探索を行うための貴重なツールです。この研究では、アセチルフェニルヒドラジン(APH)を使用して貧血のモデルを構築しました。APHは、特にグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼを妨害することにより、赤血球にゆ...

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開示事項

著者は何も開示していません。

謝辞

この研究は、新疆ウイグル自治区自然科学基金会(2020D03021)、湖北中医薬大学伝統中国医学の主要プログラム基金(2022ZZXZ004)、天山イノベーションチームプログラム(2020D14030)の支援を受けました。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
アセチルフェニルヒドラジン上海アラジン生化学技術有限公司
自動化学発光イメージング解析システムShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
ビシンコニン酸アッセイキットサーモフィッシャーサイエンティフィックQPBCA-1KT
キャピラリーカラムAgilent J&W Scientific、Agilent Technologies, Inc.DB-5MS
Cell lysis buffer for Western and IPBeyotime BiotechnologyP0013
ChlorotrimethylsilaneShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
電子天びんMettler-Toledo International Inc.ME203E
電子スケールメトラー・トレド・インターナショナル社LE104E
Fu-Fang-E-Jiaoシロップ東E江Jiao株式会社
自動血液細胞分析装置Shenzhen Mindray Animal Care Technology Co., Ltd.IDEXX ProCyte Dx
GC-MSシステムアジレント・テクノロジーズ社7890B-5977B 
GLA一次抗体Bioworld TechnologyBS77041
ガラスホモジナイザーShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
ガラス棒 上海雷古楽器有限公司B-003904
GraphPad Prismソフトウェア GraphPad、ラホヤバージョン9.0
ヘパリン化サンプルチューブChangdeBKMAM Biotechnology Co.、Ltd.B-ACT1P5
HIF-1α 一次抗体Bioworld TechnologyBS3514
HMDB データベースhttp://www.hmdb.ca/—
イソフルラン河北金大府製薬有限公司
オス C57BL/6 マウスLiaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd.いいえ。SCXK [Liao] 2015-0001
MassHunterAgilent Technologies, Inc.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
メトキシアミン塩酸塩Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
n-ヘキサン上海アラジン生化学技術有限公司
C14878803 NIST データベースhttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
NOS3一次抗体Bioworld TechnologyBS3625
PyridineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
生理食塩水バイオシャープ ライフサイエンス
Shi-Liu-Bu-Xue Syrup新疆ウイグル自治区ウイグル製薬株式会社
手術操作プレートDIXSGZK-JPB-A
VEGFA 一次抗体Bioworld TechnologyAP0742
β-actinABclonal (Shanghai) Trading Co., Ltd.AC026
C13979660 P0013 Chlorotrimethylsilane Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd. (ウェスタンおよびIP用) Beyotime Biotechnology C104814214020031全20231202E1818113C13026996 2308262009 211277

参考文献

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

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