この論文では、標準的な眼科手術技術を使用してウサギモデルで視神経クラッシュを実行するための詳細な手順を示します。
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この論文では、標準的な眼科手術技術を使用してウサギモデルで視神経クラッシュを実行するための詳細な手順を示します。
視神経クラッシュ(ONC)は、視神経障害のメカニズムと潜在的な治療介入をモデル化および研究するために使用される実験的手法です。ONC研究では、主にげっ歯類モデルが利用されています。ただし、これらのモデルは人間とは解剖学的および生理学的に顕著な違いを示しており、翻訳可能性が制限される可能性があります。ここでは、人間の目により近い球体寸法を持つウサギでONCモデルを達成するための外科的手法について説明します。開発された手術技術は、斜視や眼形成手術で使用される眼科手術技術を利用しており、骨窓やカントトミーの作成を必要としません。このモデルは、ONC前後のさまざまな照明条件および視覚誘発電位(VEP)下での瞳孔反応の評価を通じて検証されました。その結果、未治療の対側眼と比較して、ONC眼の瞳孔反応とVEP振幅の両方が有意に減少することが示され、予想通り、損傷後の視覚機能の喪失を示しています。この外科的技術は、視神経損傷を調査し、潜在的な治療戦略をテストするためのモデルを提供する可能性があり、眼の神経変性疾患の理解と治療に幅広い意味があります。
視神経クラッシュ (ONC) 技術は、視神経障害 1,2,3 の調査に必要な制御された視神経損傷モデルを生成するための実験的アプローチです。ONCモデルは、視神経に局所的な損傷を誘発し、軸索損傷や網膜神経節細胞変性を引き起こすことにより、外傷性視神経障害や緑内障など、さまざまな視神経障害の病理学的特徴の一部をシミュレートします4,5,6,7。この制御モデルにより、眼科および神経科学8,9,10,11,12,13,14における神経損傷、変性、および潜在的な再生の根底にあるメカニズムの詳細な調査が可能になります。
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本研究では、ニュージーランドの白ウサギ(4.4 - 4.8 kg)を利用しました。動物実験の設計は、眼科および視覚研究における動物の使用に関するARVOガイドラインに準拠していました。スタンフォード大学の動物管理委員会は、これらの実験を審査し、承認を与えました(プロトコル番号:APLAC-33781)。
1.オンシー
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視覚機能を評価するために、図4に示すように、薄明視およびフラッシュ照明条件下で、瞳孔の直径(図4Aの黄色の実線)と白から白の直径(図4Aの黄色の破線)の比率を見つけることにより、瞳孔反応を定量化しました。ONC手順の前に、光に反応して瞳孔の実質的な狭窄が観察されました。しかし、ONCの1〜3日後、ONC前の同じ測定値と比較した場合、同様の照明条件下で瞳孔径はほとんどまたはまったく変化を示さなかった(図4E;p < 0.0001、対応のあるt検定)。この反応性の低下は、ONC処置後の視覚機能の著しい喪失を示しています。
視覚機能をさらに評価するために、ONCの眼と未治療の反対側の眼の両方からVEP波形を記録しました(図5)。P1の潜時は有意差なく一貫.......
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この研究では、ウサギでONC手順を実行するための詳細なプロトコルを紹介し、視神経にアクセスするための侵襲性の低いアプローチを強調しています。以前の報告では、包括的な説明や視覚的なガイダンスが欠けていたり、インプラント、側方カントミー、骨切除術、および/または骨切除が必要だった19,20,21,22,23,24,25など、より侵襲的な技術に依存していた。私たちの方法は、斜視や眼形成術で一般的に使用される標準的な眼科技術を採用しており、再現性のある一貫した視神経損傷を可能にします。
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著者には、対立や競合する金銭的利益はありません。
この研究は、国立眼病研究所の助成金K08-EY033407およびP30-EY026877、および失明予防研究の支援を受けました。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 8-0 コーティングされたビクリルバイオレット縫合糸 TG140-8 ダブルアームド | Ethicon | J547G | 視神経クラッシュ手順に使用 |
| アンチセダン (塩酸アティパメゾール 5.0 mg/mL 溶液) | Zoetis | NDC:54771-6293 | 手術用途に使用 |
| ボンタイイング鉗子 角度付きチップ 0.2mm、チタン | タイタン メディカル | TMF502 | 視神経クラッシュ手順 |
| に使用カストロビエホ ニードルホルダー 湾曲、チタン | タイタン メディカル | TMH105 | 視神経クラッシュ手順に使用 |
| カストロビエホ縫合鉗子 1x2 0.12mm ストレート、チタン | タイタン メディカル | TMF411 | 視神経クラッシュ手順に使用 |
| セレニア (クエン酸マロピタント 10 mg/mL 溶液) | ゾエティス | NDC:54771-8179 | 手術用途に使用 |
| 使い捨てステンレス鋼皮下針電極 | Natus | 019-476600 | 視覚誘発電位検査に使用 |
| Euthasol (390 mg/mL ペントバルビタール ナトリウムおよび 50 mg/mL フェニトイン ナトリウム) | Virbac | NDC: 51311-050 | 安楽死に使用 |
| Graefe Muscle Hook、チタン | Titan Medical | TME133 | 視神経クラッシュ手順に使用 |
| インスリンシリンジ 1/2 mL、29 G、1/2 インチ | モノジェクト | 8881600350 | 硝子体内注射に使用 |
| ジェイムソンマッスルフック | タイタンメディカル | TME122 | 視神経クラッシュ処置に使用 |
| マクファーソン結束鉗子ストレートチップ0.2mm、チタン | タンメディカル | TMF501 | 視神経クラッシュ処置に使用 |
| ノルモソル-R(バランス電解質の等張溶液、クリスタロイド液) | ICUメディカル株式会社 | NDC:0990-7670 | 手術用途に使用 |
| オフロキサシン点眼液 0.3% | Bausch &Lomb | 60505-0560-0 | 術後塗布に使用 |
| オリンパス FLUOVIEW FV3000 | オリンパス | FLUOVIEW FV3000 | 共焦点レーザー走査顕微鏡 |
| フェニレフリン HCl 2.5% 点眼液 | Bausch &Lomb | 82260-102-10 | 術前アプリケーションに使用 |
| ProLong Gold 退色防止マウント剤 | Invitrogen | P36934 | 封入剤 |
| プロパラカイン HCl 0.5% 点眼液 | Bausch &Lomb | 24208-730-06 | 術前アプリケーションに使用 |
| RETeval 視覚電気診断装置 | LKC Technologies, Inc. | RETeval | 視覚誘発電位検査に使用 |
| トロピカミド 1.0% 点眼液 | Bausch &Lomb | 24208-585-64 | 術前適用に使用 |
| Westcott はさみ 湾曲した | Titan Medical | TMS401 | 視神経の破砕手順に使用 |
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