ここでは、糖尿病性心筋症のマウスモデルを確立するためのプロトコルと、治療中にマウスをより穏やかに固定できるマウス電気鍼治療用固定装置をマウスに電気鍼投与します。
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方法論記事
糖尿病性心筋症マウスモデルにおける電気鍼治療前処理のためのマウス電気鍼固定装置の作製
* These authors contributed equally
この記事について
サマリー
要約
糖尿病性心筋症(DCM)は、心不全に進行する可能性のある糖尿病の合併症であり、薬の使用によって制限されます。電気鍼治療は、糖尿病性心筋症を治療するための伝統的な漢方薬の外用方法として効果的な方法です。マウス電気鍼固定装置は、電気鍼治療中にマウスを簡単かつ優しく固定し、マウスの腹部と手足のツボを露出させることができます。この記事では、マウス電気鍼治療固定装置をすべての手順と注意事項とともに作製し、血糖値などの血液生化学的指標の変化を包括的に記録するための包括的な手段を備えた糖尿病性心筋症のマウスモデルを確立する方法について説明します。実験は、対照群、モデル群、前処理群の3つのグループで行われ、各グループに10匹のマウスがいました。前治療群は、Biaoben ツボ電気鍼治療による前治療を隔日で 1 回、合計 7 回のセッションで治療しました。電気鍼治療後、前治療群のマウスは、糖尿病の症状の軽減を伴う血糖値の低下を示しました。
概要
糖尿病性心筋症(DCM)は、特定の病変の心臓構造と心室拡張期および収縮機能の変化を特徴とする糖尿病の一般的な合併症であり、さらに心不全に発展します。糖尿病患者における主要な死因の1つであり1,2、近年、その有病率の増加が広く注目を集めています3。この疾患の病因には、主にインスリン抵抗性、炎症反応、異常な脂質代謝、酸化ストレス、ミトコンドリア損傷が含まれることがわかっています4,5。
現在、糖尿病性心筋症の臨床治療は、血糖値をコントロールし、心臓病の症状を緩和するための経口薬が中心ですが、薬物反応、腎機能への影響、長期投薬への依存など、一定の制限があります6。鍼灸は、伝統的な漢方薬の外用方法として、糖尿病性心筋症患者の血糖値、血中脂質、炎症反応に対してより良い調節効果があり、臨床効果は注目に値します7。鍼治療は胃腸や腎臓の機能に悪影響を及ぼさず、長期治療は依存症を引き起こしません。Biaoben....
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プロトコル
すべての動物実験は、動物倫理の3R原則に準拠しており、湖北中医薬大学の動物実験倫理委員会(倫理クリアランス番号HUCMS00309300)によって審査および承認されています。ここでは、湖北省疾病管理予防センターから30匹のSPFグレードのマウスを入手しました(品質証明書NO.42010200009690)。
1. 電気鍼固定装置の製作
- 電気鍼治療固定装置の組み立てには、透明なアクリル製の中空プラスチックチューブと本体として電気鍼治療器具を入手してください(図1A)。チューブ内でチューブ本体を維持し、両端の開口部にあるクロージャータブを準備します。各端の中央にある中空チューブに溝を開け、手動で回転可能なネジを使用して各端の溝にクロージャータブを固定します。
- 中空チューブの中央に、長さ約2 cm、幅1 cmの楕円形の穴を3つ、互いに隣接して配置します。両側の穴は、マウスの前肢を引き抜いて前肢の電気鍼治療のための固定に使用され、中央の穴はマウスの胸部と腹部のツボを露出させて胸部と腹部の電気鍼治療に使用できます。
- 中空チューブの端に、中央の溝の両側に対称的に分布する楕円形の穴を開け、マウスの後肢を引き抜いて後肢の電気鍼治療を行うことができます(
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結果
上記の手順に従い、糖尿病性心筋症のマウスモデルを確立しました。HE染色写真(図4)に見られるように、対照群のマウスは無傷の心筋組織構造を持ち、心筋細胞が規則的に配置されており、明らかな病変はありませんでした。モデル群では、心筋細胞が不規則に配列し、一部の心筋細胞が損傷して崩壊し(黒矢印)、間質に明らかな炎症細胞浸潤が観察されました(黄矢印)。モデル群のマウスは心筋損傷を患っていることが示唆されています。前治療群では、マウスの心筋組織構造が明確であり、心筋細胞が不規則に配置され、少数の心筋細胞が損傷して崩壊し(黒矢印)、他の明らかな病変は観察されませんでした。これに対し、対照群の心筋組織には明らかな病変はなく、モデル群の心筋組織の損傷はより深刻でした。前治療群の心筋組織損傷の程度は、モデル群よりも有意に低かった。これは、前治療が心筋損傷を軽減できることを示唆しています。
心エコー検査の心機能指標(図5)は、対照群と比較して、モデル群の左室拡張期末容積と左室収縮末期容.......
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ディスカッション
この研究では、高血糖で糖尿病の徴候を示したマウスを、ストレプトゾトシン溶液の腹腔内注射によって得られたが、これは効果的で認知されているモデリング方法である27。PC6はBiaobenのツボ28の理論に従って、ベンポイントとして選択され、ST36はベンポイントとして選択されました。これらのポイントはすべてマウスの手足にあるため、腹部を露出させて手足を固定できるアクリルチューブは、これらのポイントを針で刺すのに適しています。マウスをチューブ本体に導入して固定し、鍼治療後に電気鍼治療のために電気鍼装置の電源を入れました。電気鍼治療で治療された局所筋肉はわずかに震えているように見えますが、これは正常であり、副作用はありません。
鍼灸は、伝統的な中国医学の重要なツールとして、糖脂質代謝を調節し、炎症反応を改善することにより糖尿病性心筋症を治療します29,30
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開示事項
著者は何も開示していません。
謝辞
この研究は、湖北省自然科学基金会の共同プロジェクト2022CFD024からの助成金によってサポートされています。中国国立自然科学基金会、第81704142号;湖北省中医薬大学、2023年、ダブルファーストクラス、建設、キー、特別科学研究プロジェクト、2023ZZXT005;湖北省伝統中国医学管理局の主要プロジェクトの下で、心筋虚血再灌流障害(MIRI)のラットにおける心筋細胞のフェロトーシスの調節に関するBiaobenツボ電気鍼治療プレコンディショニングのメカニズムを研究すること、ZY2025D001;武漢科学技術局の知識革新プロジェクト、第2023020201010172号。湖北省鎮タレントエンジニアリングプロジェクト、E Wei Han [2024]256。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| アクリル中空プラスチック | 河南智科 | ZK-GDQ | |
| 鍼治療針 | Hwato | 0.3 mm x 13 mm | |
| C57BL / 6 マウス | 北省疾病管理予防 | ||
| エン酸一水和物 | グマ | C1909 | |
| 鍼治療器具 | Hwato | SDZ-V | |
| 電子天びん | 河南Zhike | ZK-DST | |
| グルコースメーターLifeScan | OneTouch VerioVue | ||
| コーステストストリップ | LifeScan | OneTouch Verio | |
| ストレプトゾトシン | グマ | S0130 | |
| エン酸三ナトリウム二水和物 | グマ | W302600 | |
| ピンセット | Labshark | 130302001 |
参考文献
- Dillmann, W. H. Diabetic cardiomyopathy. Circ Res. 124 (8), 1160-1162 (2019).
- Murtaza, G., et al. Diabetic cardiomyopathy - a comprehensive updated review. Prog Cardiovasc Dis. 62 (4), 315-326 (2019).
- Peng, M. L., et al.
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再版と許可
